Normalna hemostaza. Trombociti Smanjuju broj krvnih pločica

Trombociti (PLT) - krvne pločice (Bizzocero plaques), fragmenti megakariocita, igraju važnu ulogu u ljudskom tijelu. Lagano aktivirani čak i normalno, uvijek jure u područje oštećenja krvnih žila kako bi, zajedno sa endotelom, formiranjem zaustavili krvarenje. Trombociti provode mikrocirkulatornu (primarnu, vaskularno-trombocitnu) hemostazu, koja se javlja u malim žilama. Reakcija koagulacije krvi u velikim žilama ostvaruje se mehanizmom sekundarne hemostaze, koji se naziva i makrocirkulacija ili hemokoagulacija.

formiranje trombocita

Gdje je zlatna sredina?

Kao i drugi formirani elementi, trombociti mogu imati tendenciju i smanjivanja i povećanja, što je često patologija, jer norma ovih ćelija u krvi je 200-400*10 9 /l i zavisi od fiziološkog stanja organizma. Njihov broj varira u zavisnosti od doba dana i sezone. Poznato je da se broj trombocita smanjuje noću i u proljeće. Nivo trombocita kod žena je niži (180-320 x 10 9/l), a tokom menstruacije njihov broj se može smanjiti i do 50%. Međutim, u u ovom slučaju trombociti se fiziološki smanjuju kao zaštitna reakcija (prevencija tromboze kod žena), tako da ovo stanje ne zahtijeva liječenje.

Broj trombocita u krvi je nešto manji tokom trudnoće, ali ako njihov nivo padne ispod 140 x 10 9 /l, mjere se moraju odmah preduzeti, jer se povećava rizik od krvarenja tokom porođaja.

Posebni događaji se takođe provode kada Sljedeće bolesti uzrokuju nizak nivo trombocita:

Poremećaj hematopoeze u koštanoj srži;
Bolesti jetre;

Povećanje krvnih pločica može biti i fiziološko, na primjer, nakon boravka u visokim planinama ili tokom teškog fizičkog rada. Ali kada su trombociti u krvi povišeni zbog patoloških stanja, onda se povećava rizik, jer su trombociti odgovorni za zgrušavanje krvi, a njihov višak će dovesti do povećanog stvaranja tromba.

Kod djece nakon godinu dana, nivo crvenih krvnih zrnaca se ne razlikuje od onih kod odraslih . Do godinu dana broj trombocita u krvi je nešto manji i iznosi 150-350 x 10 9/l. Norma kod novorođenčadi počinje na nivou od 100 x 10 9 / l.

Međutim, treba imati na umu da kada su trombociti u krvi djeteta povišeni, to će biti alarmantan faktor iu takvim slučajevima može se pretpostaviti sljedeća patologija:

Jednom riječju, to će biti razlog da se obavezno obratite liječniku, ali prvo ćete morati ponovo napraviti analizu krvi kako biste isključili grešku.

Trombociti u općem testu krvi

Moderna klinička laboratorijska dijagnostika, iako koristi stare provjerene metode bojenja i brojanja trombocita na staklu, ipak pribjegava proučavanju populacije trombocita pomoću hematološkog analizatora, čije su mogućnosti znatno šire.

Hematološki analizator vam omogućava da odredite koje ne samo da mjeri, već i prikazuje u obliku histograma, sa starim elementima na lijevoj strani i mladim elementima na desnoj. Veličina ćelija nam omogućava da procijenimo funkcionalnu aktivnost trombocita, a što su starije, to je njihova veličina i aktivnost manja.

a - normalni trombociti b - trombociti različitog volumena (izražena anizocitoza) c - veliki makrotrombociti

Uočeno je povećanje MPV-a kod anemije nakon krvarenja, Bernard-Soulierove makrocitne trombodistrofije i druga patološka stanja. Do smanjenja ovog pokazatelja dolazi u sljedećim slučajevima:

Trudnoća;
Anemija zbog nedostatka željeza;
Upala;
Tumori;
Infarkt miokarda;
kolagenoze;
bolesti štitne žlijezde;
Bolesti bubrega i jetre;
Poremećaji u sistemu koagulacije krvi;
Bolesti krvi.

Još jedan pokazatelj kvaliteta krvnih pločica je relativno, što ukazuje na stepen promene veličine trombocita (anizocitoza), drugim riječima, ovo je pokazatelj heterogenosti ćelija.

Njegova odstupanja ukazuju na patologiju kao što su:

anemija;
Upalni proces;
Infestacija crvima;
Maligne neoplazme.

Sposobnost trombocita da se zalijepe za površinu koja im je strana (kolagen, zasićene masne kiseline, koje čine osnovu aterosklerotskog plaka) naziva se adhezija, a sposobnost lijepljenja jedna za drugu i stvaranje konglomerata naziva se agregacija. Ova dva koncepta su neraskidivo povezana.

Agregacija trombocita sastavni je dio tako važnog procesa kao što je stvaranje tromba, koji je glavna zaštita od krvarenja kada je oštećen vaskularni zid. Međutim, sklonost ka napredno obrazovanje krvni ugrušci (ili druga patologija) mogu dovesti do nekontrolirane agregacije trombocita i biti praćeni patološkim stvaranjem tromba.

Krv se zgrušava pri kontaktu sa bilo kojom stranom površinom, jer je samo vaskularni endotel njegovo prirodno okruženje, gde ostaje u tečnom stanju. Ali čim je krvna žila oštećena, okolina se odmah ispostavi da je strana i trombociti počinju da jure na mjesto nesreće, gdje se samoaktiviraju kako bi formirali krvni ugrušak i "zakrpali" rupu. To je mehanizam primarne hemostaze i provodi se u slučaju ozljede malog suda (do 200 μl). Kao rezultat, formira se primarni bijeli tromb.

Kada je velika žila oštećena, spontano se aktivira kontaktni faktor (XII), koji počinje da stupa u interakciju sa faktorom XI i kao enzim ga aktivira. Nakon toga slijedi kaskada reakcija i enzimskih transformacija, gdje se faktori koagulacije počinju međusobno aktivirati, odnosno dolazi do neke vrste lančane reakcije, uslijed koje se faktori koncentrišu na mjestu oštećenja. Tamo, zajedno sa drugim kofaktorima (V i kininogenom velike molekularne težine), dolazi i faktor zgrušavanja krvi VIII (antihemofilni globulin), koji sam po sebi nije enzim, ali kao pomoćni protein aktivno učestvuje u koagulaciji. proces.

Interakcija između faktora IX i X odvija se na površini aktiviranih trombocita, koji su već bili u kontaktu sa oštećenom žilom i na njihovoj membrani su se pojavili posebni receptori. Aktivni faktor X se pretvara u trombin, a u ovom trenutku faktor II se takođe vezuje za površinu trombocita. Ovdje je također prisutan pomoćni protein, faktor VIII.

Proces zgrušavanja krvi može započeti oštećenjem površine endotela (vaskularnog zida), zatim dolazi do unutrašnjeg mehanizma stvaranja protrombinaze. Koagulacija se može pokrenuti i kontaktom krvi sa tkivnim tromboplastinom, koji je skriven u ćeliji tkiva ako je membrana netaknuta. Ali izlazi kada je krvni sud oštećen (vanjski mehanizam za stvaranje protrombinaze). Pokretanje jednog ili drugog mehanizma objašnjava činjenicu da je vrijeme zgrušavanja uzorka kapilarne krvi (vanjski put) 2-3 puta manje od vremena zgrušavanja uzorka venske krvi (unutrašnji put).

Laboratorijski testovi zasnovani na ovim mehanizmima koriste se za određivanje vremena potrebnog za zgrušavanje krvi. Lee-White studija koagulacije provodi se prikupljanjem krvi u dvije epruvete iz vene, dok se stvaranje protrombinaze duž vanjskog puta proučava prema Sukharevu (krv iz prsta). Ovaj test zgrušavanja krvi je prilično jednostavan za izvođenje. Osim toga, ne zahtijeva posebnu pripremu (uzima se na prazan želudac) i dosta vremena za proizvodnju, jer se kapilarna krv (kao što je gore navedeno) zgrušava 2-3 puta brže od venske krvi. Normalno vrijeme zgrušavanja krvi prema Sukharevu je od 2 do 5 minuta. Ako se skrati vrijeme stvaranja ugruška, to znači da dolazi do ubrzanog stvaranja protrombinaze u organizmu. To se dešava u sljedećim slučajevima:

Nakon masivnog, na koji koagulacijski sistem reaguje;
DIC sindrom u stadijumu 1;
Negativni efekti oralnih kontraceptiva.

Odgođeno stvaranje protrombinaze će se izraziti produžavanjem vremena formiranja ugruška i posmatrano pod određenim uslovima:

Duboki nedostatak faktora I, VIII, IX, XII;
Nasljedne koagulopatije;
oštećenje jetre;
Liječenje antikoagulansima (heparin).

Kako podići nivo trombocita?

Kada ima malo trombocita u krvi, neki ljudi pokušavaju da ih sami podignu koristeći alternativnu medicinu, jedući hranu koja povećava trombocite u krvi i ljekovito bilje.

Treba napomenuti da se dijeta za povećanje krvnih pločica može smatrati zaista kraljevskom:

Kaša od heljde;
Crveno meso, kuhano na bilo koji način;
Sve vrste ribe;
Jaja i sir;
Jetra (po mogućnosti goveđa);
Bogate mesne juhe, kobasice i paštete;
Salate od koprive, kupusa, cvekle, mrkve, paprike, začinjene susamovim uljem;
Sve vrste zelenila (kopar, celer, peršun, spanać);
Bobice rowan, banane, šipak, sok od šipka, zelene jabuke, orasi.

Kažu da se trombociti mogu povećati narodnim lijekovima ako na prazan želudac (tri puta dnevno) konzumirate 1 žlicu susamovog ulja ili popijete svježi sok od koprive (50 ml) sa istom količinom mlijeka. Ali sve je to vjerovatno moguće ako se trombociti malo smanje i razjasni razlog pada njihovog nivoa. Ili kao pomoćne mjere pri glavnom tretmanu, koji se provodi u bolničkim uvjetima i sastoji se od transfuzije donorske tromboze, posebno pripremljene za određenog pacijenta.

Liječenje je ispunjeno određenim poteškoćama, jer trombociti ne žive dugo, pa se koncentrat trombocita čuva ne više od 3 dana u posebnim "gramofonima" (ćelije se moraju stalno miješati tokom skladištenja). Osim toga, za kvalitativno povećanje trombocita, oni se moraju ukorijeniti u tijelu novog domaćina, stoga se prije transfuzije vrši individualna selekcija prema leukocitnom HLA sistemu (analiza je skupa i dugotrajna).

