Şəkər bulyonu və şəkərli agar adi bulyona və ya ərinmiş düz agara 0,5-1% miqdarında bu və ya digər karbohidrat əlavə etməklə hazırlanır. Karbohidrat az miqdarda suda həll edilir və sonra qidalı mühitə əlavə edilir. Şəkər bulyonu və agarın sterilizasiyası hər biri 1 saat olmaqla 3 gün dalbadal Koch aparatında aparılır.
Qan, serum və ya asitik maye agar ciddi aseptik şəraitdə hazırlanır. Bitmiş azca qələvi agara 20-25% steril zərdab və ya assit mayesi və ya 5-25% steril defibrinləşdirilmiş qan əlavə edilir, əridilir və yenidən 45°-ə qədər soyudulur, sınaq borularına və ya flakonlara tökülür. Hərtərəfli qarışdırdıqdan sonra (baloncukların və köpüklərin əmələ gəlməsinin qarşısını almaq) sınaq borularındakı agar biçilir və flakonların içindəkilər Heidenreich qablarına tökülür. Serum, assitik maye və ya qan ilə bulyon agar ilə eyni şəkildə hazırlanır, lakin qızdırılmadan. Sterilliyə nəzarət etmək üçün bulyon 37° temperaturda 48 saat termostata yerləşdirilir.

Diferensial diaqnostik qida mühiti. Tərkibi və məqsədi.

Endo mühiti.İstifadədən dərhal əvvəl hazırlanır. 100 ml ət-pepton agarına və ya Hottinger bulyonu agarına (pH 7,6) steril olaraq 5 ml steril suda həll edilmiş 1 q kimyəvi cəhətdən təmiz laktoza əlavə edin, 70°-yə qədər soyudun və 0,5 ml doymuş əsas məhlulunun qarışığını əlavə edin. fuksin və 1,25 ml təzə hazırlanmış 10%-li natrium sulfid məhlulu çalxalanır və stəkanlara tökülür. Qurumaq üçün açıq fincanlar 30 dəqiqə ərzində 37° temperaturda termostata yerləşdirilir.

Endo mühitində E. coli metal rəngli qırmızı koloniyalar, tif-paratif və dizenteriya qrupunun bakteriyaları isə rəngsiz koloniyalar əmələ gətirir.

Rəngarəng karbohidratlar seriyası (Hiss mühiti). 100 ml suya 1 q pepton və 0,5 q xörək duzu əlavə edin. Pepton və duz bir neçə dəqiqə qaynar suda həll edilir və kağız filtrindən süzülür (məhlul tamamilə şəffaf olmalıdır). pH-ı 7.0-a təyin edin. İstifadə olunan karbohidratlardan birinin 1%-i göstərilən mühitdə həll edilir, qazı tutmaq üçün (şəkərlərin dərin parçalanmasını göstərir) sınaq borularının dibinə üzgüçülüklər endirilir və göstərici əlavə edilir. Aşağıdakılar göstərici kimi istifadə olunur:

a) lakmus tincture - 100 ml mühitə 5 ml. Turşu mühitdə lakmus tincture qızartı göstərir, qələvi mühitdə mavi olur;

b) təmizlənmiş lakmus preparatı olan azolitmin, onun kalium duzu (1 litr mühitə 0,25 q azolitmin əlavə edilir);

c) bromotimol blau - 1 litr mühitə 1 ml 1,6% indikatorun spirt məhlulu (mühit yaşıllaşır, qələvi əmələ gəldikdə mavi olur, turşu əmələ gəldikdə sarı olur);

d) Andrede indikatoru, 1 q turşu fuksin, 400 ml distillə edilmiş su və 64 ml normal natrium hidroksid məhlulundan ibarətdir. Qidalı mühitə 1% göstərici əlavə edilir. Sınaq borusundakı mühit çəhrayı rəngsiz saman-sarı rəng almalıdır. Turşu mühitdə mühitin rəngi qırmızıya dəyişir.

Göstərici karbohidrat fermentasiyasının təsiri altında baş verən qida mühitinin reaksiyasında dəyişiklikləri müəyyən etmək, yəni mikrobların biokimyəvi fəaliyyətini müəyyən etmək üçün əlavə olunur. Sonuncu bir sıra infeksion xəstəliklərin (tif, dizenteriya, vəba və s.) mikrobioloji diaqnostikasında böyük əhəmiyyət kəsb edir. Karbohidratlar və indikator olan media steril borulara tökülür və 3 gün ərzində 100 ° -də fraksiya şəklində sterilizasiya edilir.

Qısa rəngli sıra. E. coli, S. typhi-nin böyüməsi zamanı dəyişikliklər.

Aerobların təmiz kulturalarının ayrılması üsulları.

Driqalski üsulu

Anaerobların təmiz mədəniyyətinin təcrid edilməsi.

Praktik bacarıqlara baxın

Viroloji üsullar. Məqsəd, prinsip.

Viroloji üsul

Əsas mərhələlər:

1. Test materialının toplanması.

2. Sitotropizm prinsipi əsasında seçmə və həssas test sisteminin alınması, onun həyat qabiliyyətinin müəyyən edilməsi.

3. Seçilmiş sistemin yoluxması.

4.Virusun nüklein turşusunun, antigenlərinin, hemaqlütinin, CPD, daxilolmalarının aşkarlanmasına əsaslanaraq göstəricisi.

5. Virusun identifikasiyası və titrlənməsi aşağıdakılar əsasında aparılır:

a) immunoloji reaksiyalardan istifadə etməklə virus antigenlərinin təyini (RIF, ELISA, RPGA, RSK, RN, VIEF və s.); b) orqan və toxumaların patohistoloji müayinəsi; c) CPP; d) klinik simptomlar, bioloji testlər (keratokonyunktival və s.).

Virus aşkarlama üsulları

Hüceyrə mədəniyyətləri viruslarla yoluxduqda virusun təsirinin müxtəlif görünən təzahürləri əldə edilə bilər:

1. Virusun hüceyrə mədəniyyətinə sitopatik təsiri (CPE)- onda görünən morfoloji degenerativ dəyişikliklərin baş verməsi;

2. yoluxmuş hüceyrə mədəniyyətinin qabiliyyətinin əldə edilməsi hemadsorbsiya– hüceyrə qatının səthində eritrositlərin adsorbsiyasına;

3. Xarakterik xüsusi agar örtüyünün sıx təbəqəsi altında yoluxmuş hüceyrə mədəniyyətində formalaşması lövhələr virusların "mənfi koloniyaları" olan;

4. Hüceyrədaxili daxilolmalar

Mədəniyyət vasitələrinin təsnifatı:

Təbii– heyvan və ya bitki mənşəli məhsullardan ibarətdir və qeyri-müəyyən kimyəvi tərkibə malikdir. Məsələn: tərəvəz və meyvə şirələri, heyvan toxumaları, qan, süd, yumurta və s. (IPA, MPB).

Yarı sintetik– tərkibinə məlum kimyəvi təbiətli birləşmələr və tərkibi bilinməyən maddələr daxildir. Məsələn: qlükoza ilə MPB, Endo mühiti, Sabouraud mühiti.

Sintetik– yalnız dəqiq konsentrasiyalarda kimyəvi cəhətdən təmiz birləşmələri ehtiva edir. Laboratoriya təcrübələrində istifadə olunur. Məsələn: Çapek mühiti, Omelyanski, Uşinski və s.

