Supë sheqeri dhe agar sheqeri përgatitet duke shtuar një ose një karbohidrate në një sasi prej 0,5 deri në 1% në lëngun e zakonshëm të mishit ose agar të thjeshtë të shkrirë. Karbohidratet shpërndahen në një sasi të vogël uji dhe më pas shtohen në mediumin ushqyes. Sterilizimi i lëngut të sheqerit dhe agarit bëhet në aparat Koch për 3 ditë rresht nga 1 orë secila.
Agar gjaku, serumi ose lëngu ascitik përgatitur nën asepsi strikte. 20-25% serum steril ose lëng ascitik ose 5-25% gjak të defibrinuar steril shtohen në agarin e përfunduar pak alkalik, shkrihet dhe ftohet përsëri në 45°, derdhet në provëza ose shishe. Pas përzierjes së plotë (të shmangni formimin e flluskave dhe shkumës), agari në provëza kositet dhe përmbajtja e shisheve derdhet në enët Heidenreich. Supë me serum, lëng ascitik ose gjak përgatitet në të njëjtën mënyrë si agari, por pa ngrohje. Për të kontrolluar sterilitetin, lëngu vendoset në një termostat për 48 orë në 37°.

Mjete ushqyese diagnostikuese diferenciale. Përbërja dhe qëllimi.

Mjedis endo. Përgatitet menjëherë para përdorimit. Në 100 ml agar mish-peptone ose agar me lëng Hottinger (pH 7,6), shtoni sterilisht 1 g laktozë të pastër kimikisht të tretur në 5 ml ujë steril, ftoheni në 70° dhe shtoni një përzierje prej 0,5 ml të një tretësire të ngopur të bazës. fuchsin dhe 1 .25 ml tretësirë ​​të sapopërgatitur të sulfurit të natriumit 10%, tunden dhe derdhen në gota. Për t'u tharë, gotat e hapura vendosen në një termostat në 37° për 30 minuta.

Në mjedisin Endo, E. coli prodhon koloni të kuqe me një nuancë metalike, dhe bakteret e grupit tifo-paratifo dhe dizenteri prodhojnë koloni pa ngjyrë.

Seri e larmishme karbohidratesh (Hiss medium). Në 100 ml ujë shtoni 1 g pepton dhe 0,5 g kripë gjelle. Peptoni dhe kripa shpërndahen në ujë të nxehtë për disa minuta dhe filtrohen përmes një filtri letre (tretësira duhet të jetë plotësisht e pastër). Vendosni pH në 7.0. 1% e një prej karbohidrateve të përdorur shpërndahet në mjedisin e specifikuar, notat ulen në fund të epruvetave për të kapur gaz (duke treguar ndarjen e thellë të sheqernave) dhe shtohet një tregues. Si tregues përdoret si më poshtë:

a) tretësirë ​​e lakmusit - 5 ml për 100 ml medium. Në një mjedis acid, tretësira e lakmusit tregon skuqje, në një mjedis alkalik ajo merr ngjyrë blu;

b) azolitmina, e cila është një preparat lakmus i purifikuar, kripa e saj e kaliumit (0,25 g azolitmin shtohet për 1 litër medium);

c) bromothymol blau - për 1 litër medium, 1 ml tretësirë ​​alkooli 1,6% të treguesit (mjedisi bëhet i gjelbër, bëhet blu kur formohet një alkali, bëhet i verdhë kur formohet një acid);

d) Treguesi Andrede, i cili përbëhet nga 1 g fuchsin acid, 400 ml ujë të distiluar dhe 64 ml tretësirë ​​normale të hidroksidit të natriumit. Treguesi 1% i shtohet mediumit ushqyes. Mediumi në epruvetën duhet të marrë një ngjyrë të verdhë kashte pa një nuancë rozë. Në një mjedis acid, ngjyra e mediumit ndryshon në të kuqe.

Treguesi shtohet për të përcaktuar ndryshimet në reagimin e mediumit ushqyes që ndodhin nën ndikimin e fermentimit të karbohidrateve, d.m.th., për të identifikuar aktivitetin biokimik të mikrobeve. Kjo e fundit ka një rëndësi të madhe për diagnostikimin mikrobiologjik të një sërë sëmundjesh infektive (ethet tifoide, dizenteria, kolera etj.). Media me karbohidrate dhe një tregues derdhen në tuba sterilë dhe sterilizohen pjesërisht në 100° për 3 ditë.

Rresht i shkurtër lara-lara. Ndryshimet gjatë rritjes së E. coli, S. typhi.

Metodat për izolimin e kulturave të pastra të aerobeve.

Metoda Drigalski

Izolimi i një kulture të pastër anaerobe.

Shihni aftësitë praktike

Metodat virologjike. Qëllimi, parimi.

Metoda virologjike

Fazat kryesore:

1. Mbledhja e materialit testues.

2. Përzgjedhja e bazuar në parimin e citotropizmit dhe marrja e një sistemi testues të ndjeshëm, duke përcaktuar qëndrueshmërinë e tij.

3. Infeksioni i sistemit të përzgjedhur.

4.Tregimi i virusit bazuar në zbulimin e acidit nukleik, antigjeneve, hemaglutininës, CPD, përfshirjeve të tij.

5. Identifikimi dhe titrimi i virusit kryhet në bazë të:

a) përcaktimi i antigjeneve të virusit duke përdorur reaksione imunologjike (RIF, ELISA, RPGA, RSK, RN, VIEF, etj.); b) ekzaminimi patohistologjik i organeve dhe indeve; c) CPP; d) simptomat klinike, analizat biologjike (keratokonjuktivale etj.).

Metodat e zbulimit të viruseve

Kur kulturat qelizore infektohen me viruse, mund të merren manifestime të ndryshme të dukshme të veprimit të virusit:

1. Efekti citopatik i virusit në kulturën e qelizave (CPE)– shfaqja e ndryshimeve të dukshme degjenerative morfologjike në të;

2. Përvetësimi i aftësisë së një kulture qelizore të infektuar për të hemadsorbimi– deri te adsorbimi i eritrociteve në sipërfaqen e shtresës qelizore;

3. Formimi në një kulturë qelizore të infektuar nën një shtresë të dendur të një shtrese të veçantë agar me karakteristikë pllakat, të cilat janë “koloni negative” të viruseve;

4. Përfshirjet brendaqelizore

Klasifikimi i mediave kulturore:

Natyrore– përbëhet nga produkte me origjinë shtazore ose bimore dhe kanë një përbërje kimike të pasigurt. Për shembull: lëngjet e perimeve dhe frutave, indet e kafshëve, gjaku, qumështi, vezët etj. (IPA, MPB).