Smanjite broj trombocita u krvi

Lakše je spustiti trombocite nego ih podići. Preparati koji sadrže acetilsalicilnu kiselinu (aspirin) pomažu u razrjeđivanju krvi i na taj način smanjuju razinu krvnih pločica. Također se u slične svrhe koriste, koje propisuje ljekar, a ne susjed na podestu.

Sam pacijent može pomoći doktoru samo odustajanjem od loših navika (pušenje, alkohol), jesti hranu bogatu jodom (morski plodovi) i koja sadrži askorbinsku, limunsku, jabučnu kiselinu. To su grožđe, jabuke, brusnice, brusnice, borovnice, agrumi.

Tradicionalni recepti za smanjenje nivoa trombocita preporučuju tinkturu belog luka, prah korena đumbira koji se kuva kao čaj (1 kašika praha na čašu ključale vode) i kakao bez šećera ujutro na prazan stomak.

Sve je to, naravno, dobro, ali treba imati na umu da se sve mjere moraju provoditi pod nadzorom liječnika, jer elementi krvi kao što su trombociti ne reagiraju baš na metode tradicionalne medicine.

Video: Šta vam govore analize krvi?

Krvne ploče

Trombociti, ili trombociti, u svježoj ljudskoj krvi izgledaju kao mala, bezbojna, okrugla ili vretenasta tijela. Mogu se ujediniti (aglutinirati) u male ili velike grupe. Njihov broj se kreće od 200 do 400 x 10 9 u 1 litri krvi. Krvne ploče su beznuklearni fragmenti citoplazme odvojeni od megakariociti- džinovske ćelije koštane srži.

Trombociti u krvotoku imaju oblik bikonveksnog diska. Otkrivaju lakši periferni dio - hijalomera a tamniji, zrnasti dio - granulometar. Populacija trombocita sadrži i mlađe i diferencirane i stare oblike. Hijalomera kod mladih ploča je obojena plavo (bazofilen), a u zrelim - ružičasta (oksifilen). Mladi oblici trombocita su veći od starijih.

Plazmalema trombocita ima debeli sloj glikokaliksa i formira invaginacije sa izlaznim tubulima, također prekrivenim glikokaliksom. Plazmalema sadrži glikoproteine koji funkcionišu kao površinski receptori uključeni u procese adhezije i agregacije krvnih pločica (tj. proces zgrušavanja krvi, odnosno koagulacije).

Citoskelet u trombocitima je dobro razvijen i predstavljen je aktinskim mikrofilamentima i snopovima mikrotubula koji se nalaze kružno u hijalomeri i uz unutrašnji dio plazmaleme. Elementi citoskeleta osiguravaju održavanje oblika krvnih pločica i sudjeluju u formiranju njihovih procesa. Aktinski filamenti su uključeni u smanjenje volumena (retrakcije) krvnih ugrušaka koji se formiraju.

Krvne ploče imaju dva sistema tubula i tubula. Prvi je otvoreni sistem kanala povezanih, kao što je već navedeno, sa invaginacijama plazmaleme. Kroz ovaj sistem, sadržaj granula trombocita se oslobađa u plazmu i supstance se apsorbuju. Drugi je takozvani gusti tubularni sistem, koji je predstavljen grupama cijevi koje su slične glatkom endoplazmatskom retikulumu. Gusti tubularni sistem je mjesto sinteze cikloksigenaze i prostaglandina. Osim toga, ove cijevi selektivno vezuju dvovalentne katjone i djeluju kao rezervoar Ca2+ jona. Gore navedene supstance su neophodne komponente procesa zgrušavanja krvi.

Oslobađanje iona Ca 2+ iz epruveta u citosol je neophodno da bi se osiguralo funkcionisanje krvnih pločica. Enzim ciklooksigenaza metabolizira arahidonsku kiselinu u formu prostaglandini i tromboksana A2, koji se izlučuju iz ploča i stimulišu njihovu agregaciju tokom koagulacije krvi.

Kada je ciklooksigenaza blokirana (na primjer, acetilsalicilnom kiselinom), inhibira se agregacija trombocita, što se koristi za sprječavanje stvaranja krvnih ugrušaka.

U granulometru su identifikovane organele, inkluzije i posebne granule. Organele su predstavljene ribosomima, elementima endoplazmatskog retikuluma Golgijevog aparata, mitohondrijama, lizosomima i peroksizomima. Postoje inkluzije glikogena i feritina u obliku malih granula.

Specijalne granule čine glavni dio granulomera i dostupne su u tri vrste.

Prvi tip su velike alfa granule. Sadrže različite proteine i glikoproteine uključene u procese zgrušavanja krvi, faktore rasta i litičke enzime.

Druga vrsta granula su delta granule koje sadrže serotonin akumuliran iz plazme i druge biogene amine (histamin, adrenalin), Ca2+ jone, ADP, ATP u visokim koncentracijama.

Treću vrstu malih granula predstavljaju lizosomi koji sadrže lizozomalne enzime, kao i mikroperoksizomi koji sadrže enzim peroksidazu.

Kada se ploče aktiviraju, sadržaj granula se oslobađa kroz otvoreni sistem kanala povezanih sa plazmalemom.

Glavna funkcija krvnih pločica je učešće u procesu koagulacije, ili koagulacija krvi - zaštitna reakcija tijela na oštećenje i sprječavanje gubitka krvi. Trombociti sadrže oko 12 faktora koji su uključeni u zgrušavanje krvi. Kada je zid žile oštećen, ploče se brzo agregiraju i prianjaju na nastale fibrinske niti, što rezultira stvaranjem krvnog ugruška koji zatvara defekt. U procesu stvaranja tromba postoji nekoliko faza koje uključuju mnoge komponente krvi.

U prvoj fazi dolazi do nakupljanja trombocita i oslobađanja fiziološki aktivnih tvari. U drugoj fazi - stvarna koagulacija i zaustavljanje krvarenja (hemostaza). Prvo, aktivni tromboplastin nastaje iz trombocita (tzv. unutrašnji faktor) i iz tkiva krvnog suda (tzv. vanjski faktor). Zatim, pod uticajem tromboplastina, iz neaktivnog protrombina nastaje aktivni trombin. Nadalje, pod utjecajem trombina nastaje fibrinogen fibrin. Ca2+ je neophodan za sve ove faze zgrušavanja krvi.

Konačno, na poslednja trecina fazi, uočava se povlačenje krvnog ugruška, povezano sa kontrakcijom aktinskih filamenata u trombocitnim procesima i fibrinskim filamentima.

Dakle, morfološki, u prvoj fazi dolazi do adhezije trombocita na bazalnu membranu i na kolagena vlakna oštećenog vaskularnog zida, uslijed čega se formiraju trombocitni procesi i granule koje sadrže tromboplastin izlaze iz ploča kroz sistem cijevi na njihovu površinu. Aktivira reakciju pretvaranja protrombina u trombin, a potonji utječe na stvaranje fibrina iz fibrinogena.

Važna funkcija trombocita je njihovo učešće u metabolizmu serotonin. Trombociti su praktički jedini krvni elementi u kojima se akumuliraju rezerve serotonina iz plazme. Vezivanje serotonina trombocitima nastaje uz pomoć faktora visoke molekularne mase u krvnoj plazmi i dvovalentnih kationa uz učešće ATP-a.

Tokom procesa zgrušavanja krvi iz trombocita se oslobađa serotonin, koji djeluje na vaskularnu permeabilnost i kontrakciju vaskularnih glatkih mišićnih stanica.

Životni vijek trombocita je u prosjeku 9-10 dana. Stareće trombocite fagocitiraju makrofagi slezene. Povećana destruktivna funkcija slezene može uzrokovati značajno smanjenje broja trombocita u krvi (trombocitopenija). Da bi se ovo ispravilo, možda će biti potrebno ukloniti slezinu (splenektomija).

Kada se broj krvnih pločica smanji, na primjer za vrijeme gubitka krvi, trombopoetin- faktor koji stimulira stvaranje ploča iz megakariocita koštane srži.

· hemofilija- nasljedna bolest uzrokovana nedostatkom faktora VIII ili IX zgrušavanja krvi; manifestira se simptomima pojačanog krvarenja; nasljeđuje se na spolno vezan recesivan način;

· purpura-- višestruka mala krvarenja u koži i sluzokožama;

· trombocitopenična purpura-- opšti naziv za grupu bolesti koje karakteriše trombocitopenija i manifestuje se hemoragijskim sindromom (npr. Werlhofova bolest);

Četvrti dio – Formula krvi, formula leukocita, starosne promjene u krvi, karakteristike limfe.

Hemogram i leukogram

U medicinskoj praksi ispitivanje krvi igra veliku ulogu. Kliničkim testovima se ispituje hemijski sastav krvi (uključujući i sastav elektrolita), utvrđuje se količina formiranih elemenata, hemoglobin, otpornost eritrocita, brzina sedimentacije eritrocita i mnogi drugi pokazatelji. Kod zdrave osobe formirani elementi krvi su u određenim kvantitativnim omjerima, koji se obično nazivaju hemogram ili krvna formula.

Za karakterizaciju stanja organizma važan je takozvani diferencijalni broj leukocita. Određeni postoci leukocita se nazivaju leukogram ili leukocitna formula.

Promjene u krvi povezane sa godinama

Broj crvenih krvnih zrnaca u trenutku rođenja i u prvim satima života veći je nego kod odrasle osobe i dostiže 6,0-7,0 x 10 12 u 1 litru krvi. Do 10-14 dana jednak je istim brojevima kao u odraslom tijelu. U narednim periodima dolazi do smanjenja broja crvenih krvnih zrnaca sa minimalnim pokazateljima u 3-6. mjesecu života (tzv. fiziološka anemija). Broj crvenih krvnih zrnaca se vraća na normalne vrijednosti tokom puberteta. Novorođenčad karakteriše prisustvo anizocitoze sa prevlašću makrocita, povećan sadržaj retikulocita, kao i prisustvo malog broja nukleisanih prekursora eritrocita.

Broj leukocita kod novorođenčadi je povećan i dostiže 30 x 10 9 u 1 litri krvi. U roku od 2 sedmice nakon rođenja njihov broj pada na 9-15 x 10 9 u 1 litru (tzv. fiziološka leukopenija). Broj leukocita dostiže nivo do 14-15 godine koji ostaje kod odrasle osobe.