Mədəniyyət mediasının məqsədi

Universal(ümumi təyinatlı) - bir çox növ mikroorqanizmlərin yetişdirilməsi üçün uyğundur və xüsusi qida mühitləri üçün əsas kimi istifadə olunur. Nümunələr: MPB, MPA, Hottinger mühiti, GRM, tioqlikolat mühiti.

Xüsusi sadə mühitlərdə mikroorqanizmlərin böyümədiyi hallarda istifadə olunur. Bunlara qan, zərdablı agar, zərdab bulyonu, assit bulyonu, astsit agar və s.

1. Seçməli mühitlər- bəzi mikroorqanizmlər onların üzərində digər bakteriyalara nisbətən daha sürətli və daha intensiv inkişaf edir. Məsələn, 1% qələvi peptonlu su vibrios vəba, difteriya patogenləri üçün Roux və Leffler mühiti üçün seçmə mühitdir.

2. Seçici - seçici əlavələr (öd, boyalar, antibiotiklər və s.) sayəsində onlar bəzi növ mikroorqanizmlərin inkişafını boğmağa qadirdirlər, lakin digər növlərə təsir göstərmirlər. Nümunələr: Müller mühiti tif-paratif bakteriyaları üçün, furazolidon-aqar korinebakteriyalar və mikrokoklar üçün seçicidir. Mediaya antibiotiklərin əlavə edilməsi onları göbələklər üçün seçici edir (məsələn, Sabouraud mühiti və s.).

3. Diferensial diaqnostika- mikroorqanizmlərin biokimyəvi xassələrini təyin etməyə və onları fərqləndirməyə imkan verən media qrupu. Onlar proteolitik, peptolitik, saxarolitik, hemolitik, lipolitik və reduksiya xüsusiyyətlərini təyin etmək üçün mühitlərə bölünür (Endo, Levin, Ploskirev, Gissa media).

4. Konservant (nəqliyyat) -

mikroorqanizmlərin toplandığı andan canlılığını qorumaq üçün nəzərdə tutulmuşdur

diaqnostika üçün kulturadan əvvəl biomaterial

Maye(bulyonlar) – mikroorqanizmlərin biokütləsinin fizioloji və biokimyəvi xüsusiyyətlərinin və toplanmasının öyrənilməsi

Yarı maye(1% agar) – kulturaların saxlanması və anaerobların becərilməsi

Sıx(3-5% agar) – təmiz kulturaların təcrid olunması, toplanması, kəmiyyət qeydi, mədəni xassələrin öyrənilməsi, antaqonist münasibətlər

Toplu– sənayedə toxumun saxlanması (darı, kəpək)

Quru– qida mühitinin hazırlanması üçün sənaye tərəfindən istehsal olunur

Stuart mühiti ilə nəqliyyat sistemi

Stewart mühiti geniş spektrli patogen mikroorqanizmlərin qorunması və daşınması üçün yarı bərk, qida maddələrindən zəif substratdır. Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphteriae, Trichomonas vaginalis, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp.Ən tələbkar mikroorqanizmlər bu mühitdə bir gündən çox, digərləri isə bir neçə günə qədər yaşayırlar.

Mühitdə tioqlikolatın olması bakteriyaların fermentativ fəaliyyətini boğur, azotun olmaması isə onların çoxalmasına mane olur.

Ətraf mühit ilə nəqliyyat sistemi Keri Blair

Keri Bleyerin daşıyıcısı xüsusi olaraq nəcis nümunələri üçün nəzərdə tutulmuş Stüartın əsas nəqliyyat vasitəsinin modifikasiyasıdır.

Bəzi enterobakteriyaların metaboliti olan qliserofosfat ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, və s.), qeyri-üzvi fosfatla əvəz olunur,

Metilen mavisi çıxarıldı və mühitin pH-ı 8,4-ə qaldırıldı.

Keri Bleyerin mühiti əksər patogenləri, o cümlədən cəld mikroorqanizmləri qorumağa imkan verir. Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp..

Bu mühit anaerobların daşınması üçün standartdır.

Ames mühiti ilə nəqliyyat sistemi

Ames daşıyıcı mühiti əsas Stewart daşıyıcı mühitinin başqa bir modifikasiyasıdır, burada qliserofosfat qeyri-üzvi fosfatla əvəz olunur, çünki qliserofosfat bəzi enterobakteriyaların metabolitidir ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae və s.) və bəzi qram-mənfi mikroorqanizmlərin böyüməsini dəstəkləyə bilər.

Metilen mavisi əczaçılıq dərəcəli aktivləşdirilmiş karbonla əvəz edilmişdir.

Bakterial hüceyrə keçiriciliyini qorumaq üçün mühitə kalsium və maqnezium əlavə edildi.

Bu mühit kimi mikroorqanizmləri dəstəkləməyə qadirdir Neisseria sp., Haemophilus sp., Corynebacteria, Streptococci, Enterobacteriaceae və s., lakin ən yaxşı nəticələr ilk 24 saat ərzində becərilməklə əldə edilir.

Universal zənginləşdirmə mühiti: Ət pepton agar (MPA) və Ət pepton suyu (MPB)

Onlar biyokimyəvi və serotipləşdirmədən əvvəl mədəniyyətlərin təmizliyini yoxlamaq üçün mikroorqanizmlərin aşılanması üçün əsas mediadır.

Onlar iddiasız mikroorqanizmlərin becərilməsi və sayılması üçün istifadə olunur. Yarım maye formada mühit nəzarət (istinad) mikroorqanizmlərini saxlamaq üçün istifadə edilə bilər.

Universal saxlama mühitləri Hottinger mühiti

Enterobakteriyalar, Pseudomonas aeruginosa, stafilokoklar və bəzi növ streptokoklar kimi müxtəlif mikroorqanizmlərin becərilməsi üçün nəzərdə tutulmuşdur. Lazım gələrsə, karbohidratlar və duzlarla zənginləşdirilə bilər.

Tərkibində qiymə ətinin (mal ətinin) pankreatinlə fermentativ hidrolizi, ardınca filtrasiya və konservant kimi xloroformun əlavə edilməsi yolu ilə əldə edilən Hottinger hidrolizatı var.

Universal saxlama mühitləri:Mueller-Hinton mühiti

Bu mühit becərmə üçün istifadə olunur Neisseria sp. və mikroorqanizmlərin antimikrob agentlərə həssaslığını təyin etmək.

Çərşənbə McConkey

MacConkey mediaları enterobakteriyaların və əlaqəli qram-mənfi basillərin selektiv izolyasiyası üçün diferensial mühit kimi tövsiyə olunur.

Laktoza-müsbət suşlar öd duzunun çökmə zonası ilə əhatə oluna bilən çəhrayı və ya qırmızı koloniyalarla böyüyür.

Qırmızı rəng mühitin laktoza parçalanma məhsulları ilə turşulaşması (pH 6,8-dən aşağı düşdükdə) və neytral qırmızının adsorbsiya edilməsi nəticəsində yaranır.

Laktozanı fermentləşdirməyən suşlar (Shigella, Salmonella) adətən şəffaf, rəngsiz koloniyalar əmələ gətirir və ətraf mühiti dəyişmir.

Diferensial diaqnostika mühitləri:Endo orta

Bu mühit Endo tərəfindən laktoza fermentləşdirən və fermentləşdirməyən mikroorqanizmlərin diferensiallaşdırılması üçün mədəniyyət mühiti kimi hazırlanmışdır. Su, tullantı suları, süd və digər qida məhsullarının mikrobioloji müayinəsi üçün istifadə olunur.