Gjysmë sintetike– përbërja përfshin komponime me natyrë kimike të njohur dhe substanca me përbërje të panjohur. Për shembull: MPB me glukozë, medium Endo, medium Sabouraud.

Sintetike– përmbajnë vetëm komponime kimikisht të pastra në përqendrime të sakta. Përdoret në eksperimente laboratorike. Për shembull: mjedisi i Chapek, Omelyansky, Ushinsky, etj.

Qëllimi i medias kulturore

Universale(qëllim i përgjithshëm) - i përshtatshëm për rritjen e shumë llojeve të mikroorganizmave dhe përdoret si bazë për media të veçanta ushqyese. Shembuj: MPB, MPA, medium Hottinger, GRM, medium tioglikolat.

E veçanta përdoret në rastet kur mikroorganizmat nuk rriten në mjedise të thjeshta. Këto përfshijnë gjakun, agarin e serumit, lëngun e hirrës, lëngun e ascitit, agarin e ascitit dhe të tjerët.

1. Mjedise me zgjedhje- disa mikroorganizma rriten më shpejt dhe më intensivisht në to sesa llojet e tjera të baktereve. Për shembull, uji me pepton alkaline 1% është një mjedis zgjedhor për vibrios kolera, mediumi Roux dhe Leffler për patogjenët e difterisë.

2. Selektive - falë aditivëve selektivë (bila, bojëra, antibiotikë etj.) janë në gjendje të shtypin zhvillimin e disa llojeve të mikroorganizmave, por nuk prekin llojet e tjera. Shembuj: Mediumi i Müller-it është selektiv për bakteret tifo-paratifoide, agari furazolidone-tween është selektiv për korinebakteret dhe mikrokoket. Shtimi i antibiotikëve në media i bën ata selektivë për kërpudhat (p.sh. mediumi i Sabouraud, etj.).

3. Diagnostikimi diferencial- një grup mediash që bëjnë të mundur përcaktimin e vetive biokimike të mikroorganizmave dhe diferencimin e tyre. Ato ndahen në media për përcaktimin e vetive proteolitike, peptolitike, sakarolitike, hemolitike, lipolitike dhe reduktuese (Endo, Levin, Ploskirev, Gissa media).

4. Konservues (transport) -

projektuar për të ruajtur qëndrueshmërinë e mikroorganizmave që nga momenti i grumbullimit

biomaterial para kulturës për diagnostikim

E lëngshme(suplat) - studimi i karakteristikave fiziologjike dhe biokimike dhe akumulimi i biomasës së mikroorganizmave

Gjysmë e lëngshme(1% agar) – ruajtja e kulturave dhe kultivimi i anaerobeve

I dendur(3-5% agar) – izolimi i kulturave të pastra, grumbullimi, regjistrimi sasior, studimi i vetive kulturore, marrëdhëniet antagoniste.

Pjesa më e madhe– ruajtja e farës në industri (mel, krunde)

Të thatë– prodhuar nga industria për përgatitjen e mediave ushqyese

Sistemi i transportit me ambient Stuart

Mediumi i Stewart është një substrat gjysmë i ngurtë, i varfër me lëndë ushqyese për ruajtjen dhe transportin e një game të gjerë mikroorganizmash patogjenë, si p.sh. Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphteriae, Trichomonas vaginalis, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. etj. Mikroorganizmat më të kërkuar mbijetojnë në këtë mjedis për më shumë se një ditë, të tjerët - deri në disa ditë.

Prania e tioglikolatit në medium shtyp aktivitetin enzimatik të baktereve dhe mungesa e azotit pengon riprodhimin e tyre.

Sistemi i transportit me mjedis Keri Blair

Mjeti transportues i Keri Blair është një modifikim i mjetit bazë transportues të Stewart, i krijuar posaçërisht për ekzemplarë fekale.

Glicerofosfati, i cili është një metabolit i disa enterobaktereve ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, etj.), i zëvendësuar nga fosfati inorganik,

Blu metilen u hoq dhe pH e mediumit u rrit në 8.4.

Mediumi i Keri Blair lejon ruajtjen e shumicës së patogjenëve, duke përfshirë mikroorganizmat e vështirë si p.sh. Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp..

Ky medium është standard për transportin e anaerobeve.

Sistem transporti me ambient Ames

Mjeti transportues Ames është një modifikim tjetër i mediumit bazë të transportit Stewart, në të cilin glicerofosfati zëvendësohet nga fosfati inorganik, pasi glicerofosfati është një metabolit i disa enterobaktereve ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, etj.) dhe mund të mbështesë rritjen e disa mikroorganizmave gram-negativë.

Blu metilen është zëvendësuar me karbon aktiv të klasës farmaceutike.

Kalciumi dhe magnezi u shtuan në mjedis për të ruajtur përshkueshmërinë e qelizave bakteriale.

Ky mjedis është i aftë të mbështesë mikroorganizma si p.sh Neisseria sp., Haemophilus sp., Corynebacteria, Streptococci, Enterobacteriaceae etj., megjithatë, rezultatet më të mira merren nga kultivimi brenda 24 orëve të para.

Mjete pasurimi universale: Agar me pepton mishi (MPA) dhe lëng mishi me pepton (MPB)

Ato janë mjetet kryesore për inokulimin e mikroorganizmave për të kontrolluar pastërtinë e kulturave para biokimike dhe serotipizimit.

Ato përdoren për kultivimin dhe numërimin e mikroorganizmave jo modest. Në formë gjysmë të lëngshme, mediumi mund të përdoret për ruajtjen e mikroorganizmave të kontrollit (referencës).

Mjediset universale të ruajtjes Mjedisi Hottinger

Projektuar për kultivimin e mikroorganizmave të ndryshëm, si enterobakteret, Pseudomonas aeruginosa, stafilokokët dhe disa lloje streptokokesh. Nëse është e nevojshme, mund të pasurohet me karbohidrate dhe kripëra.

Përmban hidrolizat Hottinger, i cili përftohet nga hidroliza enzimatike e mishit të grirë (viçi) me pankreatinë, e ndjekur nga filtrimi dhe shtimi i kloroformit si konservues.