Odnos broja neutrofila i limfocita kod novorođenčadi je isti kao i kod odraslih 4,5-9,0 x 10 9. U narednim periodima povećava se sadržaj limfocita, a smanjuje neutrofili, a do četvrtog ili petog dana broj ovih vrsta leukocita se izjednačava - to je tzv. prvo fiziološki križ leukociti. Daljnji porast broja limfocita i smanjenje neutrofila dovode do činjenice da u 1.-2. godini života djeteta limfociti čine 65%, a neutrofili - 25%. Novo smanjenje broja limfocita i povećanje neutrofila dovode do izjednačavanja oba pokazatelja kod djece od 4 godine (ovo je drugi fiziološki crossover). Postupno smanjenje sadržaja limfocita i povećanje neutrofila nastavlja se do puberteta, kada broj ovih vrsta leukocita dosegne normu za odrasle.

Limfa

Limfa je blago žućkasto tekuće tkivo koje teče limfnim kapilarama i žilama. Sastoji se od limfoplazme (plasma lymphae) i formiranih elemenata. By hemijski sastav Limfoplazma je bliska krvnoj plazmi, ali sadrži manje proteina. Limfoplazma sadrži i neutralne masti, jednostavne šećere, soli (NaCl, Na2CO3 itd.), kao i razna jedinjenja koja uključuju kalcijum, magnezijum i gvožđe.

Uglavnom su zastupljeni formirani elementi limfe limfociti(98%), kao i monociti i druge vrste leukocita. Limfa se filtrira iz tkivne tečnosti u slijepe limfne kapilare, gdje se, pod utjecajem različitih faktora, iz tkiva neprestano dovode različite komponente limfoplazme. Iz kapilara se limfa kreće u periferne limfne žile, preko njih u limfne čvorove, zatim u velike limfne žile i teče u krv.

Sastav limfe se stalno mijenja. Postoje periferne limfne (tj. prije limfnih čvorova), srednje (nakon prolaska kroz limfne čvorove) i centralne (limfa torakalnih i desnih limfnih vodova). Proces formiranja limfe usko je povezan s protokom vode i drugih tvari iz krvi u međućelijske prostore i stvaranjem tkivne tekućine.

Neki pojmovi iz praktične medicine:

· neonatalna žutica, fiziološka - prolazna žutica (hiperbilirubinemija), koja se javlja kod većine zdravih novorođenčadi u prvim danima života;

Trombociti i hemostaza

M.A. Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova1-3

1Centar za teorijske probleme fizičko-hemijske farmakologije RAS, Moskva; 2Savezna državna budžetska ustanova Federalni naučno-klinički centar za dječju ortopediju im. Dmitrij Rogačev, Ministarstvo zdravlja Rusije, Moskva; 3Fizički fakultet, Federalna državna budžetska obrazovna ustanova visokog stručnog obrazovanja „Moskva Državni univerzitet njima. M.V. Lomonosov";

4FGBU Državni naučni centar Ministarstva zdravlja Rusije, Moskva; 5GemaKor LLC, Moskva

Kontakti: Mikhail Aleksandrovič Pantelejev [email protected]

Trombociti su anukleatni ćelijski fragmenti koji igraju važnu ulogu u hemostazi, zaustavljanju krvarenja u slučaju ozljede, kao i u patološkom formiranju tromba. Glavni način na koji trombociti obavljaju svoju funkciju je formiranje agregata koji pokrivaju mjesto oštećenja. Oni dobijaju sposobnost agregiranja kao rezultat prolaznog procesa zvanog aktivacija. Unatoč njihovoj relativno jednostavnoj i nedvosmislenoj funkciji, struktura trombocita je vrlo složena: imaju gotovo kompletan skup organela, uključujući endoplazmatski retikulum, mitohondrije i druge formacije; kada se aktiviraju, trombociti luče različite granule i stupaju u interakciju s proteinima plazme i krvnim stanicama i drugim tkivima; sama njihova aktivacija je kontrolisana brojnim receptorima i složenim signalnim kaskadama. U ovom pregledu ćemo razmotriti strukturu trombocita, mehanizme njegovog funkcioniranja u zdravlju i bolesti, metode dijagnosticiranja poremećaja funkcije trombocita i pristupe njihovoj korekciji. Posebna pažnja će se posvetiti onim oblastima nauke o trombocitima u kojima još uvijek vrebaju misterije.

Ključne riječi: struktura trombocita, funkcija trombocita

Trombociti i hemostaza M.A. Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova1-3

„Centar za teorijske probleme fizičke i hemijske farmakologije Ruske akademije nauka, Moskva; 2Federalni istraživački centar za pedijatrijsku hematologiju, onkologiju i imunologiju Dmitrija Rogačeva,

Ministarstvo zdravlja Rusije, Moskva; 3 Moskovski državni univerzitet Lomonosov, Fizički fakultet, Moskva; 4 Hematološki istraživački centar, Ministarstvo zdravlja Rusije, Moskva; 5 Kompanija HemaCore, Moskva

Trombociti su fragmenti anuklearne ćelije koji igraju važnu ulogu u hemostazi, prekidu krvarenja nakon oštećenja, kao iu patološkom formiranju tromba. Glavno djelovanje trombocita je stvaranje agregata koji preklapaju ozljedu. Dobili su sposobnost agregiranja kroz proces tranzicije koji se naziva aktivacija. Unatoč relativno jednostavnoj i određenoj funkciji, struktura trombocita je vrlo teška: oni imaju gotovo cijeli skup organela, uključujući endoplazmatski retikulum, mitohondrije i druge entitete. Kada se aktiviraju trombociti luče različite granule stupaju u interakciju s proteinima plazme i crvenim krvnim zrncima i drugim tkivima. Njihovom aktivacijom upravljaju višestruki receptori i složene signalne kaskada. U ovom pregledu razmotreni su struktura trombocita, mehanizmi njenog funkcionisanja u zdravlju i bolesti, dijagnostičke metode funkcije trombocita i pristupi njihovoj korekciji. Posebna pažnja će biti posvećena onim oblastima nauke o trombocitima, koje još uvek kriju skrivene misterije.

Ključne riječi: struktura trombocita, funkcija trombocita

Uvod

Trombociti su mali, prečnika 2-4 mikrometra, bez jezgrenih staničnih fragmenata (iako se ponekad nazivaju i ćelijama), koji cirkulišu u krvotoku u koncentraciji od 200-400 hiljada po mikrolitru i odgovorni su za ključne faze procesa zaustavljanja krvarenja - hemostazu. U slučaju povrede, oni su u stanju da se vežu za oštećena tkiva i jedno za drugo, formirajući trombocitni čep-agregat (slika 1), zaustavljajući gubitak krvi i sprečavajući mikroba da uđe u cirkulatorni sistem. Ovo nije jedini mehanizam hemostaze, ali je izuzetno važan. Nasljedni i stečeni poremećaji funkcije trombocita, npr

poput Glanzmannove trombastenije ili imunološke trombocitopenije, ozbiljne su bolesti koje karakterizira opasno krvarenje. Trombociti također aktivno učestvuju u drugim komponentama mehanizma hemostaze: neke tvari koje luče uzrokuju lokalnu vazokonstrikciju, dok druge ubrzavaju reakcije zgrušavanja krvi.

S druge strane, prekomjerna funkcija ili broj trombocita, ili drugi poremećaji u kardiovaskularnom sistemu mogu dovesti do stvaranja agregata trombocita ne izvan, već unutar žile – krvnih ugrušaka (Sl. 2). Trombi trombocita se mogu formirati u raznim situacijama i igrati centralnu ulogu u takvim patološkim stanjima.

Rice. 1. Hemostatski agregat formiran od trombocita u arterioli psa. Posmatrano pod svjetlosnim mikroskopom, čep trombocita (H) prekriva puknutu posudu (V). Biopsija je urađena 3 minute nakon ozljede. Brojna crvena krvna zrnca u gornjem dijelu slike nalaze se u lumenu rane, protežući se s lijeva na desno. Skala veličine u donjem desnom uglu odgovara 10 mikrometara. Reproducirano iz

Rice. 2. Formiranje krvnog ugruška u arterioli. Intravitalna DIC mikroskopija formiranja tromba u sudu štakora oštećenom fotoaktivacijom ružičaste bengalske boje. U gornjem desnom dijelu slike prikazan je tromb na vaskularnom zidu koji prekriva mjesto ozljede. U njemu je moguće razlikovati pojedinačne trombocite i primijetiti da zadržavaju svoj diskoidni oblik u prvim fazama vezivanja. Smjer protoka je označen strelicom. Traka skale odgovara 5 mikrometara. Reproducirano iz

događaje kao što su srčani i moždani udari. Kao takvi, oni su odgovorni za lavovski udio smrtnosti i invaliditeta u modernom svijetu, a lijekovi protiv trombocita kao što je klopidogrel su među najprodavanijim lijekovima na planeti.

Trombociti su jednostavni na mnogo načina: nemaju jezgro, malu ili nikakvu sintezu proteina i ne mogu rasti ili se dijeliti. Zadatak trombocita - da se zalijepi na mjesto oštećenja - također izgleda jednostavno i nedvosmisleno u poređenju sa zadacima gotovo bilo koje druge ćelije. Ali u praksi se ispostavlja da je ta jednostavnost varljiva. Da bi izvršili svoju funkciju, moraju se aktivirati u procesu koji je kontroliran od strane desetak aktivatora koji djeluju kroz brojne receptore. Mreža signalnih puteva u trombocitu koji upravljaju njegovim odgovorom je složena i slabo shvaćena. Sam odgovor trombocita nije jednostavno "zalijepljenje", već uključuje desetke funkcija, u rasponu od primarne adhezije do vezikulacije.

Osim temeljnih poteškoća, trombociti su ispunjeni mnogim praktičnim misterijama: liječnici trenutno nemaju adekvatan test za procjenu funkcije trombocita niti efikasan alat za njeno poboljšanje. Uprkos ogromnom napretku postignutom krajem 20. veka u vezi sa razvojem lekova antagonističkih na glikoprotein IIb-IIIa i receptor P2Y12, supresija aktivnosti trombocita u borbi protiv tromboze još uvek nije rešen problem. Konačno, sada su u toku intenzivna istraživanja o ulozi trombocita izvan hemostaze - u angiogenezi, imunitetu i drugim sistemima.