Natrium sulfit və əsas fuksin qram-müsbət mikroorqanizmlərə inhibitor təsir göstərir. Laktoza mikroorqanizmlər tərəfindən aldehid və turşuya parçalanır. Aldehid, öz növbəsində, fuksin-sulfit kompleksindən fuksini buraxaraq koloniyaların qırmızı rəngini artırır. E. coli-də bu reaksiya çox qabarıq şəkildə özünü göstərir və fuksinin kristallaşması ilə müşayiət olunur ki, bu da koloniyaların yaşılımtıl metal parıltısı (muxsin parıltısı) ilə özünü göstərir.

Diferensial diaqnostika mühitləri:Sarısı duzlu agar

Bu mühit kliniki əhəmiyyətli stafilokok kulturalarının təcrid edilməsi üçün selektiv mühit kimi istifadə olunur.

Mannitol fermentləşdirilə bilən və fərqləndirici substrat, həmçinin karbon mənbəyidir.

Yumurta sarısı emulsiyasının əlavə edilməsi (v/v 5%-ə qədər) mikroorqanizmlərin lipaz aktivliyini təyin etməyə imkan verir. Duzlu bir mühitdə emulsiya şəffaf olur, buna görə də lipaz aktivliyinin olması ilə koloniyaların ətrafında sarı qeyri-şəffaf zona meydana gəlir.

Diferensial diaqnostika mühitləri:Wilson-Blair və ya bizmut sulfit agar

Salmonellaların təcrid olunması üçün seçici mühit.

Heyvan toxumasının peptik həzmi və ət ekstraktı azotlu qida maddələrinin, karbonun, kükürdün, B vitaminlərinin və bu bakteriyaların inkişafı üçün zəruri olan iz elementlərinin mənbəyi kimi xidmət edir.

Parlaq yaşıl bütün qram-müsbət bakteriyaların böyüməsini maneə törədir. Qlükoza fermentləşdirilə bilən karbohidratdır. Dəmir sulfat hidrogen sulfid istehsalını aşkar edə bilər.

Vismut, Salmonella istisna olmaqla, əksər qram-mənfi bağırsaq bakteriyalarının böyüməsini maneə törədən ağır metaldır.

Salmonellalar qlükoza və vismut sulfitin iştirakı ilə dəmir sulfatı dəmir sulfidə qədər azaldır ki, bu da onların koloniyalarını qara rəngə çevirir.

Xüsusi seçmə mühitlər:Loeffler mühiti

At zərdabının əlavə olunduğu bu mühit becərilməsi üçün istifadə olunur Corynebacterium diphtheriae klinik materialdan və bu mikroorqanizmlərin təmiz kulturalarının subkulturalarından.

Yüksək serum konsentrasiyası mikroorqanizmlərin proteolitik fəaliyyətini, həmçinin piqment əmələ gəlməsini təyin etməyə kömək edir. Pepton və ət ekstraktı mikroorqanizmləri əsas qida maddələri ilə təmin edir. Qlükoza fermentləşdirilə bilən bir substrat və enerji mənbəyidir.

Xüsusi seçmə media:Kampilobakaqar

Qoyun və ya at qanı və antibiotiklərlə qanlı ağar bazasından ibarət Campylobacter üçün selektiv mühit.

Antimikrobiyal komponentlər normal mikrofloranın böyüməsini əhəmiyyətli dərəcədə maneə törədir, böyüməni və nəcisdən çıxarılmasını təşviq edir. Campylobacter fetus ssp. jejuni.

Əlavədə amfoterisin B-nin olması göbələklərin böyüməsini əhəmiyyətli dərəcədə və ya tamamilə boğur; sonradan tətbiq olunan sefalotin normal bağırsaq mikroflorasının boğulmasını gücləndirir.

koloniyalar Campylobacter fetus ssp. jejuni selikli xarakterə malikdir, düzensiz konturları olan düz boz və ya qaldırılmış, yuvarlaq, hemolizsiz.

Bəzi suşlar sarı-qəhvəyi və ya çəhrayı rəngli koloniyalar yarada bilər.

Ortanın nəm səthində birləşən böyümə və ya qaynaşma baş verə bilər.

Seçməli media mikrobioloji təcrübəyə S.N.Vinoqradski və M.Beyerink tərəfindən daxil edilmişdir. Bunlar bir və ya bir neçə kimyəvi birləşmənin əlavə edilməsi ilə bir növ mikroorqanizmin (və ya əlaqəli mikroorqanizmlər qrupunun) inkişafı və çoxalması üçün optimal şəraitin və bütün digərləri üçün əlverişsiz şəraitin yaradıldığı qida mühitidir. Belə mühitlərdən əsasən mikroorqanizmlərin təmiz kulturasının təbii yaşayış yerlərindən təcrid edilməsi və çoxlu kulturaların yığılması üçün istifadə olunur (saf mədəniyyətin təcrid olunması üçün kimyəvi üsul). Məsələn, laxtalanmış at zərdabı olan qida mühiti difteriya bakteriyaları üçün selektiv mühit, vəba vibrionu üçün qələvi peptonlu su, tif qızdırmasının törədicisi üçün öd suyu, brusella üçün qaraciyər bulyonu və s.

Mikrobların selektiv qida mühitlərində toplanması bir çox hallarda ilkin sınaq materiallarından (məsələn, xəstələrin və ya daşıyıcıların nəcisindən vəba vibrio və ya tif bakteriyası və s.) təmiz kulturaların təcrid edilməsində mühüm ilkin addım rolunu oynayır.

Diferensial qida mühiti dedikdə nə başa düşürsünüz?

Diferensial diaqnostik mühitlər mikroorqanizmlərin böyüməsini və inkişafını təmin edən maddələrlə yanaşı, müəyyən fermentlər üçün substrat kimi istifadə olunan maddələrdən ibarət olanlardır. Substratın keyfiyyət dəyişikliyinə əsaslanaraq, müəyyən bir fermentin mövcudluğu müəyyən edilir (qidalı mühitdə substratın parçalanması məhsullarının olmasına reaksiya verən göstəricidən istifadə etməklə qiymətləndirilir).

Mikroorqanizmlərin hər bir növü kifayət qədər sabit fermentlər dəsti ilə xarakterizə olunur. Diferensial diaqnostik vasitələrdən istifadə edərək bir sıra fermentlərin təyini mikroorqanizmlərin növlərini fərqləndirməyə imkan verir. Məsələn, qan agarı hemolizin fermentini, Onun mühitini - saxarolitik fermentləri (karbohidrazlar), mikrobların proteolitik xüsusiyyətlərini nəzərə almaq üçün jelatin və s.

Qanlı ağar. Hemolizin fermentinin olması qırmızı qan hüceyrələrinin məhv edilməsi və qanlı agarda yetişən mikrobların ətrafında işıq zonasının meydana gəlməsi ilə mühakimə olunur.

Onun mediası. Karbohidratları turşuya parçalayan fermentlərin - karbohidrazların olması mühitin pH-nin turşu tərəfə doğru dəyişməsi və qida mühitinin rənginin dəyişməsi ilə ifadə edilir. Fermentlər dəstindəki fərq təcrid olunmuş kulturanın təmizliyini yoxlamaq, həmçinin yoluxucu materialın inokulyasiyasının ilkin tədqiqi zamanı bir növü digərlərindən tez fərqləndirmək üçün istifadə edilə bilər.