Mjediset universale të ruajtjes:Mjedisi Mueller-Hinton

Ky medium përdoret për kultivim Neisseria sp. dhe për të përcaktuar ndjeshmërinë e mikroorganizmave ndaj agjentëve antimikrobikë.

E mërkurë McConkey

Mediat MacConkey rekomandohen si media diferenciale për izolimin selektiv të enterobaktereve dhe bacileve gram-negative përkatëse.

Llojet pozitive të laktozës rriten me koloni rozë ose të kuqe që mund të rrethohen nga një zonë e reshjeve të kripës biliare.

Ngjyra e kuqe shfaqet si rezultat i acidifikimit të mediumit nga produktet e dekompozimit të laktozës (kur pH bie nën 6.8) dhe adsorbimit të së kuqes neutrale.

Llojet që nuk fermentojnë laktozën (Shigella, Salmonella) zakonisht formojnë koloni transparente, pa ngjyrë dhe nuk ndryshojnë mjedisin.

Mjediset diagnostike diferenciale:Endo medium

Ky medium u zhvillua nga Endo si një mjedis kulture për diferencimin e mikroorganizmave fermentues dhe jofermentues të laktozës. Përdoret për ekzaminim mikrobiologjik të ujit, ujërave të zeza, qumështit dhe produkteve të tjera ushqimore.

Sulfiti i natriumit dhe fuksina bazë kanë një efekt frenues në mikroorganizmat gram-pozitiv. Laktoza zbërthehet nga mikroorganizmat në aldehid dhe acid. Aldehidi, nga ana tjetër, çliron fuchsin nga kompleksi fuchsin-sulfit, duke rritur ngjyrën e kuqe të kolonive. Në E. coli, ky reaksion është shumë i theksuar dhe shoqërohet me kristalizimin e fuksinës, i cili manifestohet me një shkëlqim metalik të gjelbër (shkëlqim muchsin) të kolonive.

Mjediset diagnostike diferenciale:Agar me kripë të verdhë veze

Ky medium përdoret si një mjedis selektiv për izolimin e kulturave stafilokoke klinikisht të rëndësishme.

Manitoli është një substrat i fermentueshëm dhe diferencues, si dhe një burim karboni.

Shtimi (deri në 5% v/v) i emulsionit të të verdhës së vezës bën të mundur përcaktimin e aktivitetit të lipazës së mikroorganizmave. Emulsioni në një mjedis të kripur bëhet transparent, prandaj, në prani të aktivitetit të lipazës, rreth kolonive formohet një zonë e errët e verdhë.

Mjediset diagnostike diferenciale:Wilson-Blair ose Bismut Sulfit Agar

Mjet selektiv për izolimin e Salmonellës.

Tretja peptike e indeve shtazore dhe ekstrakti i mishit shërbejnë si burim i lëndëve ushqyese azotike, karbonit, squfurit, vitaminave B dhe elementëve gjurmë të nevojshëm për rritjen e këtyre baktereve.

E gjelbërta e shkëlqyeshme pengon rritjen e të gjitha baktereve gram-pozitive. Glukoza është një karbohidrat i fermentueshëm. Sulfati i hekurit mund të zbulojë prodhimin e sulfurit të hidrogjenit.

Bismuti është një metal i rëndë që pengon rritjen e shumicës së baktereve gram-negative të zorrëve, përveç Salmonellës.

Salmonella redukton sulfatin e hekurit në prani të glukozës dhe sulfitit të bismutit në sulfid hekuri, i cili i bën kolonitë e tyre të zeza.

Mjedise të veçanta me zgjedhje:Mjedisi i Loeffler

Ky medium me shtimin e serumit të kalit përdoret për kultivim Corynebacterium diphtheriae nga materiali klinik dhe nënkulturat e kulturave të pastra të këtyre mikroorganizmave.

Një përqendrim i lartë në serum ndihmon në përcaktimin e aktivitetit proteolitik të mikroorganizmave, si dhe formimin e pigmentit. Peptoni dhe ekstrakti i mishit u ofrojnë mikroorganizmave lëndë ushqyese thelbësore. Glukoza është një substrat i fermentueshëm dhe burim energjie.

Media selektive speciale:Kampilobakagar

Medium selektiv për Campylobacter i cili përbëhej nga baza e agarit të gjakut me gjak deleje ose gjak kali dhe antibiotikë.

Komponentët antimikrobikë pengojnë ndjeshëm rritjen e mikroflorës normale, duke nxitur rritjen dhe ekskretimin nga feces Campylobacter fetus ssp. jejuni.

Prania e amfotericinës B në suplement në mënyrë të konsiderueshme ose plotësisht shtyp rritjen e kërpudhave; cefalotina e futur më vonë rrit shtypjen e mikroflorës normale të zorrëve.

Kolonitë Campylobacter fetus ssp. jejuni kanë karakter mukoz, gri të sheshtë me konturë të çrregullt ose të ngritur, të rrumbullakët, pa hemolizë.

Disa shtame mund të prodhojnë koloni të verdhë-kafe ose rozë.

Rritja e bashkuar ose grumbullimi mund të ndodhë në një sipërfaqe të lagësht të mediumit.

Mediat zgjedhore u futën në praktikën mikrobiologjike nga S.N. Vinogradsky dhe M. Beyerinck. Këto janë mjedise ushqyese në të cilat, duke shtuar një ose më shumë komponime kimike, krijohen kushte optimale për rritjen dhe riprodhimin e një lloji mikroorganizmi (ose grup mikroorganizmash të lidhur) dhe kushte të pafavorshme për të gjithë të tjerët. Media të tilla përdoren kryesisht për izolimin e një kulture të pastër të mikroorganizmave nga habitatet e tyre natyrore dhe për grumbullimin e një mase kulturash (metodë kimike për izolimin e një kulture të pastër). Për shembull, një lëndë ushqyese, e cila është serumi i koaguluar i kalit, është një mjedis selektiv për bakteret e difterisë, uji me pepton alkalin për kolerën Vibrio, lëngu biliar për shkaktarin e etheve tifoide, lëngu i mëlçisë për Brucellën, etj.

Akumulimi i mikrobeve në mjedise ushqyese selektive në shumë raste shërben si një hap i rëndësishëm paraprak në izolimin e kulturave të pastra nga materialet origjinale të testimit (për shembull, Vibrio cholerae ose bakteret tifoide nga feçet e pacientëve ose transportuesve, etj.).