I klinička i biološka istraživanja trombocita privlače veliko interesovanje stručnjaka širom svijeta. Gotovo svaka godina donosi nam nova otkrića i ideje o najvažnijim procesima doslovno unutar njih poslednjih godina pretrpjele su radikalne promjene. U ovom pregledu pokušali smo da se fokusiramo na fundamentalne koncepte trombocita i govorimo o najnovijim dostignućima u razumevanju njegovog funkcionisanja. Za one koji žele da se bolje upoznaju sa različitim aspektima života ove čudesne ćelije, možemo preporučiti osnovni udžbenik A.V. Mazurova. Vlasnici engleski jezik naći će vrijedne informacije u referentnom udžbeniku Trombociti, koji je uredio Alan Michelson, koji se redovno preštampa.

Struktura trombocita

U svom originalnom, neaktiviranom obliku, trombociti liče na bikonveksne „ploče“ (slika 3, lijevo). Zbog svoje male veličine (2-4 mikrona u prečniku), slobodno prolaze kroz kapilare,

Rice. 3. Trombociti. Elektronski mikrosnimak neaktiviranih trombocita koji zadržavaju svoj diskoidni oblik (lijevo) i ADP-aktiviranih trombocita u agregatu (desno). Reproducirano iz

tako da je njihov oblik konstantan, za razliku od crvenih krvnih zrnaca koji su prisiljeni da se istiskuju kroz kapilare. Tek nakon aktivacije mijenja se oblik trombocita, koji u većini slučajeva postaje ameboid (slika 3, desno). Oblik trombocita održava se i spektrinskim citoskeletom, koji daje elastičnost njihovoj ljusci, i prstenom tubulinskih mikrotubula (slika 4), koji se uništava prilikom aktivacije. Citoplazma ćelije sadrži brojne granule od kojih su glavne guste granule koje sadrže pretežno niskomolekularne supstance kao što su serotonin i adenozin difosfat (ADP), i alfa granule koje sadrže proteine - fibrinogen, trombospondin, P-selektin, faktor koagulacije V, von Willebrand faktor i mnogi drugi. Sadržaj ovih granula se luči kada se aktivira

cije. Važno je napomenuti da je oblik trombocita iluzoran na mnogo načina. Njegovo unutrašnje okruženje je zapravo neprekidna "spužva", mreža membranskih kanala koja pri aktivaciji služi kao dodatni izvor površine membrane i potiče lučenje granula.

Sposobnost aktiviranja - brz i u većini slučajeva nepovratan prijelaz u novo stanje - glavna je kvaliteta trombocita. Gotovo svaka značajna smetnja može poslužiti kao aktivacijski stimulans okruženje, sve do jednostavnog mehaničkog naprezanja. Međutim, glavni fiziološki aktivatori trombocita su: 1) kolagen – glavni protein ekstracelularnog matriksa; 2) trombin - serin proteinaza, centralni enzim sistema koagulacije plazme; 3) ADP - adenin nukleotid, koji se oslobađa iz uništenih vaskularnih ćelija ili izlučuje gustim granulama samih trombocita; 4) tromboksan A2 - lipid iz klase eikozanoida, sintetiziran i izlučen trombocitima.

Djelovanje svakog aktivatora trombocita je posredovano preko specijalizovanih receptora u membrani trombocita. Dakle, kolagen aktivira trombocite preko glikoproteina VI, trombin ima 2 glavna proteinaza aktivirana receptora PAR1 i PAR4, ADP djeluje preko purinoceptora P2Y1 i P2Y12. Stimulacija bilo kojeg od receptora dovodi do aktivacije složene mreže intracelularnih signalnih kaskada koje kontrolišu odgovor ćelije; s različitim receptorima koji općenito pokreću različite puteve.

Membrane

Otvoreni cevasti sistem

Prsten za mikrotubule

Guste granule

a-granule

Mitohondrije

Gusti cevasti sistem

Glikogen

Guste granule

Rice. 4. Struktura trombocita. Na dijagramu lijevo možete razlikovati glavne elemente strukture trombocita, promatrane pod elektronskim mikroskopom. Reproducirano iz. Desno je trodimenzionalna rekonstrukcija unutrašnjosti trombocita pomoću podataka elektronske tomografije. Imajte na umu da kanalički sistem prikazan plavom bojom zauzima ogroman dio zapremine ćelije. Reproducirano iz

Aktivacija trombocita se spolja manifestuje brojnim unutrašnjim preuređivanjem i promenama svojstava, među kojima su glavne: 1) promena oblika u ameboid, kod nekih trombocita - sferni; 2) jačanje sposobnosti prianjanja – pričvršćivanje na mesto oštećenja; 3) pojava sposobnosti agregacije - pričvršćivanje na druge trombocite kako bi se formirao punopravni čep; 4) izlučivanje brojnih nisko i visokomolekularnih jedinjenja opisanih gore iz gustih granula, alfa granula i drugih izvora; 5) izlaganje prokoagulantne membrane.

Neka od ovih svojstava služe za provedbu glavne funkcije trombocita - stvaranje hemostatskog čepa, druga - za ubrzavanje reakcija koagulacije krvi. Dakle, izlaganje prokoagulantne membrane i lučenje alfa granula su neophodni za realizaciju druge funkcije trombocita.

Zgrušavanje krvi je kaskada reakcija u krvnoj plazmi koja se završava formiranjem mreže fibrinskih vlakana i prelaskom krvi iz tekućeg u želeasto stanje. Mnoge ključne reakcije koagulacije su zavisne od membrane (slika 5), ubrzavaju se za mnogo redova veličine u prisustvu negativno nabijenih fosfolipidnih membrana, na koje se koagulacijski proteini vezuju preko takozvanih kalcijumovih mostova. U normalnim uslovima, membrana trombocita ne podržava reakcije zgrušavanja. Negativno nabijeni fosfolipidi, prvenstveno fosfatidilserin, koncentrirani su u unutrašnjem

sloj membrane, a fosfatidilholin u vanjskom sloju mnogo slabije veže faktore koagulacije. Iako se neki faktori koagulacije mogu vezati za neaktivirane trombocite, to ne dovodi do stvaranja aktivnih enzimskih kompleksa.

Aktivacija trombocita vjerojatno dovodi do aktivacije enzima skrablaze, koji počinje brzo, konkretno, bilateralno i ADP-nezavisno prenositi negativno nabijene fosfolipide iz jednog sloja u drugi. Kao rezultat, dolazi do ubrzanog uspostavljanja ravnoteže, u kojoj koncentracija fosfatidilserina u oba sloja postaje jednaka. Osim toga, nakon aktivacije dolazi do izlaganja i/ili konformacijskih promjena u mnogim transmembranskim proteinima vanjskog sloja membrane, koji stiču sposobnost specifičnog vezanja faktora koagulacije, ubrzavajući reakcije uz njihovo učešće. Zanimljivo je da samo neki trombociti pokazuju takva svojstva kada su aktivirani.

Uopšteno govoreći, aktivirano stanje trombocita može biti različito: aktivacija trombocita ima nekoliko stupnjeva, a ekspresija površine prokoagulanta je jedna od najvećih. Samo trombin ili kolagen mogu proizvesti tako jak odgovor. Slabiji aktivatori, posebno ADP, mogu doprinijeti funkcionisanju jakih aktivatora. Međutim, oni nisu u stanju samostalno izazvati oslobađanje fosfatidilserina u vanjski sloj membrane; njihovo djelovanje se svodi na promjenu oblika, agregacije i lučenja dijela granula.

Rice. 5. Membranske reakcije koagulacije krvi. Aktivacija trombocita dovodi do pojave fosfatidilserina u vanjskom sloju membrane trombocita. Faktori koagulacije se vezuju za takve membrane preko kalcijumovih mostova, formirajući proteinske komplekse u kojima se reakcije koagulacije ubrzavaju za redove veličine. Ilustracija prikazuje kompleks protrombinaze, koji se sastoji od faktora Xa, Va, II, koji se nalazi na površini dvoslojne membrane

Kako trombociti rade?

Najčešći način ispitivanja stanja sistema trombocitne hemostaze u savremenoj dijagnostičkoj praksi je agregacija, pri kojoj se efekat dodavanja određenog aktivatora u suspenziju trombocita procjenjuje optičkom gustoćom. Aktivator, najčešće ADP ili kolagen, dodaje se u krvnu plazmu bogatu trombocitima uz stalno miješanje nekoliko minuta. Trombociti se aktiviraju, međusobno djeluju i dolazi do stvaranja agregata, što se vidi po smanjenju zamućenosti suspenzije uzrokovanom smanjenjem broja čestica koje raspršuju svjetlost. Postoje varijante testa agregacije koje uključuju različite principe detekcije: na primjer, agregacija trombocita u punoj krvi može se mjeriti korištenjem metode impedancije umjesto optičke metode.

Možda se upravo u vezi s rasprostranjenošću testa agregacije u posljednjih nekoliko desetljeća, u glavama mnogih stručnjaka učvrstila ideja da se formiranje trombocitnog tromba ili hemostatskog čepa u tijelu događa na sličan način: prvo, aktivacija (na primjer, oslobođena iz ćelije).

struja oštećenog zida suda ADP), a zatim agregacija. Iako proučavanje rasta trombocitnog tromba u protočnim komorama ima istoriju dugu skoro pola veka, tek poslednjih decenija ovaj tradicionalni pogled je počeo da se dovodi u pitanje.

Razmotrimo prvu fazu formiranja tromba: adheziju trombocita na kolagen izložen na mjestu oštećenja. Pokušajmo procijeniti vremena i udaljenosti tipične za ovaj proces. Neka karakteristična veličina područja oštećenja bude, recimo, l = 10 mikrometara (1 odvojena endotelna ćelija). Neka brzina protoka bude arterijska, to znači da je gradijent brzine protoka na zidu oko u = 1000 s - 1. Tada će se trombocit, koji ima karakterističnu veličinu (po redu veličine) od oko x = 1 mikrometar, kretati blizu zid brzinom v = x x u = 1000 mikrometara u sekundi. To znači da će preletjeti mjesto oštećenja u vremenu od l/v = 10 mikrosekundi, uprkos činjenici da je tipično vrijeme aktivacije trombocita minute, za neke događaje (recimo, aktivacija integrina) nekoliko sekundi, ali ni stoti deo sekunde. Ovo dovodi do jedinog mogućeg zaključka, koji je sada eksperimentalno potvrđen: da bi se normalno aktivirao, trombocit se prvo mora pričvrstiti na mjesto oštećenja.