Kimyəvi reagentlər

1. Kimyəvi reagentlər nədir və onlar nə üçün istifadə olunur?

Kimyəvi reagentlər- müxtəlif kimyəvi reaksiyaların aparılması üçün laboratoriya praktikasında istifadə olunan maddələr.

Əksər hallarda kimyəvi reagentlər fərdi maddələrdir, lakin çox vaxt mürəkkəb tərkibə malikdirlər. Kimyəvi reagentlərin ümumi qəbul edilmiş təsnifatı yoxdur, əksər hallarda onlar analitik kimyəvi reagentlərə və hər şeyə bölünür.

2. Baytarlıqda hansı məqsədlər üçün istifadə olunur?

Baytarlıqda kimyəvi reagentlərdən klinik, baytarlıq-sanitariya, gigiyenik, ekspertiza, biokimyəvi və digər laboratoriya tədqiqatlarında analitik və diaqnostik məqsədlər üçün istifadə olunur. Bioloji və klinik praktikada istifadə edilən və inkişaf etdirilən tədqiqat metodları geniş çeşidli tələblərə cavab verməli olan kimyəvi reagentlərin geniş spektrini tələb edir. Məsələn, klinik və biokimyəvi tədqiqatlar fermentlər üçün yüksək təmizlənmiş substratlar, fermentlərin özləri, xüsusi qruplar üçün reagentlər (SH, NH3, COOH qrupları və s.) və s. Qeyri-üzvi və üzvi sintezlərin aparılması, həmçinin keyfiyyət və kəmiyyət analizləri üçün, o cümlədən. müxtəlif sənaye sahələrində baytarlıq-sanitariya nəzarəti, analiz) zamanı dərman vasitələrinin baytarlıq, sanitar və gigiyenik analizləri zamanı qida məhsullarının, havanın, suyun və s., çoxlu sayda yüksək təmizlənmiş kimyəvi reagentlərdən istifadə olunur.

1.Tərkibinə görə qida mühitləri bölünür sadə və mürəkkəb

Ümumi təyinatlı mühitlər qrupu var - sadə. Bu qrupa ət-pepton bulyonu (sadə qida bulyonu), ət-pepton agar (sadə qidalı agar), qidalı jelatin daxildir. Bu mühitlər bir çox patogen mikrobların böyüməsi üçün istifadə olunur. Ümumi təyinatlı mühitlər və ya sadə qida mühitləri adətən pepton və natrium xlorid əlavə edilməklə hidrolizatlardan hazırlanır. Onlar həmçinin mürəkkəb media hazırlamaq üçün əsas kimi istifadə olunur.

Həm də tərkibinə görə fərqləndirirlər protein, proteinsiz və mineral mühit.

2. Mənşəyinə görə mühitlərə bölünür süni və təbii (təbii).

Təbii qida mühitində heyvan mənşəli komponentlər (məsələn, qan, serum, öd) və ya bitki (məsələn, tərəvəz və meyvə parçaları) ola bilər.

3. Məqsədinə görə ayırmaq qoruyucu media(ilkin əkin və nəqliyyat üçün), zənginləşdirmə mühiti(müəyyən bir bakteriya qrupunun yığılması üçün), mədəniyyət mediası(universal sadə, kompleks xüsusi və toksinlərin əmələ gəlməsi üçün), təcrid və toplanma mühiti (konservant, zənginləşdirici və seçici) və identifikasiya mühiti(diferensial və seçmə-diferensial).

Konservativ mədəniyyət mediası patogenlərin ölümünün qarşısını alır və saprofitlərin böyüməsini boğur. Ən çox istifadə edilənlər qliserin qarışığı, hipertonik məhlul, LiCl 2 ilə qliserin konservantı, natrium sitrat və natrium deoksixolat məhluludur.

Bakteriyalar üçün zənginləşdirici mühit

Zənginləşdirmə mediası(məsələn, Kitta-Tarozzi mühiti, selenit bulyonu, tioqlikolat mühiti) bəzi növlər üçün optimal, digərləri üçün isə əlverişsiz şərait yaratmaqla müəyyən bakteriya qrupunu toplamaq üçün istifadə olunur. Çox vaxt belə agentlər kimi müxtəlif boyalar və kimyəvi maddələr istifadə olunur - öd duzları, Na+ tetrationat, K tellurit, antibiotiklər, fuksin, gentian bənövşəyi, parlaq yaşıl və s.

Həmçinin təyinatla mühitləri fərqləndirir seçmə, xüsusi və differensial diaqnostika.

Seçmə mühitləri (seçmə, seçmə, toplama, zənginləşdirmə). Selektiv qida mühitlərinin yaradılması prinsipi onların becərilməsi üçün nəzərdə tutulduğu mikrob növünün əsas biokimyəvi və enerji ehtiyaclarının ödənilməsinə və ya müşayiət olunan mikrofloranın böyüməsini maneə törədən inhibitorların əlavə edilməsinə əsaslanır. Qida maddələrinin, mikroelementlərin, böyümə faktorlarının ciddi şəkildə müəyyən edilmiş pH dəyərində müəyyən tərkibi və konsentrasiyası və ya inhibitorların əlavə edilməsi bir və ya bir neçə növ mikroorqanizmlərin yetişdirilməsi üçün optimal şərait yaradır. Üzərinə müxtəlif mikrobların qarışığı olan material əkərkən ilk növbədə ətraf mühitin seçici olacağı növlərin böyüməsi görünəcək. Seçilmiş mühitlərə misal olaraq öd bulyonu, selenit bulyonu, Ploskirev mühiti - bağırsaq ailəsinin mikroblarını yetişdirmək üçün, qələvi peptonlu su - Vibrio vəbaları üçün.

Öd bulyonu. MPB-yə 10-20% öküz öd əlavə edilir. Öd kokkların və hava florasının böyüməsini maneə törədir, lakin salmonellaların yayılması üçün əlverişlidir.

Selenit bulyonu. Bu, kokkal flora və Escherichia coli böyüməsinin inhibitoru olan, lakin salmonellaların böyüməsini maneə törətməyən selenitin natrium duzunun əlavə edilməsi ilə fosfat bulyonundan ibarətdir.

Çərşənbə Ploskireva. E. coli, coli inhibitorlarını ehtiva edən, lakin Shigella və Salmonellaların inkişafı üçün əlverişli olan, çoxalması parlaq yaşıl və öd duzları ilə maneə törədilməyən sıx bir mühit.

Peptonlu su. Tərkibində 1% pepton və 0,5% natrium xlorid var. Vibrio vəba üçün mühit seçicidir, çünki onlar “ac mühitlərdə” digər bakteriyalardan daha yaxşı çoxalırlar, xüsusən qələvi reaksiya ilə, çünki onlar özləri turşu tullantı məhsulları ifraz edirlər.

Xüsusi mühitlər. Sadə qida mühitində inkişaf etməyən bakteriyaların becərilməsi üçün lazımdır. Bəzi orqanizmlər üçün sadə qida mühitinə karbohidratlar, qan və digər əlavə qidalar əlavə etmək lazımdır. Sadə qidalı mühitlərə misal olaraq streptokoklar üçün şəkər bulyonu və şəkər aqarını göstərmək olar (müvafiq olaraq MPB və MPA-dan hazırlanır, 0,5-2% qlükoza əlavə olunur).