Çfarë kuptoni me lëndë ushqyese diferenciale?

Mjetet diagnostike diferenciale janë ato që përmbajnë, përveç substancave që sigurojnë rritjen dhe zhvillimin e mikroorganizmave, substanca që përdoren si substrat për enzimat e caktuara. Bazuar në ndryshimin cilësor në substrat, përcaktohet prania e një enzime të veçantë (vlerësohet duke përdorur një tregues që reagon ndaj pranisë së produkteve të dekompozimit të substratit në mjedisin ushqyes).

Çdo lloj mikroorganizmi karakterizohet nga një grup mjaft i qëndrueshëm enzimash. Përcaktimi i një grupi enzimash duke përdorur mjete diagnostikuese diferenciale bën të mundur diferencimin e llojeve të mikroorganizmave. Për shembull, agari i gjakut ju lejon të zbuloni enzimën hemolizina, media e tij - enzimat sakarolitike (karbohidrazat), xhelatina përdoret për të marrë parasysh vetitë proteolitike të mikrobeve, etj.

Agar gjaku. Prania e enzimës së hemolizinës gjykohet nga shkatërrimi i qelizave të kuqe të gjakut dhe formimi i një zone të lehtë rreth mikrobeve të rritura në agar të gjakut.

Mediat e tij. Prania e enzimave - karbohidrazave, të cilat zbërthejnë karbohidratet në acid, tregohet nga një ndryshim i pH-së së mediumit drejt anës acide dhe një ndryshim në ngjyrën e mediumit ushqyes. Dallimi në grupin e enzimave mund të përdoret për të kontrolluar pastërtinë e kulturës së izoluar, si dhe për të diferencuar shpejt një specie nga të tjerët gjatë studimit fillestar të inokulimeve të materialit infektiv.

Reagentët kimikë

1. Çfarë janë reagentët kimikë dhe për çfarë përdoren?

Reagentët kimikë- substanca të përdorura në praktikën laboratorike për të kryer reaksione të ndryshme kimike.

Në shumicën e rasteve, reagentët kimikë janë substanca individuale, por mjaft shpesh ato kanë një përbërje komplekse. Nuk ka një klasifikim të pranuar përgjithësisht të reagentëve kimikë; më shpesh ato ndahen në reagentë kimikë analitikë dhe gjithçka tjetër.

2. Në mjekësinë veterinare, për çfarë qëllimesh përdoren?

Në mjekësinë veterinare, reagentët kimikë përdoren për qëllime analitike dhe diagnostikuese në studime klinike, veterinare-sanitare, higjienike, eksperte, biokimike dhe të tjera laboratorike. Metodat e kërkimit të përdorura dhe të zhvilluara në praktikën biologjike dhe klinike kërkojnë një gamë të gjerë reagentësh kimikë që duhet të plotësojnë një shumëllojshmëri të gjerë kërkesash. Për shembull, studimet klinike dhe biokimike kërkojnë substrate të purifikuara shumë për enzimat, vetë enzimat, reagentë për grupe specifike (SH, NH3, grupe COOH, etj.), etj. Për kryerjen e sintezave inorganike dhe organike, si dhe për analizat cilësore dhe sasiore, përfshirë. gjatë kontrollit veterinar dhe sanitar në industri të ndryshme, analiza) të barnave, gjatë kryerjes së analizave veterinare, sanitare dhe higjienike të produkteve ushqimore, ajrit, ujit, etj., Përdoret një numër i madh i një shumëllojshmërie të gjerë të reagentëve kimikë shumë të pastruar.

1.Sipas përbërjes mediat ushqyese ndahen në të thjeshta dhe komplekse

Ekziston një grup mjedisesh për qëllime të përgjithshme - të thjeshta. Ky grup përfshin lëng mishi-pepton (sup me lëndë ushqyese të thjeshtë), agar mish-pepton (agar i thjeshtë ushqyes), xhelatinë ushqyese. Këto media përdoren për të rritur shumë mikrobe patogjene. Media për qëllime të përgjithshme, ose lëndë ushqyese të thjeshta, zakonisht përgatiten nga hidrolizat me shtimin e peptonit dhe klorurit të natriumit. Ato përdoren gjithashtu si bazë për përgatitjen e mediave komplekse.

Gjithashtu, sipas përbërjes së tyre dallojnë proteina, media pa proteina dhe minerale.

2. Nga origjina mjediset ndahen në artificiale dhe natyrore (natyrore).

Mjetet ushqyese natyrore mund të përmbajnë përbërës me origjinë shtazore (për shembull, gjak, serum, biliare) ose bimore (për shembull, copa perimesh dhe frutash).

3.Sipas qëllimit ndajnë media ruajtëse(për mbjelljen dhe transportin parësor), mjedis pasurues(për akumulimin e një grupi të caktuar bakteresh), media kulturore(universal i thjeshtë, kompleks special dhe për formimin e toksinave), media për izolim dhe grumbullim (konservues, pasurues dhe selektiv) dhe mjedis identifikimi(diferencial dhe zgjedhor-diferencial).

Mjetet e kulturës ruajtëse parandalojnë vdekjen e patogjenëve dhe shtypin rritjen e saprofiteve. Më të përdorurat janë një përzierje glicerine, një tretësirë ​​hipertonike, një ruajtës glicerinë me LiCl 2, një zgjidhje e citratit të natriumit dhe deoksikolatit të natriumit.

Mjete pasuruese për bakteret

Media pasuruese(për shembull, mediumi Kitta-Tarozzi, lëngu i selenitit, mediumi tioglikolat) përdoren për të grumbulluar një grup të caktuar bakteresh duke krijuar kushte që janë optimale për disa specie dhe të pafavorshme për të tjerët. Më shpesh, si agjentë të tillë përdoren ngjyra dhe kimikate të ndryshme - kripërat biliare, tetrationat Na+, K teluriti, antibiotikët, fuchsin, vjollca gentian, jeshile brilante, etj.

Gjithashtu me takim dallojnë mjediset diagnostike zgjedhore, speciale dhe diferenciale.