Štaviše, isto važi i za naknadne događaje povećanja veličine tromba - agregacije. Trombocit koji lebdi iznad tromba koji raste u arteriji mora imati vremena da mu se pridruži za stotinke sekunde. Stoga se agregacija u tijelu također može dogoditi samo na jedan način: prvo agregacija, a zatim aktivacija.

Drugi problem je kretanje trombocita u sudu preko krvotoka. Ako su trombociti bili ravnomjerno raspoređeni u krvi i mirno se kretali laminarnim tokom duž žile (a u slučaju ozljede, duž rane), svaki po svojoj liniji toka, tada se ne bi mogli približiti mjestu ozljede kako bi izvršili svoj zadatak. u hemostazi: za adheziju na mjestu oštećenja ili pričvršćivanje na već aktivirani trombocit u trombi, potrebna je neka vrsta fizičke sile da se stanice dovedu u kontakt. U in vitro testovima, ovaj zadatak se obično izvodi pomoću magnetne mješalice; šta radi u organizmu?

Gore navedena razmatranja, naravno, ne mogu poslužiti kao dokaz nove slike trombocitne hemostaze i tromboze. Ova nova slika, koja će biti prikazana u nastavku, nastala je u proteklih 10 godina kao rezultat aktivnog eksperimentalnog rada mnogih istraživača, među kojima vodeću ulogu ima laboratorij Shaun P. Jackson u Australiji; Štaviše, velika većina rezultata dobijena je pomoću video mikroskopije

opažanja stvaranja tromba in vivo. Numeričke procjene koje su predstavljene pažnji čitatelja namijenjene su samo da pokažu nestvarnost i unutarnju nedosljednost tradicionalne ideje o agregaciji trombocita.

Kako nastaje trombocitni tromb u stvarnosti?

Prvi korak je pomicanje trombocita na zidove žile, koje vrše crvena krvna zrnca. Crvena krvna zrnca zauzimaju skoro polovinu njegovog volumena; one su za red veličine veće od trombocita i po koncentraciji i po masi. Sudari crvenih krvnih zrnaca koji se kreću različitim brzinama na različitim protočnim linijama dovode do njihove preraspodjele i koncentracije u blizini ose žile. Mnogi detalji ovog procesa su nejasni, ali slične preraspodjele su uočene u suspenzijama čestica različitih vrsta, ne samo u krvi. Laki i mali trombociti se konstantno istiskuju na periferiju, što je izuzetno zgodno, jer se upravo tu, u blizini potencijalnih mjesta oštećenja, nalazi njihovo radno mjesto; Dakle, lokalna koncentracija trombocita u blizini zida krvnog suda je red veličine veća od prosjeka u krvi.

Štoviše, čak i blizu stijenki žile, trombociti se konstantno sudaraju s crvenim krvnim zrncima, što zapravo dovodi do samog miješanja koje je neophodno za interakciju. Zahvaljujući takvim sudarima, trombociti su često pritisnuti na zid, a ako tamo postoji mjesto oštećenja, mogu se zakačiti za njega. Pored 2 glavna mehanizma za koja su izgrađene pouzdane teorije - pomicanja i stalnog guranja - sada se raspravlja o drugim, ali je eksperimentalna činjenica neosporna: prisustvo eritrocita povećava brzinu rasta agregata trombocita na oštećenoj površini više od 10 puta.

Drugi problem je potreba da se brzo i pažljivo zaustavi trombocit koji se nađe na mjestu oštećenja ili u blizini krvnog ugruška koji raste. Da bi učestvovao u formiranju hemostatskog čepa ili tromba, trombocit mora ugasiti svoju značajnu brzinu. U tu svrhu postoji poseban receptor na trombocitima, glikoprotein Ib-V-IX i von Willebrand faktor rastvoren u krvi (slika 6). Ovaj faktor, koji cirkuliše u obliku velikih multimera prečnika do 100 nanometara, u stanju je da se reverzibilno veže za kolagen i trombocite u trombu, tako da ih brzo obloži. Trombociti jure prianjajući za von Willebrand faktor i počinju da se zaustavljaju. Ako bi direktno vezali kolagen, onda bi njihovo naglo zaustavljanje moglo biti štetno, ali slabo vezani von Willebrand faktor može se odvojiti i ponovo vezati za kolagen, tako da se trombociti mogu brzo oporaviti.

da uspori, klizeći samo nekoliko njegovih dužina, poput aviona koji sleće na njegov stomak.

Aktivacija u ovom pristupu nije prva, već posljednja faza u stvaranju krvnog ugruška. Trombocit koji je reverzibilno vezan za mjesto ozljede može se odvojiti; međutim, aktivacija ga može stabilizirati. Trombociti prvog sloja, koji se nalaze direktno na kolagenu, aktiviraju se kolagenom preko receptora za glikoprotein VI, a zatim se čvrsto vezuju za kolagen preko integrin a2p1 receptora: proteini ove porodice mogu da promene svoju konformaciju i snagu vezivanja za cilj. pod uticajem intracelularnih signala (slika 6) . U svom normalnom stanju, ne stupa u interakciju s kolagenom, ali kada se aktivira, čvrsto je vezan za njega.

Pričvršćivanje narednih slojeva trombocita, odnosno stvarni rast krvnog ugruška, odvija se na sličan način: ćelije u početku labavo sjede na von Willebrand faktor, a nakon aktivacije se sigurno vezuju preko integrinskih receptora. Razlika je u tome što trombociti međusobno komuniciraju preko drugog integrina, nazvanog aPbp3 (ili glikoprotein Pb-Sha): ovi receptori "hvataju" molekule fibrinogena s obje strane i kroz takve "mostove fibrin-gena" vezuju pojedinačne trombocite. Druga razlika je u tome što se sljedeći slojevi trombocita ne aktiviraju kontaktom s kolagenom (koji je već prekriven prvim slojem), već topljivim aktivatorima, koje ili luče same trombocite (ADP, tromboksan A2) ili se formiraju tokom rad sistema koagulacije plazme (trombin). Važno je još jednom naglasiti da ovi aktivatori djeluju isključivo unutar tromba: brzi tok izvan njega ih odnosi, sprječavajući regrutaciju novih stanica u tromb.

Slika rasta trombocita in vivo sada je prilično dobro utvrđena, a gore opisani slijed događaja je općenito prihvaćen. Međutim, u njemu ima mnogo nejasnih područja, o kojima će biti riječi u nastavku.

Problemi u dijagnostici funkcije trombocita

Trenutno se najmanje 90% dijagnostike funkcije trombocita izvodi pomoću studija agregacije. Principi i ograničenja ovog pristupa su razmatrani gore; Glavni problem je što nijedan od testova agregacije ne odgovara onome što se dešava in vivo.

Vjerovatno još 10% funkcionalne procjene daje protočna citometrija, koja nam omogućava da odredimo antigeni sastav proteina na površini trombocita. Najobučeniji stručnjaci također mogu koristiti citometriju za detaljnije opisivanje funkcija trombocita: aktivacija integrina, oslobađanje granula i fosfatidilserin. Ovo pruža korisne informacije o pojedinačnim molekulima i mogućnostima ćelije. Međutim, sve ovo ne daje odgovor na pitanje. opšte pitanje: kako općenito adekvatno procijeniti funkciju trombocita?

Najprirodniji odgovor: trebamo natjerati trombocite da formiraju krvne ugruške u uvjetima bliskim fiziološkim. Protočne komore, u kojima se mikroskopski proučava adhezija trombocita na supstrat obložen kolagenom, sada dobijaju sve veću upotrebu. U ovom trenutku već postoje komercijalno dostupne kamere i njihova standardizacija je u toku, iako je bilo kakva značajna klinička upotreba u praksi dijagnostičkog kompleksa još daleko. Mogući rival video mikroskopiji su slični pristupi koji se koriste

Na GP Ib-V-IX | GP VI

radnja bez čina

kolagen

Rice. 6. Glavni mehanizam inicijalnog rasta trombocitnog tromba. Primarna fiksacija trombocita na mjestu oštećenja odvija se kroz interakciju glavnog adhezionog receptora glikoproteina III-Y-1X sa posrednim molekulom von Willebrand faktora (vWF), vezan za izloženi kolagen (korak 1). Glikoprotein VI signalnog receptora se zatim vezuje za kolagen, što dovodi do aktivacije trombocita (korak 2). Aktivacija receptora agregacije integrina a2p1 (služi za vezivanje kolagena) i aShp3 (za vezivanje preko fibrinogenih mostova sa drugim trombocitima) potiče fiksaciju aktiviranog trombocita na kolagen (korak 3) i stvara osnovu za dalji rast tromba. Reproducirano iz

u uređajima kao što je RBL, gdje se procjenjuje sposobnost trombocita da agregatima začepe uložak kroz koji se pumpa puna krv.

Problemi korekcije funkcije trombocita

Kontrola funkcije trombocita jedan je od glavnih načina borbe protiv arterijske tromboze gotovo svake prirode. U početku je glavni lijek za ovu svrhu bio aspirin, koji blokira sintezu tromboksana A2: uprkos duga istorija lijeka, tek u 2. polovini 20. stoljeća otkrivena je njegova sposobnost da suzbije stvaranje tromba i smanji rizik od srčanog udara. Devedesetih godina prošlog veka pojavili su se efikasni antiagregacioni agensi koji napadaju receptor fibrinogena, integrin αββ3: abciksimab, tirofiban, eptifibatid, kao i domaći lek monafram. Sada su obje ove klase lijekova u velikoj mjeri zamijenjene inhibitorima adenozin difosfat receptora P2Y12: to su prvenstveno klopidogrel, kao i prasugrel, tikagrelor i kangrelor. Trenutno se aktivno radi na stvaranju novih lijekova koji su efikasniji i imaju manji rizik od krvarenja.

Teži zadatak je šta učiniti kada ima malo trombocita ili ne rade dobro? Tehnologija pripreme i skladištenja koncentrata trombocita za transfuziju postigla je najbolje rezultate do sredine 1980-ih i od tada nije došlo do temeljnih otkrića. Kratak životni vek, visok rizik od imunoloških komplikacija i infekcija pacijenta, sve veći nedostatak davalaca u cijelom svijetu, te donedavni nedostatak umjetnih nadomjestaka čine situaciju s transfuzijom trombocita krajnje nezadovoljavajućom, možda i najproblematičnijom od svih. komponente krvi.