Diferensial diaqnostik mühitlər tədqiq olunan mikrobun maddələr mübadiləsinin xüsusiyyətlərinə əsasən onun növlərini təyin etmək üçün istifadə olunur. Məqsədlərinə görə differensial diaqnostik mühitlər aşağıdakı kimi bölünür:

1. Aşkarlama üçün media proteolitik qabiliyyəti tərkibində süd, jelatin, qan və s olan mikroblar.

2. Müxtəlif aşkarlanması üçün karbohidratlar və polihidrik spirtlər olan media saxarolitik fermentlər.

Sakkarolitik xassələri və redoks fermentlərini müəyyən etmək üçün nəzərdə tutulmuş diferensial diaqnostik mühitin tərkibinə aşağıdakı göstəricilər əlavə olunur: neytral qırmızı, turşu fuksin, bromotimol mavisi, rozol turşusu (BP) ilə sulu mavi. Müxtəlif pH dəyərlərində rəngini dəyişdirərək, göstərici fermentin mövcudluğunu və mühitə daxil olan tərkib hissəsinin parçalanmasını göstərir.

Diferensial diaqnostik mühitlərə nümunələr:

Endo orta. 1% laktoza və natrium sulfit ilə rəngsizləşdirilmiş əsas fuksin (indikator) əlavə edilmiş MPA-dan ibarətdir. Endo mühiti bir az çəhrayı rəngə malikdir. Bağırsaq infeksiyalarının diaqnostikasında laktoza parçalayan bakteriyaları bu qabiliyyətə malik olmayan bakteriyalardan asidik məhsullar əmələ gətirən bakteriyalardan fərqləndirmək üçün istifadə olunur. Laktoza müsbət mikrobların koloniyaları (Escherichia coli) fuksinin azalması səbəbindən qırmızıdır. Laktoza mənfi mikroorqanizmlərin koloniyaları - salmonella, şigella və s. - rəngsizdir.

Diferensial diaqnostika mühitlərinə qısa və uzadılmış üsullar daxildir rəngarəng sıra. O, karbohidratlar (Hiss media), MPB, süd və ət-pepton jelatini olan mühitdən ibarətdir.

Hiss media kimyəvi cəhətdən təmiz mono-, di- və ya polisaxaridlərin (qlükoza, laktoza, nişasta və s.) əlavə edildiyi peptonlu su əsasında hazırlanır.

Turşuların əmələ gəlməsi və karbohidratların parçalanması nəticəsində pH dəyişikliklərini aşkar etmək üçün mediaya bir göstərici əlavə olunur. Karbohidratların daha dərin parçalanması ilə, üzən vasitələrdən istifadə edərək tutulan qazlı məhsullar (CO 2, CH 4 və s.) əmələ gəlir - kiçik sınaq boruları mühitə tərs endirilir. Karbohidratlı mühitlər də 0,5-1% agar-aqar əlavə edilməklə sıx mühit kimi hazırlana bilər. Sonra qazın əmələ gəlməsi mühitin sütununda qabarcıqların (qırılmaların) əmələ gəlməsi ilə aşkar edilir.

Rəngarəng seriyanın bir hissəsi olan MPB-də amin turşularının və peptonların (indol, hidrogen sulfid) parçalanması zamanı əmələ gələn məhsullara rast gəlinir. Hidrogen sulfid kulturanı səpdikdən sonra MPB-yə qurğuşun asetat məhlulunda isladılmış filtr kağızı zolağının qoyulması ilə aşkar edilir. Tərkibində kükürd olan amin turşuları parçalandıqda hidrogen sulfid ayrılır və qurğuşun sulfid əmələ gəldiyindən kağız qara olur. Müəyyən etmək üçün indol kompleks göstəricidən istifadə edə bilərsiniz. İndol triptofanın parçalanması ilə əmələ gəlir və bu göstərici MPB-də yetişdirilən bir mədəniyyətə əlavə edildikdə aşkar edilə bilər. İndol varlığında MPB yaşıl və ya mavi olur.

Praktik bakterioloji laboratoriyalarda onlardan geniş istifadə olunur mikro və ekspress üsullar mikroorqanizmlərin biokimyəvi xassələrinin indikativ tədqiqi üçün. Bunun üçün çoxlu test sistemləri mövcuddur. Ən çox istifadə olunan göstərici kağızları sistemi (NIB). SIB-lər şəkər məhlulları və ya göstəricilərlə birlikdə digər substratlar ilə hopdurulmuş filtr kağızı diskləridir. Belə disklər maye qidalı mühitdə yetişdirilmiş kultura ilə sınaq borusuna endirilir. Substrat ilə diskin rənginin dəyişməsi fermentin fəaliyyətini qiymətləndirmək üçün istifadə olunur. Enterobakteriyaların identifikasiyasını öyrənmək üçün mikro-test sistemləri göstəricilərin əlavə edilməsi ilə müxtəlif substratları olan media ilə birdəfəlik plastik qablarla təmsil olunur. Belə test sistemlərinə təmiz mikroorqanizm mədəniyyətinin əkilməsi bakteriyaların sitratlardan, qlükozadan, saxarozadan istifadə etmək, ammonyak, indol buraxmaq, karbamid, lizin, fenilalanin və s. parçalamaq qabiliyyətini tez bir zamanda müəyyən etməyə imkan verir.

XÜSUSİ (SEÇİLMİŞ) QİDALANMA MEDİA

Maya böyüməsi mediası

Sintetik Reader Medium

Mühitin tərkibinə q/l daxildir: ammonium sulfat 3, maqnezium sulfat 0,7, kalsium nitrat 0,04, natrium xlorid 0,5, kalium dihidrogen fosfat 1,0, kalium hidrogen fosfat 0,1. İlkin pH 6.6. Maya tərəfindən istifadə edilməyən kalsium nitrat mühitdən çıxarıla bilər. Maya reproduksiyasını öyrənmək üçün 2% şəkər əlavə edin, fermentasiyanı öyrənmək üçün - 5-10%. Tam sintetik mühitdə kristal vitaminlər var, mkq/ml: inositol 5, biotin 0,0001, pantotenik turşu 0,25, tiamin 1,0, piridoksin 0,25, nikotinik turşu 0,5. Otoklavda mühiti 0,1 M Pa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edin.

Qlükoza-ammonium mühiti

1 litr kran suyunda aşağıdakı maddələr var, g: ammonium sulfat 5, kalium dihidrogen fosfat 0,85, kalium hidrogen fosfat 0,15, maqnezium sulfat 0,5, natrium xlorid 0,1, kalsium xlorid 0, qlorid zənginləşdirici amillər 0, qlorid 0, böyümə faktorları 02. maya (0,2%) və ya ət (0,3%) ekstraktı və üzüm suyu əlavə edilir.