Mjediset zgjedhore (selektive, selektive, grumbullimi, pasurimi). Parimi i krijimit të mjediseve ushqyese selektive bazohet në plotësimin e nevojave bazë biokimike dhe energjetike të llojit të mikrobit për të cilin ato janë të destinuara për kultivim, ose në shtimin e frenuesve që frenojnë rritjen e mikroflorës shoqëruese. Një përbërje dhe përqendrim i caktuar i lëndëve ushqyese, mikroelementeve, faktorëve të rritjes në një vlerë pH të përcaktuar rreptësisht ose shtimi i frenuesve ofrojnë kushte optimale për kultivimin e një ose disa llojeve të mikroorganizmave. Kur mbi to mbillet material që përmban një përzierje mikrobesh të ndryshme, së pari do të shfaqet rritja e specieve për të cilat mjedisi do të jetë selektiv. Shembuj të mediave zgjedhore janë supa biliare, lëngu i selenitit, mediumi i Ploskirev - për rritjen e mikrobeve të familjes së zorrëve, uji alkaline peptone - për Vibrio cholerae.

Supë biliare. MPB-së i shtohet 10-20% biliare kau. Biliare shtyp rritjen e kokëve dhe florës ajrore, por është e favorshme për përhapjen e salmonelës.

Supë e selenitit. Ai përbëhet nga lëngu i fosfatit me shtimin e kripës së natriumit të selenitit, i cili është një frenues i rritjes së florës kokale dhe Escherichia coli, por nuk pengon rritjen e salmonelës.

E mërkurë Ploskireva. Një mjedis i dendur që përmban frenues të E. coli, coli, por i favorshëm për rritjen e Shigellës dhe Salmonellës, riprodhimi i të cilave nuk pengohet nga kripërat e gjelbërta dhe biliare.

Ujë me pepton. Përmban 1% pepton dhe 0,5% klorur natriumi. Mjedisi është selektiv për Vibrio cholerae, sepse ato shumohen më mirë se bakteret e tjera në "mjedise të uritur", veçanërisht me një reaksion alkalik, sepse ato vetë sekretojnë mbetje acidike.

Ambiente të veçanta. E nevojshme për kultivimin e baktereve që nuk rriten në mjedise të thjeshta ushqyese. Për disa organizma, është e nevojshme të shtohen karbohidratet, gjaku dhe lëndë ushqyese të tjera shtesë në media të thjeshta ushqyese. Shembuj të mediave të thjeshta ushqyese janë lëngu i sheqerit dhe agari i sheqerit për streptokokun (përgatitur nga MPB dhe MPA, respektivisht, të cilave u shtohet 0,5-2% glukozë).

Mjediset diagnostike diferenciale përdoret për të përcaktuar llojin e mikrobit në studim, bazuar në karakteristikat e metabolizmit të tij. Sipas qëllimit të tyre, mjediset diagnostike diferenciale ndahen si më poshtë:

1. Media për zbulim aftësia proteolitike mikrobet që përmbajnë qumësht, xhelatinë, gjak etj.

2. Media me karbohidrate dhe alkoole polihidrike për zbulimin e të ndryshmeve enzimat sakarolitike.

Treguesit e mëposhtëm i shtohen përbërjes së mediumeve diagnostikuese diferenciale të krijuara për të identifikuar vetitë sakarolitike dhe enzimat redoks: e kuqe neutrale, fuchsin acid, blu bromothymol, blu ujore me acid rosolik (BP). Duke ndryshuar ngjyrën e tij në vlera të ndryshme pH, treguesi tregon praninë e një enzime dhe zbërthimin e përbërësit të futur në medium.

Shembuj të mjediseve diagnostikuese diferenciale:

Endo medium. Përbëhet nga MPA me shtimin e laktozës 1% dhe fuksinës bazike (indikator) të çngjyrosur me sulfit natriumi. Endo medium ka një ngjyrë pak rozë. Përdoret në diagnostikimin e infeksioneve të zorrëve për të diferencuar bakteret që dekompozojnë laktozën për të formuar produkte acidike nga bakteret që nuk e kanë këtë aftësi. Kolonitë e mikrobeve laktozë pozitive (Escherichia coli) janë të kuqe për shkak të reduktimit të fuksinës. Kolonitë e mikroorganizmave laktozë-negativë - salmonela, shigella, etj. - janë të pangjyrë.

Mjediset diagnostike diferenciale përfshijnë të shkurtër dhe të zgjeruar rresht lara-lara. Ai përbëhet nga media me karbohidrate (Hiss media), MPB, qumësht dhe xhelatinë mish-pepton.

Mediat e tij përgatiten në bazë të ujit pepton, të cilit i shtohen mono-, di- ose polisaharide kimikisht të pastra (glukozë, laktozë, niseshte etj.).

Për të zbuluar ndryshimet e pH si rezultat i formimit të acideve dhe dekompozimit të karbohidrateve, një tregues shtohet në media. Me një ndarje më të thellë të karbohidrateve, formohen produkte të gazta (CO 2, CH 4, etj.), Të cilat kapen duke përdorur nota - epruveta të vogla të ulura me kokë poshtë në medium. Media me karbohidrate mund të përgatitet edhe si media e dendur me shtimin e 0,5-1% agar-agar. Pastaj formimi i gazit zbulohet nga formimi i flluskave (thyerjeve) në kolonën e mediumit.

Në MPB, e cila është pjesë e serisë së larmishme, gjenden produkte të formuara gjatë zbërthimit të aminoacideve dhe peptoneve (indol, sulfid hidrogjeni). Sulfide hidrogjenit zbulohet duke vendosur një rrip letre filtri të njomur në një tretësirë ​​të acetatit të plumbit në MPB pas mbjelljes së kulturës. Kur aminoacidet që përmbajnë squfur shpërbëhen, sulfuri i hidrogjenit lirohet dhe letra bëhet e zezë për shkak të formimit të sulfurit të plumbit. Për përcaktimin indol mund të përdorni një tregues kompleks. Indoli formohet nga shpërbërja e triptofanit dhe mund të zbulohet kur ky tregues shtohet në një kulturë të rritur në MPB. Në prani të indolit, MPB kthehet në jeshile ose blu.