Tokom poslednjih decenija, jedini dostupan za kliničku upotrebu

Alternativa konvencionalnim koncentratima trombocita bila je krioprezervacija, što je omogućilo da se njihov životni vijek produži na nekoliko godina. Ali nije bilo moguće u potpunosti riješiti problem očuvanja svojstava trombocita tijekom zamrzavanja i odmrzavanja. Osim toga, pokazalo se da je zamrzavanje ovih ćelija povezano s toliko tehničkih poteškoća da do sada nije bilo u stanju uspješno konkurirati upotrebi nezamrznutih koncentrata trombocita.

Zato se svake godine sve više pažnje posvećivalo radu koji je započeo još 1950-ih godina na stvaranju novih lijekova i metoda koji mogu radikalno produžiti život i jednostavnost upotrebe donorskih trombocita, ili čak stvoriti moguće analoge koji im omogućavaju potpuno odustati od njihove upotrebe. Antibakterijski lijekovi i inhibitori aktivnosti trombocita, novi kriokonzervansi i protokoli zamrzavanja, liofilizirani trombociti i vezikuli na bazi trombocitnih membrana, crvena krvna zrnca s hemostatskom funkcijom i liposomi nisu potpuna lista pristupa koji se koriste za postizanje ovog cilja. Neki od njih - na primjer, liofilizirani trombociti B1a$1x - već su u aktivnim kliničkim ispitivanjima.

Misterije trombocita

Subpopulacije. Jedna od najintrigantnijih misterija trombocita je njihova heterogenost. Kada se trombociti aktiviraju, formiraju se 2 subpopulacije sa dramatično različitim svojstvima. Njihovo formiranje je kontrolirano nepotpuno proučenim signalnim putevima. Zanimljivo je da jedna od ovih subpopulacija ubrzava reakcije koagulacije, dok je druga sposobna za normalnu agregaciju (slika 7). Ovo razdvajanje 2 glavne funkcije trombocita je intrigantno, ali za to još nije ponuđeno objašnjenje.

Rice. 7. Subpopulacije krvnih pločica radikalno se razlikuju po svojoj sposobnosti da ubrzaju reakcije koagulacije i agregacije. Tačkasti grafikoni suspenzije neaktiviranih (lijevo) i aktiviranih (desno) trombocita na protočnom citometru. X-osa prikazuje fluorescenciju aneksina V, markera fosfatidilserina. Y-osa pokazuje fluorescenciju fibrinogena. Može se vidjeti da se nakon aktivacije formiraju 2 subpopulacije trombocita, od kojih je jedna redova veličine viša od druge u pogledu nivoa fosfatidilserina, ali je jednako inferiorna u vezivanju fibrinogena. Reproducirano iz

Zaustavljanje rasta krvnog ugruška. Gore smo ispitali slijed događaja koji se dešavaju tokom rasta trombocitnog tromba. Jedan od najvećih problema koji i dalje ostaje neriješen je pitanje zaustavljanja ovog rasta: zašto u nekim slučajevima dolazi do potpune okluzije žile, dok u drugim posuda ostaje slobodna? Sada postoji desetak hipoteza koje objašnjavaju ograničenu veličinu krvnog ugruška. Jedna od najaktivnijih rasprava je pretpostavka da se uz periodično uništavanje gornjeg, nestabilnog dijela tromba, izlaže fibrin koji se formira unutra. Ipak, ovo pitanje je još daleko od rješenja. Sa velikom vjerovatnoćom, može postojati više mehanizama za zaustavljanje, a za različite posude ti mehanizmi mogu biti različiti.

Trombociti i kontaktni put. Prilično davno, istraživači su pokazali da trombociti imaju potencijal da aktiviraju zgrušavanje krvi kroz kontaktni put. Glavnim kandidatima za ulogu aktivatora smatraju se polifosfati koji se oslobađaju iz gustih granula nakon aktivacije, iako postoje opovrgavanja ovog gledišta. Čini se da je kroz ovu aktivaciju kontaktni put aktivacije koagulacije važan za rast trombocitnog tromba, kao što je pokazano u nedavnom radu. Ovo otkriće nam omogućava da se nadamo stvaranju novih antitrombotičkih lijekova.

Mikrovezikule. Kada se aktiviraju, trombociti oslobađaju mikročestice lipida, koje se nazivaju i mikrovezikule. Receptori na njihovoj površini su koncentrisani, te stoga ove čestice imaju ogromnu prokoagulantnu aktivnost: njihova površina je 50-100 puta aktivnija od površine aktiviranih trombocita. Zašto trombociti to rade nije jasno. Međutim, u krvi čak i zdravih ljudi broj takvih vezikula je značajan, a značajno se povećava kod pacijenata sa različitim kardiovaskularnim i hematološkim oboljenjima, što je u korelaciji sa rizikom od tromboze. Proučavanje ovih

vezikule ometa njihova mala veličina (30-300 nm), mnogo manja od talasne dužine svetlosti.

Trombociti u onkologiji. Trombociti igraju dvostruku ulogu u nastanku raka. S jedne strane, povećavaju rizik i težinu venske tromboze, karakteristične za pacijente s tumorima. S druge strane, oni direktno utiču na tok bolesti regulišući angiogenezu, rast tumora i metastaze kroz niz mehanizama. Mehanizmi interakcije između trombocita i ćelija raka su složeni i slabo shvaćeni, ali njihova izuzetna važnost je sada van sumnje.

Zaključak

Trombociti su najvažniji učesnici kako normalne hemostaze tako i patološkog trombotičkog procesa, čije je stanje kritično za niz bolesti i stanja. Trenutno je napravljen značajan napredak u razumijevanju funkcionisanja trombocita i korekcije trombocitne hemostaze, ali je broj znanstvenih misterija i dalje vrlo velik: interakcija trombocita sa hemostazom u plazmi, složenost signalizacije, mehanizmi regulacije trombocita. rast i zaustavljanje trombocitnog tromba. Nedavno su se pojavile informacije o interakciji trombocita s drugim tjelesnim sistemima, što ukazuje na njihovu važnu ulogu u imunitetu i morfogenezi. Glavne praktične poteškoće su nedostatak adekvatnih integralnih testova funkcije trombocita i teškoća normalizacije ove funkcije.

Priznanja

Rad autora je podržan grantom Ruske fondacije za osnovna istraživanja 14-04-00670, kao i grantovima Programa osnovnih istraživanja Ruska akademija nauke "Molekularna i ćelijska biologija" i " Osnovna istraživanja za razvoj biomedicinskih tehnologija."

LITERATURA

1. Sixma J.J., van den Berg A. Hemostatski čep kod hemofilije A:

morfološka studija formiranja hemostatskog čepa u ranama na koži u vrijeme krvarenja kod pacijenata sa teškom hemofilijom A. Br J Haematol 1984;58(4):741-53.

2. Maxwell M.J., Westein E., Nesbitt W.S.

et al. Identifikacija 2-faznog procesa agregacije trombocita koji posreduje formiranje tromba ovisno o smicanju. Blood 2007;109(2):566-76.

3. Mazurov A.V. Fiziologija i patologija trombocita. M.: GEOTAR-Media, 2011. 480 str.

4. Michelson A.D. Trombociti. 3. izdanje, 2013. London; Waltham, MA: Academic Press, xliv, 1353 str.

5. Ohlmann P., Eckly A., Freund M. et al. ADP inducira delimičnu agregaciju trombocita bez promene oblika i potencira agregaciju izazvanu kolagenom u odsustvu Galphaqa. Blood 2000;96(6):2134-9.

6. Bijeli J.G. Metode elektronske mikroskopije za proučavanje strukture i funkcije trombocita. Metode Mol Biol 2004;272:47-63.

7. van Nispen tot Pannerden H., de Haas F., Geerts W. et al. Revidirana unutrašnjost trombocita:

elektronska tomografija otkriva tubularne podtipove alfa-granula. Blood 2010;116(7):1147-56.

8. Blair P., Flaumenhaft R. Alfa-granule trombocita: osnovna biologija i klinički korelati. Blood Rev 2009;23(4):177-89.

9. Abaeva A.A., Canault M., Kotova Y.N. et al. Prokoagulantni trombociti formiraju "kapu" prekrivenu proteinom alfa granula na svojoj površini koja potiče njihovo pričvršćivanje

na agregate. J Biol Chem 2013;288(41):29621-32.

10. Kaplan Z.S., Jackson S.P. Uloga

trombocita kod aterotromboze. Hematologija

Am Soc Hematol Educ Program 2011;2011:51-61.

11. Tanaka K.A., Key N.S., Levy J.H. Koagulacija krvi: hemostaza i regulacija trombina. Anesth Analg 2009;108(5): 1433-46.

12. Pantelejev M.A., Ananjeva N.M., Greco N.J. et al. Dvije subpopulacije

trombinom aktiviranih trombocita razlikuju se po vezivanju komponenti kompleksa koji aktivira intrinzični faktor X. J Thromb Haemost 2005;3(11):2545-53.

13. Topalov N.N., Kotova Y.N., Vasil"ev S.A., Panteleev M.A. Identifikacija puteva transdukcije signala uključenih u formiranje subpopulacija trombocita nakon aktivacije. Br J Haematol 2012;157(1):105-15.

14. Yakimenko A.O., Verholomova F.Y., Kotova Y.N. et al. Identifikacija različitih proagregacijskih sposobnosti aktiviranih subpopulacija trombocita. Biophys J 2012;102(10):2261-9.

15. Kotova Y.N., Ataullakhanov F.I., Panteleev M.A. Formiranje obloženih trombocita regulirano je lučenjem gustih granula adenozin 5"difosfata koji djeluje preko P2Y12 receptora. J Thromb Haemost 2008;6(9):1603-5.

16. Uijttewaal W.S., Nijhof E.J., Bronkhorst P.J. et al. Višak trombocita u blizini zida uzrokovan lateralnom migracijom eritrocita u krv koja teče. Am J Physiol 1993; 264 (4 Pt 2): H1239-44.

17. Tokarev A.A., Butylin A.A., Ataullakhanov F.I. Adhezija trombocita iz posmičnog krvotoka kontrolira se povratnim sudarima s eritrocitima u blizini zida. Biophys J 2011;100(4):799-808.

18. Turitto V.T., Weiss H.J. Crvena krvna zrnca: njihova dvostruka uloga u stvaranju tromba. Science 1980;207(4430):541-3.

19. Nieswandt B., Brakebusch C., Bergmeieret W. et al. Glikoprotein VI, ali ne i alfa2beta1 integrin je neophodan za interakciju trombocita sa kolagenom. EMBO J 2001;20(9):2120-30.