Qüsursuz mayaları müəyyən etmək üçün sintetik mühit

1 litr kran suyunda aşağıdakı maddələr var, q/l: qlükoza 50, lizin 3, kalium dihidrogen fosfat 1, maqnezium sulfat 1, dəmir sulfat - izlər. Hər bir komponent ayrıca suda həll edilir və göstərilən ardıcıllıqla əlavə edilir. Aqar (1,5%) mühitə əlavə edilir, əridilir, sınaq borularına tökülür və 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Qüsursuz mayaların aşkarlanması üçün lizinlə tam mühit

1 litr kran suyunda aşağıdakı maddələr var, q/l: qlükoza 50, maqnezium sulfat 1, kalium dihidrogen fosfat 2, kalium laktat 12 ml (50% məhlul), /, (+) lizin monohidrat 1, vitamin məhlulu (başına). 100 ml steril distillə edilmiş su əlavə edilir, g: inositol 2, kalsium pantotenat 0,4, nikotinamid 0,5, hidrattiamin 0,1, agar 20;mühitin pH-sı - 5-5,2.Mühit 15 ml sınaq borularına tökülür və 1 dəqiqə 5 dəqiqə sterilizasiya edilir. 0,1 MPa təzyiq.

Qüsursuz mayaların aşkarlanması üçün asetat mühiti

1 litr kran suyu üçün 10 q natrium asetat, 10 q ammonium xlorid, 5 q qlükoza, 3 ml maya avtolizatını götürün, 5 ml sınaq borularına tökün və 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edin.

Morfoloji cəhətdən əsas kulturaya oxşar yad mayaları müəyyən etmək üçün vasitə

10 q pepton, 2 q kalium hidrogen fosfat 500 ml distillə edilmiş suda həll edilir və süzülür. Süzgəcdə 15 q agar əridilir, 10 q qlükoza, 0,4 q eozin və 0,065 ml metilen mavisi (90% spirt məhlulu) əlavə edilir, isti distillə edilmiş su ilə 1000 ml-ə uyğunlaşdırılır, sınaq borularına tökülür və sterilizasiya edilir. 0. 1 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə. Sterilizasiya edildikdə rəng yox olur, soyuduqda yenidən görünür. Orta 2 aydan çox olmayan müddətə saxlanılır.

Psevdomiselium əmələ gəlməsi üçün vasitə

Qlükoza pepton agar. 1 litr kran suyuna g: pepton 10, qlükoza 20, agar 30-35 əlavə edin. 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edin. Lazım gələrsə, maya və ya ət ekstraktı (0,5%) əlavə edə və ya maye şəklində bişirə bilərsiniz.

Kartof ağarı. 100 q soyulmuş, yuyulmuş, incə dilimlənmiş kartof 300 ml krandan su ilə bir neçə saat sərin yerdə dəmlənir. Ekstrakt süzülür, 230 ml ekstrakt kranın suyu ilə 1 litrə gətirilir, 20 q qlükoza və 30-35 q agar əlavə edilir, əridilir və 0,075 MPa təzyiqdə 1 saat sterilizasiya edilir.

Karbohidratlı maya suyu (“rəng seriyası”)

Mayanın karbohidratların fermentasiyasına səbəb olma qabiliyyəti 2% sınaq şəkəri (qlükoza, maltoza, saxaroza, laktoza, rafinoza və s.) olan maya suyundan istifadə etməklə müəyyən edilir. Mühit üzgüçülüklü sınaq borularına, Dunbar borularına tökülür və fraksiya axan buxarla sterilizasiya edilir. Əkindən sonrakı nəticələr 2 gündən sonra, lazım gələrsə, 30 °C temperaturda 7 gün becərildikdən sonra qeydə alınır.

Mayanın oksidləşmə yolu ilə karbohidratları metabolizə etmək qabiliyyəti aşağıdakı tərkibli mühitdə öyrənilir, r/l: ammonium sulfat 5, kalium dihidrogen fosfat 1, maqnezium sulfat 0,5, avtolitat 1, sınaq şəkəri 10, agar 20. Mühit tökülür. 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edilmiş sınaq borularına daxil edilir, agar maili hazırlayır. Mədəniyyət artımı 3-4 gündən sonra qiymətləndirilir.

Şəkər ilə maya agar

0,5% natrium xlorid, 1% qlükoza (və ya 4 və ya 10% saxaroza) və 2% agar maya suyunda, pH 6,8 (qlükoza ilə) və 6-6,5 (saxaroza ilə) həll edilir. Mühit sınaq borularına və ya kolbalara tökülür və 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Antibiotik media

Mayanın üstünlüklü inkişafı və onu müşayiət edən bakteriyaların yatırılması üçün mediaya geniş spektrli antibiotiklər daxil edilir: streptomisin (100 vahid/ml), penisilin (20-100 vahid/ml), levomisin (50 mq/l), neomisin ( 20 vahid/ml) və s. Onlar ətraf mühitə birlikdə və ya ayrıca əlavə edilə bilər.

Askosporların əmələ gəlməsi üçün mühit

Çərşənbə Gorodkova. 1 litr kran suyunda, g: pepton 10, natrium xlorid 5, qlükoza 1 (və ya 2,5), agar 20; Ətraf mühitin pH 7,3-dür. Sınaq borularına tökün və 0,1 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə sterilizasiya edin.

McClary asetat agar. 1 litr distillə edilmiş suya g: natrium asetat 8,2, kalium xlorid 1,8, qlükoza 1, maya ekstraktı 2,5, agar 15 əlavə edin. 0,1 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə avtoklavda saxlayın.

Çərşənbə Starkey. 1 litr kran suyunda həll edin, g: kalium hidrogen fosfat 1, kalium dihidrogen fosfat 0,25, maqnezium sulfat 0,25, kalsium xlorid 0,05, agar 20. 0,05 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə sterilizasiya edin.

Osmofil maya inkişaf mühiti

1 litr qlükoza siropuna (50-60% DM) 5 q pepton və 20 q agar əlavə edin. Peptonu maya suyu (50 ml) ilə əvəz etmək olar. 0,05 MPa təzyiqdə sterilizasiya edin.

Bəkməz şərabı

200-300 q qalın bəkməz 1: 3 nisbətində su ilə qarışdırılır, 95 ° C-ə qədər qızdırılır və 2 saat dayanır.Eyni zamanda laxtalanmış kolloidlər çökür və bəkməz məhlulu aydınlaşır. . Məhlula 3% diammonium fosfat əlavə edilir, su ilə 5-8% DM-ə qədər seyreltilir və sınaq borularına və ya kolbalara tökülür. Aqar mühitini hazırlamaq üçün 1,5-2% agar əlavə edin. 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə avtoklavda və ya 1 saat 20-24 saat fasilə ilə 3 dəfə fraksiya ilə sterilizasiya edin.

Filamentli göbələklərin böyüməsi üçün mühit

Çuğundur agar

Yaxşı yuyulmuş şəkər çuğunduru dilimlərə kəsilir, kran suyu ilə doldurulur (1 litr suya 20 q çuğundur) və 30 dəqiqə qaynadılır. Filtrat su ilə ilkin həcmə gətirilir, 2%-li agar əlavə edilir və 0,1 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Çuğundur pulpası

Təmiz çuğundur sürtgəcdə üyüdülür, Petri qablarına qoyulur və çevrilmədən 0,1 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Çərşənbə Çapək

Mühitin tərkibi, q/l: saxaroza və ya qlükoza 30, kalium dihidrogen fosfat 1,0, natrium nitrat 2,0, maqnezium sulfat 0,5, kalium xlorid 0,05, dəmir sulfat 0,1, əvvəllər əlavə edilmiş bu inqrediyentlər, agarla və agar 20 nümunəsidir. 1 litr distillə edilmiş suda həll edilir, axan buxarla qızdırılır və 10% limon turşusu və ya natrium hidroksid məhlulu ilə pH 4,0-5,5-ə qədər tənzimlənir. Süzgəcdən keçirin, sınaq borularına tökün və 1 gün fasilə ilə 3 dəfə 30 dəqiqə ərzində fraksiya axan buxarla sterilizasiya edin.