Në laboratorët praktikë bakteriologjikë ato përdoren gjerësisht metoda mikro dhe ekspres për një studim tregues të vetive biokimike të mikroorganizmave. Ka shumë sisteme testimi për këtë qëllim. Sistemi më i përdorur i letrave tregues (NIB). SIB-të janë disqe letre filtri të ngopura me solucione sheqernash ose substrate të tjera në kombinim me tregues. Disqe të tillë ulen në një provëz me një kulturë të rritur në një mjedis të lëngshëm ushqyes. Ndryshimi i ngjyrës së diskut me substratin përdoret për të gjykuar funksionimin e enzimës. Sistemet e mikro-testimit për studimin e identifikimit të enterobaktereve përfaqësohen nga enë plastike të disponueshme me media që përmbajnë substrate të ndryshme me shtimin e treguesve. Mbjellja e një kulture të pastër të mikroorganizmave në sisteme të tilla testimi ju lejon të identifikoni shpejt aftësinë e baktereve për të përdorur citrate, glukozë, saharozë, çlirimin e amoniakut, indolit, dekompozimin e uresë, lizinës, fenilalaninës, etj.

MEDIA E VEÇANTA (ME ZGJEDHJE) TË USHQIMIT

Media për rritjen e majave

Medium sintetik lexues

Përbërja e mediumit përfshin, g/l: sulfat amonium 3, sulfat magnezi 0,7, nitrat kalciumi 0,04, klorur natriumi 0,5, dihidrogjen fosfat kaliumi 1,0, hidrogjen fosfat kaliumi 0,1. PH fillestar 6.6. Nitrat kalciumi, i cili nuk përdoret nga majaja, mund të hiqet nga mediumi. Për të studiuar riprodhimin e majave, shtoni 2% sheqer, për të studiuar fermentimin - 5-10%. Mjeti komplet sintetik përmban vitamina kristalore, mcg/ml: inositol 5, biotinë 0,0001, acid pantotenik 0,25, tiaminë 1,0, piridoksinë 0,25, acid nikotinik 0,5. Sterilizoni mediumin në një autoklavë me presion prej 0,1 M Pa për 20 minuta.

Medium glukozë-amoniumi

Përmban në 1 litër ujë rubineti substancat e mëposhtme, g: sulfat amonium 5, dihidrogjen fosfat kaliumi 0,85, hidrogjen fosfat kaliumi 0,15, sulfat magnezi 0,5, klorur natriumi 0,1, klorur kalciumi 120, klorur i pasur me glucium 120, glucid i pasur. shtohet maja (0,2%) ose ekstrakt i mishit (0,3%) dhe lëng rrushi.

Mjet sintetik për identifikimin e majave të papërsosura

Përmban në 1 litër ujë rubineti këto substanca, g/l: glukozë 50, lizinë 3, dihidrogjen fosfat kaliumi 1, sulfat magnezi 1, sulfat hekuri - gjurmë. Çdo komponent tretet në ujë veç e veç dhe shtohet sipas rendit të treguar. Në mjedis shtohet agar (1,5%), shkrihet, derdhet në epruveta dhe sterilizohet për 20 minuta me presion 0,05 MPa.

Medium i plotë me lizinë për zbulimin e majave të papërsosura

Përmban në 1 litër ujë rubineti këto substanca, g/l: glukozë 50, sulfat magnezi 1, dihidrogjen fosfat kaliumi 2, laktat kaliumi 12 ml (tretësirë ​​50%), /, (+) lizin monohidrat 1, tretësirë ​​vitaminë (për Shtoni 100 ml ujë të distiluar steril, g: inozitol 2, pantotenat kalciumi 0,4, nikotinamid 0,5, hidratiaminë 0,1, agar 20, pH e mjedisit - 5-5,2. Mjeti hidhet në epruveta 15 ml të provës dhe 1 ster. një presion prej 0.1 MPa.

Medium acetat për zbulimin e majave të papërsosura

Për 1 litër ujë rubineti, merren 10 g acetat natriumi, 10 g klorur amoniumi, 5 g glukozë, 3 ml autolisat majaje, hidhen në epruveta 5 ml dhe sterilizohen me presion 0,05 MPa për 30 minuta.

Mjet për identifikimin e majave të huaja morfologjikisht të ngjashëm me kulturën kryesore

10 g pepton, 2 g hidrogjenfosfat kaliumi treten në 500 ml ujë të distiluar dhe filtohen. 15 g agar shkrihen në filtrat, 10 g glukozë, 0,4 g eozinë dhe 0,065 ml metilen blu (tretësirë ​​alkooli 90%), rregullohen në 1000 ml me ujë të nxehtë të distiluar, derdhen në epruveta dhe sterilizohen për të. 15 minuta në presion prej 0. 1 MPa. Kur sterilizohet, ngjyra zhduket; kur ftohet, shfaqet përsëri. Mjeti ruhet jo më shumë se 2 muaj.

Medium për formimin e pseudomyceliumit

Agar i glukozës pepton. Në 1 litër ujë rubineti shtoni, g: pepton 10, glukozë 20, agar 30-35. Sterilizoni për 30 minuta në një presion prej 0,05 MPa. Nëse është e nevojshme, mund të shtoni maja ose ekstrakt mishi (0,5%) ose të gatuani në formë të lëngshme.

Agar patate. 100 g patate të qëruara, të lara, të prera hollë futen në një vend të freskët për disa orë me 300 ml ujë rubineti. Ekstrakti filtrohet, 230 ml ekstrakt sillen në 1 litër me ujë rubineti, shtohen 20 g glukozë dhe 30-35 g agar, shkrihen dhe sterilizohen për 1 orë me presion 0,075 MPa.

Uji i tharmit me karbohidrate ("seri me ngjyra")

Aftësia e majave për të shkaktuar fermentim të karbohidrateve përcaktohet duke përdorur ujin e tharmit me 2% të sheqerit të testuar (glukozë, maltozë, saharozë, laktozë, rafinozë, etj.). Mjeti derdhet në epruveta me notues, tuba Dunbar dhe sterilizohet me avull që rrjedh fraksionalisht. Rezultatet pas mbjelljes regjistrohen pas 2 ditësh, nëse është e nevojshme pas 7 ditësh të kultivimit në temperaturën 30 °C.

Aftësia e majave për të metabolizuar karbohidratet me oksidim studiohet në një mjedis me përbërjen e mëposhtme, r/l: sulfat amoni 5, dihidrogjen fosfat kaliumi 1, sulfat magnezi 0,5, autolitat 1, sheqeri testues 10, agar 20. Mjeti derdhet në epruveta, të sterilizuara për 30 minuta në presion 0,05 MPa, përgatitet pjerrësia e agarit. Rritja e kulturës vlerësohet pas 3-4 ditësh.