20. Westein E., de Witt S., Lamers M. et al. Praćenje in vitro formiranja tromba sa novim mikrofluidnim uređajima. Trombociti 2012;23(7):501-9.

21. Favaloro E.J., Bonar R. Eksterna procjena kvaliteta/testiranje stručnosti i interna kontrola kvaliteta za PFA-100 i PFA-200: ažuriranje. Semin Thromb Hemost 2014;40(2):239-53.

22. Kristensen S.D., Würtz M., Grove E.L. et al., Savremena upotreba inhibitora glikoproteina IIb/IIIa. Thromb Haemost 2012;107(2):215-24.

23. Ferri N., Corsini A.,

Bellosta S. Farmakologija novih inhibitora P2Y12 receptora: uvid u farmakokinetička i farmakodinamička svojstva. Drugs 2013;73(15):1681-709.

24. Bode A.P., Fischer T.H. Liofilizirani trombociti: pedeset godina u izradi. Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol 2007;35(1):125-33.

25. Heemskerk J.W., Mattheij N.J., Cosemans J.M. Koagulacija na bazi trombocita: različite populacije, različite funkcije.

J Thromb Haemost 2013;11(1):2-16.

26. Tosenberger A., Ataullakhanov F., Bessonov N. et al. Modeliranje rasta tromba u protoku DPD-PDE metodom. J Theor Biol 2013;337:30-41.

27. Bäck J., Sanchez J., Elgue G. et al. Aktivirani ljudski trombociti induciraju kontaktnu aktivaciju posredovanu faktorom XIIa. Biochem Biophys Res Commun 2010;391(1):11-7.

28. Müller F., Mutch N.J., Schenk W.A. et al. Trombocitni polifosfati su proinflamatorni i prokoagulantni medijatori in vivo. Cell 2009; 139(6):1143-56.

29. Faxälv L., Boknäs N., Ström J.O. et al. Testiranje polifosfata: dokaz protiv aktivacije faktora XII izazvane trombocitima. Blood 2013;122(23):3818-24.

30. Hagedorn I., Schmidbauer S., Pleines I. et al. Rekombinantni humani albumin inhibitor faktora XIIa Infestin-4 ukida stvaranje okluzivnog arterijskog tromba bez utjecaja na krvarenje. Tiraž 2010;121(13):1510-7.

31. Sinauridze E.I., Kireev D.A., Popenko N.Y. et al. Membrane mikročestica trombocita imaju 50 do 100 puta veću specifičnu prokoagulantnu aktivnost od aktiviranih trombocita. Thromb Haemost 2007;97(3):425-34.

32. Hargett L.A., Bauer N.N. O poreklu mikročestica: od „prašine trombocita“

medijatorima međustanične komunikacije. Pulm Circ 2013;3(2):329-40.

33. Riedl J., Pabinger I., Ay C. Trombociti u raku i trombozi. Hamostaseologie 2014;34(1):54-62.

34. Sharma D., Brummel-Ziedins K.E., Bouchard B.A., Holmes C.E. Trombociti u progresiji tumora: faktor domaćina koji nudi višestruke potencijalne ciljeve u liječenju raka. J Cell Physiol 2014;229(8):1005-15.

Glavne strukture (organele) trombocita su: (SLIKA)

1) spoljna membrana sa ugrađenim glikoproteinima;

2) mikrotubule;

3) mikrofilamenti;

4) gust cevasti sistem;

5) granule (guste i a-granule);

6) otvoreni cevasti sistem;

7) amorfni proteinski sloj (glikokaliks).

Vanjska membrana. Dvoslojna fosfolipidna membrana je mjesto aktivacije i funkcioniranja različitih kompleksa faktora koagulacije plazme (slika 5.1.).

Vanjska membrana sadrži glikoproteine koji djeluju kao površinski receptori. Glikoprotein Ib– interni transmembranski protein. To je receptor za von Willebrand faktor (VWF). Neophodan za adheziju trombocita na subendotel žile. Glikoprotein llb-llla – Ca 2+-zavisni membranski proteinski kompleks koji funkcionira kao receptor fibrinogena. Neophodan za agregaciju trombocita. Vezivanjem za fibrinogen dovodi do stvaranja fibrinogenih mostova između trombocita.

mikrotubule, koji se nalaze direktno ispod membrane trombocita i formiraju periferni greben u ekvatorijalnoj ravni ćelije, sastoje se od namotanog tubulina (kontraktilni protein sličan aktomiozinu). Mikrotubule su uključene u formiranje citoskeleta (održavanje diskoidnog oblika trombocita) i osiguravanje kontrakcije (kompresije) trombocita nakon njegove aktivacije.

Mikrofilamenti– filamenti spojeni u snopove koji sadrže aktin. Učestvuju u formiranju pseudopodija aktiviranih trombocita.

Gusti cevasti sistem selektivno veže dvovalentne katjone, služi kao rezervoar kalcijuma i mjesto sinteze trombocitne ciklooksigenaze i prostaglandina.

Granule sadrže različite supstance koje se luče tokom aktivacije trombocita i neophodne su za njihovu agregaciju. Guste granule– elektronski mikroskopski guste čestice koje sadrže visoko koncentrirani adenozin difosfat (ADP) i Ca 2+, kao i serotonin i druge medijatore koji se luče tokom reakcije oslobađanja. a- granule sadrže različite proteine koje luče aktivirane trombocite (trombocitni faktor 4, b-trombomodulin, trombocitni faktor rasta, fibrinogen, faktor V, von Willebrand faktor), kao i glikoproteine neophodne za adheziju (najvažniji su trombospondin i fibronektin).

Otvoreni cevasti sistem– mreža površinskih membranskih invaginacija koje značajno povećavaju površinu ćelije i područje njenog kontakta sa plazmom. Kroz ovaj sistem se oslobađa sadržaj granula trombocita.

Amorfni proteinski sloj(glikokaliks) debljine 15-20 nm, uz membranu trombocita, odlikuje se većim sadržajem niza proteina nego u plazmi, uključujući faktore zgrušavanja krvi koje trombociti transportuju do mjesta gdje krvarenje prestaje.

5.1.2.2. Funkcioniranje trombocita u hemostazi

Trombociti učestvuju u svim važnijim događajima hemostaze.

1. Oni obavljaju angiotrofnu funkciju (Z.S. Barkagan), budući da su fiziološki "hranioci" endotela: u prosjeku se do 35.000 trombocita apsorbira iz 1 mm 3 krvi dnevno.

2. Održavaju spazam oštećenih sudova lučenjem (oslobađanjem) vazoaktivnih supstanci - serotonina, kateholamina, b-tombomodulina itd.

3. Formiraju trombocitni čep, koji je osnova punopravnog krvnog ugruška (tromba).

4. Učestvujte u koagulaciji i fibrinolizi:

a) faktori koagulacije koje luče trombociti tokom reakcije oslobađanja (fibrinogen, von Willebrand faktor, faktor V, kininogen visoke molekularne težine, faktor XIII) ne samo da djeluju sa samim trombocitima, već također učestvuju u kaskadi koagulacije;

b) promovišu kontaktnu aktivaciju koagulacije i fibrinolize (površina aktiviranih trombocita ima visok afinitet za faktor XII i kininogen visoke molekularne težine, koji su u kompleksu sa kalikreinom i faktorom XI);

c) membrana trombocita služi kao matrica na kojoj se odvija orijentacija i formiranje kompleksa faktora koagulacione kaskade;

d) von Willebrand faktor, koji igra ulogu u adheziji trombocita, dio je podjedinica faktora VIII i stabilizuje njegovu koagulacionu komponentu.

5. Stimulirati popravak oštećenog vaskularnog zida (prilijepljene trombocite oslobađaju faktor rasta, koji stimuliše proliferaciju glatkih mišićnih ćelija i endotela, kao i stvaranje kolagena).

Kontakt trombocita sa površinom oštećenog vaskularnog zida konzistentno dovodi do: 1) aktivacije ćelije; 2) adhezija; 3) primarno agregiranje; 4) reakcije oslobađanja; 5) sekundarno agregiranje .

Aktivacija. Stimulator aktivacije trombocita (i istovremeno sinteze faktora tromborezistencije od strane endotelnih stanica) su promjene fizičkih parametara krvotoka koje nastaju kao rezultat turbulentnog kretanja krvi u području oštećenja vaskularnog zida, stenoza žile, ili zbog povišenog krvnog pritiska ili povećanog viskoziteta krvi.

Adhezija– adhezija trombocita na vaskularni zid na mjestu njegovog oštećenja.

Trombociti se ne prianjaju za intaktni (neoštećeni) endotel, što je osigurano prisustvom fizioloških inhibitora adhezije koje proizvode endotelne ćelije (prostaciklin, endotelni relaksacioni faktor, endotelin, tkivni aktivator plazminogena).

Kada je endotel oštećen i dođe u kontakt sa subendotelnim strukturama, trombociti se aktiviraju u roku od nekoliko sekundi i prianjaju na zid krvnih žila.

Glavni faktori neophodni za adheziju trombocita na subendotel su: 1) kolagen (glavni stimulator adhezije i primarne agregacije trombocita); 2) glikoprotein Ib; 3) von Willebrand faktor (VWF), sa glavnim VWF receptorom koji se povezuje sa glikoproteinom Ib i povezuje trombocit sa subendotelom, a drugi dio VWF molekula se povezuje sa glikoproteinom llb-llla; 4) neke druge supstance (fibronektin, trombospondin), joni kalcijuma (Ca 2+) i magnezijuma (Mg 2+).

Kao rezultat stimulacije koju pokreću agonisti receptora trombocita, trombociti se aktiviraju: stanice nabubre, zaokruže se i formiraju procese. Djelovanje agonista receptora trombocita također dovodi do formiranja receptora fibrinogena - kompleksa glikoproteina IIb-IIIa.

Primarna agregacija ograničena i reverzibilna i javlja se odmah nakon promjene oblika trombocita.

Reakcija otpuštanja. Nakon početne stimulacije, trombociti oslobađaju sadržaj svojih granula kroz otvoreni tubularni sistem. Ova sekretorna funkcija trombocita ovisi o energiji i osiguravaju je stanične zalihe adenozin trifosfata (ATP). Granularni ADP (stimulator naknadne agregacije), fibrinogen, von Willebrand faktor i drugi koagulacijski i adhezivni proteini se oslobađaju iz granula u plazmu, obezbeđujući dalju stimulaciju agregacije, adhezije i komunikacije sa koagulacionom kaskadom.