Czapek-Dox şəkər nitrat agar

Seçim 1. 1 litr distillə edilmiş su üçün, g: saxaroza 20, kalium hidrogen fosfat 0,5, maqnezium sulfat 0,5, natrium xlorid 0,5, kalium nitrat 1, dəmir sulfat izləri, kalsium karbonat 2-5, agar 20.

Seçim 2. 1 litr distillə edilmiş su qəbulu üçün q/l: saxaroza 30, ammonium nitrat 2,5, kalium dihidrogen fosfat 1, maqnezium sulfat 1, dəmir sulfat 0,01, agar 20.

Qlükoza-nişasta mühiti

Czapekin saxaroza nitrat agarında olduğu kimi eyni duz komponentləri, lakin saxaroza əvəzinə 25 q həll olunan nişasta və 5 q qlükoza alınır.

Nişasta ammonium agar

Mühitin tərkibi, q/l: həll olunan nişasta 10, kalsium karbonat 3, kalium hidrogen fosfat 1, maqnezium sulfat 1, natrium xlorid 1, ammonium sulfat 1, agar 20. 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edin.

Çərşənbə Saburo

100 ml steril maya suyuna g: pepton 5, qlükoza 4, agar 1,8-2 əlavə edin. 0,05 MPa təzyiqdə və ya fraksiya ilə 20 dəqiqə sterilizasiya edin.

Bu mühitin əsasını maya suyu təşkil edir. Maya suyunu hazırlamaq üçün 70-100 q təzə sıxılmış maya (7-10 q quru maya) 1 litr distillə edilmiş suda 20-30 dəqiqə qaynadılır və hündür silindrdə 12 saat soyuqda saxlanılır. maye süzülür, daha 1 əlavə edilir.l su, 30 dəqiqə qaynadılır, süzülür, pH-ı lazımi dəyərə uyğunlaşdırır. Hazırlanmış mühit 1 gün fasilə ilə 20 dəqiqəlik 2-3 dəqiqəlik artımlarla sterilizasiya edilir. 100 ml steril maya suyuna 1% pepton, 2% agar əlavə edilir, agar həll edildikdən sonra 4% qlükoza və ya maltoza əlavə edilir, süzülür, sınaq borularına tökülür və 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Mühit həmçinin adi 1% peptonlu su ilə hazırlana bilər.

Süd turşusu bakteriyalarının böyüməsi üçün mühit

Hidrolizə edilmiş süd (Boqdanova görə)

Adi və ya yağsız süd (pH 7,6-7,8) 5 dəqiqə qaynadılır, qab yaxşıca çalxalanır və 45°C temperatura qədər soyudulur və 1 litrə 0,5-1 q pankreatin əlavə edilir, 4-7 dəqiqədən sonra 5 əlavə edilir. ml xloroform. 40 °C temperaturda 18-20 saat termostata qoyun. Pankreatin tozu az miqdarda isti suda əvvəlcədən seyreltilməlidir. İlk saatlarda tıxac açıq halda süd bir neçə dəfə qarışdırılır. Hidrolizə olunmuş süd kağız süzgəcdən süzülür, 2-3 dəfə su ilə seyreltilir, pH 7,0-7,2 təyin edilir və 0,1 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə və ya 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Hidrolizə edilmiş südlü agar

Hidrolizə edilmiş südə 1,5-2,0% agar əlavə edilir. Qarışıq bir qaynadək qızdırılır və agar tamamilə həll olunana qədər saxlanılır. İsti mühit pambıq filtrdən süzülür, sınaq borularına və ya kolbalara tökülür və 0,1 MPa təzyiqdə 10-15 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Göstərici ilə yağsız süd

Qaynamağa qədər qızdırılan təzə yağsız süd isti halda lakmus tincture ilə sıx yasəmən rənginə boyanır. Axan buxarla (1 gün ara ilə 30 dəqiqə ərzində 3 dəfə) və ya 0,1 MPa təzyiqdə 10 dəqiqə avtoklavla sterilizasiya edin.

Xərclənmiş taxıl ilə səməni şərabı

Səməni şərabı hazırlanır, lakin sərf olunan taxıl ayrılmadan (12-15% DM). Sınaq borularına tökün, steril təbaşir (2-4%) əlavə edin və 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edin.

Maya saxaroza agar

Müəyyənləşdirmək Lactobacillus Və Leykonostok 0,5% natrium xlorid, 10% saxaroza və 2% agar əlavə etməklə maya suyu əsasında hazırlanmış mühitdən istifadə edin; Ətraf mühitin pH 6-6,5-dir.

Cücərmə mühiti

25 q səməni (arpa) cücərtiləri 500 ml su ilə 10 dəqiqə qaynadılır və 45-50 ° C temperaturda soyuduqdan sonra kətan torbasından süzülür, döyülmüş toyuq zülalı ilə təmizlənir, yenidən qaynadılır və süzülür. laxtalanmış proteini çıxarmaq üçün kağız filtri. Məhlula 1,5% pepton, 2% şəkər, 2% agar əlavə edilir və 0,05 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Kələm çərşənbəsi

200 q doğranmış ağ kələm 1 litr suya tökülür, 10 dəqiqə qaynadılır, iki qat doka ilə sıxılır. Yaranan maye qatlanmış süzgəcdən süzülür, 2 dəfə seyreltilir və məhlulun üzərinə 2% qlükoza və 1% pepton əlavə edilir.Probirkalara tökülür və 0,05 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə sterilizasiya edilir. Möhkəm bir mühit əldə etmək üçün 2% agar əlavə edin.

MRS orta (de Man orta)

Mühitin tərkibinə, q/l daxildir: manqan sulfat 0,05, maqnezium sulfat 0,2, kalium hidrogen fosfat 2, ammonium nitrat 2, natrium asetat 5, pepton 10, Difko maya ekstraktı 5, ət ekstraktı 10, tvitenten 20, qlükoza-20, 1 ml, orta pH 6-6,5. Mühit süzülür və 1 gün fasilə ilə 3 dəfə 30 dəqiqəlik fraksiya addımlarında və ya avtoklavda 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir. Doğuş üçün maye, yarı maye və agar şəklində istifadə olunur Leykonostok Və Lactobacillus.

MRS media (A.A. Lanzier tərəfindən dəyişdirilmiş)

MRS-1 mühiti. 200 ml distillə edilmiş suda həll edin, g: manqan sulfat 0,05, maqnezium sulfat 0,2, sistein 0,2, kalium hidrogen fosfat 2, ammonium sitrat 2, natrium asetat 5, qlükoza 20, pepton 10 ml, ayrı-ayrılıqda həll olunur. az miqdarda isti distillə edilmiş suda), maya avtolizat (bax. Əlavə 2) 50 ml, qaraciyər ekstraktı 100 ml. Mayenin həcmi distillə edilmiş su ilə 500 ml-ə qədər tənzimlənir və əvvəllər sterilizasiya olunmamış, pH 6,2-6,8 olan 500 ml Boqdanovun hidrolizə edilmiş yağsız südü əlavə olunur. Orta süzülür və fraksiya axan buxarla sterilizasiya edilir.