Agar maja me sheqer

0.5% klorur natriumi, 1% glukozë (ose 4 ose 10% saharozë) dhe 2% agar treten në ujë maja, pH 6.8 (me glukozë) dhe 6-6.5 (me saharozë). Mjeti derdhet në provëza ose balona dhe sterilizohet me presion 0,05 MPa për 30 minuta.

Media antibiotike

Për zhvillimin preferencial të majave dhe shtypjen e baktereve shoqëruese, antibiotikët me spektër të gjerë futen në media: streptomicina (100 njësi/ml), penicilina (20-100 njësi/ml), levomicina (50 mg/l), neomicina ( 20 njësi/ml) etj. Ato mund të shtohen në mjedis ose së bashku ose veçmas.

Media për formimin e askosporeve

Të mërkurën Gorodkova. Përmban në 1 litër ujë rubineti, g: pepton 10, klorur natriumi 5, glukozë 1 (ose 2,5), agar 20; PH i mjedisit është 7.3. Hidheni në provëza dhe sterilizoni për 15 minuta me presion 0,1 MPa.

Agar acetat McClary. Në 1 litër ujë të distiluar shtoni g: acetat natriumi 8,2, klorur kaliumi 1,8, glukozë 1, ekstrakt maja 2,5, agar 15. Vendoseni në autoklavë për 15 minuta me presion 0,1 MPa.

E mërkurë Starkey. Në 1 litër ujë rubineti shpërndahet g: hidrogjen fosfat kaliumi 1, dihidrogjen fosfat kaliumi 0,25, sulfat magnezi 0,25, klorur kalciumi 0,05, agar 20. Sterilizohet me presion prej 0,05 MPa.

Mjet osmofil i rritjes së majave

Në 1 litër shurup glukoze (50-60% DM) shtoni 5 g pepton dhe 20 g agar. Peptoni mund të zëvendësohet me ujë maja (50 ml). Sterilizoni në një presion prej 0.05 MPa.

Kantarion melasa

200-300 g melasë të trashë përzihen me ujë në raport 1:3, nxehen në temperaturën 95°C dhe lihen të qëndrojnë për 2 orë.Në të njëjtën kohë, koloidet e mpiksura vendosen dhe tretësira e melasës pastrohet. . Në tretësirë ​​shtohet 3% fosfat diamoni, hollohet me ujë deri në 5-8% DM dhe derdhet në provëza ose balona. Për të përgatitur një mjedis agar, shtoni 1,5-2% agar. Sterilizoni në një presion prej 0,05 MPa për 30 minuta në autoklave ose në mënyrë të pjesshme për 1 orë me një interval prej 20-24 orë 3 herë.

Media për rritjen e kërpudhave filamentoze

Agar panxhar

Panxhari i sheqerit i larë mirë pritet në feta, mbushet me ujë rubineti (20 g panxhar për 1 litër ujë) dhe zihet për 30 minuta. Filtrati sillet në vëllimin origjinal me ujë, shtohet agar 2% dhe sterilizohet me presion 0,1 MPa për 30 minuta.

Pulpa e panxharit

Panxhari i pastër grihet në rende, vendoset në enë Petri dhe pa e kthyer nga ana tjetër sterilizohet me presion 0,1 MPa për 30 minuta.

E mërkurë Capek

Përbërja e mediumit, g/l: saharozë ose glukozë 30, dihidrogjen fosfat kaliumi 1,0, nitrat natriumi 2,0, sulfat magnezi 0,5, klorur kaliumi 0,05, sulfat hekuri 0,1, përbërës të shtuar më parë, agar dhe 20. treten në 1 litër ujë të distiluar, nxehen me avull që rrjedh dhe pH rregullohet në 4,0-5,5 me një tretësirë ​​10% të acidit citrik ose hidroksidit të natriumit. Filtrojeni, hidheni në provëza dhe sterilizoni me avull të rrjedhshëm 3 herë për 30 minuta me një interval prej 1 dite.

Agar nitrat sheqeri Czapek-Dox

Opsioni 1. Për 1 litër ujë të distiluar merrni g: saharozë 20, hidrogjen fosfat kaliumi 0,5, sulfat magnezi 0,5, klorur natriumi 0,5, nitrat kaliumi 1, gjurmë sulfate hekuri, karbonat kalciumi 2-5, agar 20.

Opsioni 2. Për 1 litër ujë të distiluar merrni g/l: saharozë 30, nitrat amoni 2,5, dihidrogjen fosfat kaliumi 1, sulfat magnezi 1, sulfat hekuri 0,01, agar 20.

Medium glukozë-niseshte

Të njëjtët përbërës të kripës si në agarin e nitrat saharozës Czapek, por në vend të saharozës, merren 25 g niseshte të tretshme dhe 5 g glukozë.

Agar amoniumi niseshte

Përbërja e mjedisit, g/l: niseshte e tretshme 10, karbonat kalciumi 3, hidrogjen fosfat kaliumi 1, sulfat magnezi 1, klorur natriumi 1, sulfat amonium 1, agar 20. Sterilizohet për 30 minuta në presion 0.0 MPa.

E mërkurë Saburo

Në 100 ml ujë maja steril shtoni, g: pepton 5, glukozë 4, agar 1,8-2. Sterilizoni për 20 minuta në një presion prej 0,05 MPa ose në mënyrë të pjesshme.

Baza e këtij mediumi është uji i tharmit. Për të përgatitur ujin e tharmit, 70-100 g maja të freskët të shtypur (7-10 g maja të thatë) zihen për 20-30 minuta në 1 litër ujë të distiluar dhe lihen në një cilindër të lartë në të ftohtë për 12 orë. lëngu derdhet, shtohet edhe 1. l ujë, zihet për 30 minuta, filtrohet, rregullohet pH në vlerën e kërkuar. Mjeti i përgatitur sterilizohet me ngritje prej 2-3 minutash prej 20 minutash me një interval prej 1 dite. Në 100 ml ujë maja steril shtoni 1% pepton, 2% agar, pasi të keni tretur agarin, shtoni 4% glukozë ose maltozë, filtroni, derdhni në epruveta dhe sterilizoni me presion 0,05 MPa për 20 minuta.

Mjeti mund të përgatitet gjithashtu duke përdorur ujë të rregullt pepton 1%.