Sinhrono s reakcijom oslobađanja aktivira se fosfolipaza trombocita, što dovodi do oslobađanja arahidonske kiseline iz stanične membrane. Arahidonsku kiselinu metaboliše enzim ciklooksigenaza (prisutan u gustom tubularnom sistemu) da bi se formirali različiti prostaglandini i tromboksan A2. Tromboksan A 2 je najvažniji stimulator dalje (sekundarne) agregacije. Aspirin i drugi nesteroidni protuupalni lijekovi inhibiraju ciklooksigenazu, uzrokujući specifičan funkcionalni defekt trombocita.

Sekundarna agregacija(nepovratan) prati metabolizam arahidonske kiseline i izostaje kada je djelovanje ciklooksigenaze blokirano aspirinom.

Događaji nakon aktivacije trombocita in vivo (Slika 5.2.).
	Adhezija trombocita na subendotel oštećene žile istovremeno je i stimulans (okidač) za njihovu aktivaciju i agregaciju. Fibrinogen osigurava agregaciju trombocita vezivanjem za receptore trombocita (GP llb-llla kompleksi) nakon aktivacije trombocita.
	Oslobađanje ADP i proizvodnja tromboksana A 2. ADP i TXA 2 pojačavaju agregaciju i daju pozitivan povratne informacije dok se ne formira trombocitni čep i započne koagulacija. Daljnju stimulaciju agregacije provodi trombin, moćni agonist trombocita koji proizvodi koagulacijski sistem.
	Sekundarna agregacija. Ireverzibilni agregati trombocita koji se formiraju na kraju su upleteni u mrežu fibrinskog ugruška.

Posljednja faza primarne hemostaze, koja se utvrđuje in vitro i očito se javlja i in vivo, je povlačenje (kontrakcija) krvnog ugruška koji sadrži agregirane trombocite i zatvaranje defekta na zidu žila. Fiziološki smisao retrakcije je zatezanje rubova rane i ograničavanje veličine trombotičkih masa kako bi se održala prohodnost krvnih žila.

Krvne pločice, trombociti, u svježoj ljudskoj krvi izgledaju kao mala, bezbojna tijela okruglog, ovalnog ili vretenastog oblika, veličine 2-4 mikrona. Mogu se ujediniti (aglutinirati) u male ili velike grupe (slika 4.29). Njihova količina u ljudskoj krvi kreće se od 2,0×10 9 /l do 4,0×10 9 /l. Krvne ploče su beznuklearni fragmenti citoplazme odvojeni od megakariocita - divovskih stanica koštane srži.

Trombociti u krvotoku imaju oblik bikonveksnog diska. Kada su krvni razmazi obojeni azurno-eozinom, krvni trombociti otkrivaju svjetliji periferni dio - hijalomer i tamniji, zrnati dio - granulomer, čija struktura i boja mogu varirati ovisno o stupnju razvoja krvnih pločica. Populacija trombocita sadrži i mlađe i diferencirane i stare oblike. Hijalomera kod mladih ploča je obojena plavo (bazofilen), a kod zrelih – ružičasto (oksifilen). Mladi oblici trombocita su veći od starijih.

U populaciji trombocita postoji 5 glavnih tipova krvnih pločica:

1) mladi - sa plavim (bazofilnim) hijalomerom i pojedinačnim azurofilnim granulama u crvenkasto-ljubičastom granulomeru (1-5%);

2) zreli - sa blago ružičastim (oksifilnim) hijalomerom i dobro razvijenom azurofilnom granularnošću u granulomeri (88%);

3) stari - sa tamnijim hijalomerom i granulomerom (4%);

4) degenerativni - sa sivkasto-plavim hijalomerom i gustim tamnoljubičastim granulomerom (do 2%);

5) džinovski oblici iritacije - sa ružičasto-jorgovanom hijalomerom i ljubičastim granulomerom, veličine 4-6 mikrona (2%).

Kod bolesti se može promijeniti odnos različitih oblika trombocita, što se uzima u obzir prilikom postavljanja dijagnoze. Uočava se povećanje broja juvenilnih oblika kod novorođenčadi. Kod raka se povećava broj starih trombocita.

Plazmalema ima debeli sloj glikokaliksa (15-20 nm), formira invaginacije sa izlaznim tubulima, takođe prekrivenim glikokaliksom. Plazmalema sadrži glikoproteine koji djeluju kao površinski receptori uključeni u procese adhezije i agregacije krvnih pločica.

Citoskelet u trombocitima je dobro razvijen i predstavljen je aktinskim mikrofilamentima i snopovima (po 10-15) mikrotubula, koji se nalaze kružno u hiolomeru i uz unutrašnji dio plazmaleme (sl. 46-48). Elementi citoskeleta osiguravaju održavanje oblika krvnih pločica i sudjeluju u formiranju njihovih procesa. Aktinski filamenti su uključeni u smanjenje volumena (retrakcije) krvnih ugrušaka koji se formiraju.

Krvne ploče imaju dva sistema tubula i cijevi, jasno vidljiva u hijalomeri pod elektronskim mikroskopom. Prvi je otvoreni sistem kanala povezanih, kao što je već navedeno, sa invaginacijama plazmaleme. Kroz ovaj sistem, sadržaj granula trombocita se oslobađa u plazmu i supstance se apsorbuju. Drugi je takozvani gusti cevasti sistem, koji je predstavljen grupama cevi sa elektronski gustim amorfnim materijalom. Sličan je glatkom endoplazmatskom retikulumu i formira se u Golgijevom aparatu. Gusti tubularni sistem je mjesto sinteze ciklooksigenaze i prostaglandina. Osim toga, ove cijevi selektivno vezuju dvovalentne katjone i djeluju kao rezervoar Ca 2+ jona. Gore navedene supstance su neophodne komponente procesa zgrušavanja krvi.

Rice. 4.30. Trombociti. A – trombociti u razmazu periferne krvi. B – dijagram strukture trombocita. B – TEM. D – neaktivirane (označene strelicom) i aktivirane (označene sa dvije strelice) trombociti, SEM. E – trombociti zalijepljeni za zid aorte u području oštećenja endotelnog sloja (D, E – prema Yu.A. Rovenskikh) 1 – mikrotubule; 2 – mitohondrije; 3 – u-granule; 4 – sistem gustih cijevi; 5 – mikrofilamenti; 6 – sistem tubula povezanih sa površinom; 7 – glikokaliks; 8 – gusta tijela; 9 – citoplazmatski retikulum.

Oslobađanje Ca 2+ iz epruveta u citosol je neophodno kako bi se osiguralo funkcioniranje krvnih pločica (adhezija, agregacija, itd.).

U granulometru su identifikovane organele, inkluzije i posebne granule. Organele predstavljaju ribozomi (u mladim pločama), elementi endoplazmatskog retikuluma, Golgijev aparat, mitohondrije, lizozomi i peroksizomi. Postoje inkluzije glikogena i feritina u obliku malih granula.

Posebne granule u količini od 60-120 čine glavni dio granulomera i predstavljene su u dvije glavne vrste - alfa i delta granulama.

Prvi tip: a-granule- to su najveće (300-500 nm) granule, koje imaju finozrnasti centralni dio, odvojene od okolne membrane malim svijetlim prostorom. Sadrže različite proteine i glikoproteine uključene u procese zgrušavanja krvi, faktore rasta i hidrolitičke enzime.

Najvažniji proteini koji se luče tokom aktivacije trombocita su lamina faktor 4, p-tromboglobin, von Willebrand faktor, fibrinogen, faktori rasta (trombocitni PDGF, transformirajući TGFp), faktor koagulacije - tromboplastin; Glikoproteini uključuju fibronektin i trombospondin, koji igraju važnu ulogu u procesima adhezije trombocita. Proteini koji vežu heparin (razrjeđuju krv i sprečavaju je zgrušavanje) uključuju faktor 4 i p-tromboglobulin.

Druga vrsta granula su δ-granule(delta granule) - predstavljeni su gustim tijelima veličine 250-300 nm, koja imaju ekscentrično smješteno gusto jezgro okruženo membranom. Između kripti postoji dobro definisan svjetlosni prostor. Glavne komponente granula su serotonin, akumuliran iz plazme, i drugi biogeni amini (histamin, adrenalin), Ca 2+, ADP, ATP u visokim koncentracijama.

Osim toga, postoji i treća vrsta malih granula (200-250 nm), koju predstavljaju lizosomi (ponekad se nazivaju A-granule) koji sadrže lizozomalne enzime, kao i mikroperoksizomi koji sadrže enzim peroksidazu. Kada se ploče aktiviraju, sadržaj granula se oslobađa kroz otvoreni sistem kanala povezanih sa plazmalemom.

Glavna funkcija krvnih pločica je sudjelovanje u procesu zgrušavanja krvi – zaštitnom odgovoru tijela na oštećenja i sprječavanju gubitka krvi. Trombociti sadrže oko 12 faktora koji su uključeni u zgrušavanje krvi. Kada je zid žile oštećen, ploče se brzo agregiraju i prianjaju na nastale fibrinske niti, što rezultira stvaranjem krvnog ugruška koji zatvara ranu. U procesu stvaranja tromba postoji nekoliko faza koje uključuju mnoge komponente krvi.

Važna funkcija trombocita je njihovo učešće u metabolizmu serotonina. Trombociti su praktički jedini krvni elementi u kojima se akumuliraju rezerve serotonina iz plazme. Vezivanje serotonina trombocitima nastaje uz pomoć visokomolekularnih faktora krvne plazme i dvovalentnih kationa.

Tokom procesa zgrušavanja krvi iz trombocita se oslobađa serotonin, koji djeluje na vaskularnu permeabilnost i kontrakciju vaskularnih glatkih mišićnih stanica. Serotonin i njegovi metabolički proizvodi imaju antitumorsko i radioprotektivno djelovanje. Inhibicija vezivanja serotonina trombocitima pronađena je kod brojnih bolesti krvi - maligne anemije, trombocitopenične purpure, mijeloze itd.

Životni vijek trombocita je u prosjeku 9-10 dana. Stareće trombocite fagocitiraju makrofagi slezene. Povećana destruktivna funkcija slezene može uzrokovati značajno smanjenje broja trombocita u krvi (trombocitopenija). Da bi se to otklonilo potrebna je operacija - uklanjanje slezene (splenektomija).

Kada se broj krvnih pločica smanji, na primjer tijekom gubitka krvi, u krvi se nakuplja trombopoetin – glikoprotein koji stimulira stvaranje trombocita iz megakariocita koštane srži.