MRS-2 mühiti.Ştammların muzey saxlanması üçün nəzərdə tutulmuşdur Lactobacillus. MRS-1 mühiti əsasında 0,15% agar əlavə edilməklə hazırlanır. Nəticə maye ilə müqayisədə daha çox anaerob şərait yaradan yarı maye mühitdir.

MRS-3 mühiti. Süd turşusu bakteriyalarını təyin edərkən "rəngli seriyalar" üçün nəzərdə tutulmuşdur. O, MPC-1 mühitinə əsaslanır, lakin qlükoza, qaraciyər ekstraktı və hidrolizə edilmiş süd olmadan. Karbohidratlar və polihidrik spirtlər 0,5% miqdarında əlavə olunur. Əlavə edilmiş agarın miqdarı 0,15% təşkil edir. Ətraf mühitin pH 7.0-dır. Göstərici xlorofenol qırmızıdır (0,004%). Göstərici 1-2 ml etil spirtində həll edilir və sterilizasiyadan əvvəl mühitə əlavə edilir. Qırmızı xlorofenol 4.8-6.4 pH diapazonunda qırmızı-bənövşəyidən sarıya rəng keçidi verir.

Qaraciyər ekstraktı

Təzə mal əti qaraciyəri incə doğranır və su ilə doldurulur (1 kq qaraciyər: 1 litr su). 30 dəqiqə qaynadın və süzün, sonra 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edin.

Çərşənbə 10

1 litr mayasız pivə suyu (8% DM) və ya 1 litr maya suyu üçün g: manqan sulfat 0,05, maqnezium sulfat 0,2, sistin və ya sistein 0,2, kalium hidrogen fosfat 2, ammonium sitrat 0,2, asetat 0,2, asetat əlavə edin. saxaroza 20, pepton 10, maya avtolizat 50 ml. Hər bir komponent göstərilən qaydada səməni şərabında həll olunur (üçün Lactobacillus) və ya maya suyu (üçün Leykonostok). Birinci halda, ətraf mühitin pH-ı 5,5, ikincidə - 6,0-dır. 1,5% agar əlavə edin və axan buxarla sterilizasiya edin. Petri qablarına steril təbaşir əlavə etmək olar.

150 ml süzülmüş pomidor şirəsində 0,75 ml Tween-80 və 37,5 q qlükozanı qızdırarkən həll edin, üzərinə 5 ml maya avtolizatını, 600 ml yağsız süd (yağsız süd) və 150 ​​ml ərinmiş 2%-li ət-pepton agarı əlavə edin. . pH 7.0 olaraq təyin edilmişdir. Mühit 6-7 ml-lik sınaq borularına tökülür, 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir, soyudulur, tədqiq edilmiş süd turşusu bakteriyası ilə peyvənd edilir və üzərinə 1-2 ml ərinmiş 2%-li ət-pepton aqar qoyulur. . Zəif qaz əmələ gəlməsi halında tıxac əsas mühitdən ayrılır, güclü qaz əmələ gəldikdə isə yüksək qalxır və ya sınaq borusundan uçur.

Mucus əmələ gətirən bakteriyaların böyüməsi üçün mühit

Seçim 1. 10% saxaroza ilə ət ətli agar.

Seçim 2. Tərkibi, q/l: xam şəkər 40, natrium hidrogen fosfat 2, natrium xlorid 0,5, maqnezium sulfat 0,1, dəmir sulfat 0,01, kalsium karbonat 10, agar 20.

Çərşənbə Wittenbury

Mühitin tərkibinə q/l daxildir: ət ekstraktı 5, pepton 5, maya avtolizat 50 (və ya maya ekstraktı 50), 1,6% bromokresol bənövşəyi məhlulu 1,4 ml, pH 6,8-7,0. Axan buxarla 1 gün ara ilə 3 dəfə 45 dəqiqə sterilizasiya edin.

Çürük asporogen bakteriyaların böyüməsi üçün mühit

Südlü agar

Yağsız süd 5 ml-lik sınaq borularına tökülür və axan buxarla və ya avtoklavda 0,05 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir. Ayrı-ayrılıqda 3% sulu agar hazırlayın, 4-5 ml-dən sınaq borularına tökün və 0,1 MPa təzyiqdə 30 dəqiqə sterilizasiya edin. Aqar əridilir, steril şəkildə südlə birləşdirilir və sınaq nümunəsinin əvvəllər əlavə olunduğu Petri qablarına tökülür.

Yağ həzm edən bakteriyaların böyüməsi üçün media

Variant I. 1 litr suya 5 q pepton və 3 ml maya avtolizat əlavə edin. 7,2-7,4 pH təyin etdikdən sonra 1,5% agar əlavə edin. Aqar əridilir, mühit süzülür və 1% qaynar süd yağı və ya zeytun yağı əlavə edilir. Qarışdırın, sınaq borularına tökün və 0,1 MPa təzyiqdə 15 dəqiqə sterilizasiya edin.

Seçim 2.Ət pepton ağarına 2-4% süd yağı və ya zeytun yağı əlavə edilir. Sınaq borularına 10 ml tökün və 0,1 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edin. Kuboklara əlavə etməzdən əvvəl mühiti yaxşıca silkələyin.

Belə bir mühitin nümunəsi hidrolizə edilmiş süd ilə jelatindir. Hidrolizə edilmiş südə 10% jelatin əlavə edilir (hidrolizə edilmiş kazein və ya ət ekstraktı bulyonu istifadə edə bilərsiniz), onun şişməsinə icazə verin və 50 ° C temperaturda qarışdırın. Ətraf mühitin pH 7.0-7.2-dir. Mühit süzülür və sınaq borularında 0,075 MPa təzyiqdə 20 dəqiqə sterilizasiya edilir.

Sirkə turşusu bakteriyalarının böyüməsi üçün mühit

Səməni və ya kələm mühitinə 4 cild əlavə edin. % etil spirti və laktik turşu bakteriyalarının böyüməsini maneə törədən 20 vahid/ml antibiotik monomisin.

Anaerobların böyüməsi üçün mühit

Vinoqradski çərşənbəsi. 1 litr distillə edilmiş suda həll olunur, g: kalium hidrogen fosfat 1, maqnezium sulfat 0,5, manqan sulfat 20, qlükoza 20, natrium xlorid və dəmir xlorid - izlər.

Çərşənbə Kita-Tarozzi. Qaynadılmış və su ilə yuyulmuş qaraciyər və ya ət parçaları sınaq borusuna endirilir ki, dibini örtsün. 1% qlükoza (pH 7,2-7,4) olan ət-peptonlu bulyonu "/2 həcmli sınaq borusuna tökün və şamandıranı aşağı salın. Üstünə 1 sm hündürlükdə bir qat vazelin yağı tökün. 0,1 təzyiqdə 15 dəqiqə sterilizasiya edin. MPa 2 dəfə 30 dəq.

Hidrogen sulfid istehsal edən termofilik anaerobların yetişdirilməsi üçün vasitə

Mühitin tərkibinə q/l daxildir: pepton 10, dəmir sulfat 1, agar 20. Doldurmadan əvvəl hər bir sınaq borusuna təmiz dəmir mismar qoyulur. Şəkər səpildikdən sonra sınaq borusuna steril neft jeli qatı tökülür. Şəkərin tərkibində hidrogen sulfid əmələ gətirən bakteriyalar varsa, agarda xarakterik qara koloniyalar əmələ gəlir.