Media për rritjen e baktereve të acidit laktik

Qumësht i hidrolizuar (sipas Bogdanov)

Qumështi i rregullt ose i skremuar (pH 7,6-7,8) zihet për 5 minuta, ena tundet plotësisht dhe ftohet në një temperaturë prej 45 ° C dhe shtohet 0,5-1 g pankreatinë për 1 litër, pas 4-7 minutash shtoni 5. ml kloroform. Vendoseni në një termostat për 18-20 orë në një temperaturë prej 40 °C. Pluhuri i pankreatinës duhet të hollohet paraprakisht në një sasi të vogël uji të ngrohtë. Gjatë orëve të para qumështi përzihet disa herë me tapë të hapur. Qumështi i hidrolizuar filtrohet përmes një filtri letre, hollohet 2-3 herë me ujë, pH vendoset në 7,0-7,2 dhe sterilizohet për 15 minuta me presion 0,1 MPa ose për 20 minuta me presion 0,05 MPa.

Agar qumështi i hidrolizuar

Qumështit të hidrolizuar i shtohet 1,5-2,0% agar. Përzierja nxehet deri në valë dhe mbahet derisa agari të tretet plotësisht. Mjeti i nxehtë filtrohet përmes një filtri pambuku, derdhet në provëza ose balona dhe sterilizohet me presion 0,1 MPa për 10-15 minuta.

Qumësht i skremuar me tregues

Qumështi i freskët i skremuar, i ngrohur deri në valë, ngjyroset ndërsa është i nxehtë me tretësirë ​​lakmusi në një ngjyrë të fortë jargavani. Sterilizoni me avull të rrjedhshëm (3 herë për 30 minuta me një interval prej 1 dite) ose duke e autoklavuar për 10 minuta me presion 0,1 MPa.

Kantaku i maltit me kokërr të shpenzuar

Përgatitet maltoja, por pa e ndarë kokrrën e shpenzuar (12-15% DM). Hidheni në epruveta, shtoni shkumës steril (2-4%) dhe sterilizoni me presion 0,05 MPa për 30 minuta.

Agar saharozë maja

Për të identifikuar Lactobacillus Dhe Leuconostoc përdorni një mjedis të përgatitur në bazë të ujit të tharmit me shtimin e 0,5% klorur natriumi, 10% saharozë dhe 2% agar; pH i mjedisit është 6-6,5.

Medium mbirjes

25 g lakër malti (elbi) zihen për 10 minuta me 500 ml ujë dhe, pasi ftohet në temperaturën 45-50 ° C, filtrohet në një qese prej liri, pastrohet me proteinë pule të rrahur, zihet përsëri dhe filtrohet në filtër letre për të hequr proteinat e koaguluara. 1.5% pepton, 2% sheqer, 2% agar shtohen në tretësirë ​​dhe sterilizohen për 30 minuta në një presion prej 0.05 MPa.

Lakra e mërkurë

200 g lakër të bardhë të copëtuar hidhen në 1 litër ujë, zihen për 10 minuta, shtrydhen në dy shtresa garzë. Lëngu që rezulton filtrohet përmes një filtri të palosur, hollohet 2 herë dhe zierjes i shtohet 2% glukozë dhe 1% pepton, hidhet në epruveta dhe sterilizohet me presion 0,05 MPa për 15 minuta. Për të marrë një mjedis të fortë, shtoni 2% agar.

MRS medium (de Man's medium)

Përbërja e mediumit përfshin, g/l: sulfat mangani 0,05, sulfat magnezi 0,2, hidrogjen fosfat kaliumi 2, nitrat amoni 2, acetat natriumi 5, pepton 10, ekstrakt maja Difko 5, ekstrakt mishi 10, glukozë-2 1 ml, pH mesatar 6-6,5. Mjeti filtrohet dhe sterilizohet në hapa të pjesshëm prej 30 minutash 3 herë me një interval prej 1 ditësh ose në autoklave me presion 0,05 MPa për 20 minuta. Përdoret në formë të lëngshme, gjysmë të lëngshme dhe agar për lindje Leuconostoc Dhe Lactobacillus.

Media MRS (modifikuar nga A.A. Lanzier)

MRS-1 mjedis. Treteni në 200 ml ujë të distiluar, g: sulfat mangani 0,05, sulfat magnezi 0,2, cisteinë 0,2, hidrogjen fosfat kaliumi 2, citrat amoniumi 2, acetat natriumi 5, glukozë 20, glukozë 20, 10 ml peptone 10 më vete në një sasi të vogël uji të distiluar të nxehtë), autoliza maja (shih Shtojcën 2) 50 ml, ekstrakt i mëlçisë 100 ml. Vëllimi i lëngut rregullohet në 500 ml me ujë të distiluar dhe shtohet 500 ml qumësht i skremuar i hidrolizuar i Bogdanov, i pasterilizuar më parë, pH 6,2-6,8. Mjeti filtrohet dhe sterilizohet me avull që rrjedh në mënyrë të pjesshme.

MRS-2 mjedis. Projektuar për ruajtjen në muze të shtameve Lactobacillus. Përgatitet në bazë të mjedisit MRS-1 me shtimin e 0,15% agar. Rezultati është një medium gjysmë i lëngshëm, duke krijuar më shumë kushte anaerobe në krahasim me një të lëngët.

MRS-3 mjedis. Projektuar për "seri të larmishme" kur identifikohen bakteret e acidit laktik. Bazohet në mediumin MPC-1, por pa glukozë, ekstrakt të mëlçisë dhe qumësht të hidrolizuar. Karbohidratet dhe alkoolet polihidrike shtohen në një sasi prej 0,5%. Sasia e agarit të shtuar është 0.15%. pH i mjedisit është 7.0. Treguesi është i kuq i klorofenolit (0.004%). Treguesi shpërndahet në 1-2 ml alkool etilik dhe shtohet në medium para sterilizimit. Klorofenoli i kuq jep një kalim ngjyre nga e kuqe-vjollcë në të verdhë brenda intervalit të pH prej 4.8-6.4.

Ekstrakti i mëlçisë

Mëlçia e viçit të freskët pritet imët dhe mbushet me ujë (1 kg mëlçi: 1 litër ujë). Zieni për 30 minuta dhe filtroni, më pas sterilizoni me presion 0,05 MPa për 20 minuta.

e mërkurë 10

Për 1 litër lyth të birrës të paprerë (8% DM) ose 1 litër ujë majaje, shtoni g: sulfat mangan 0,05, sulfat magnezi 0,2, cistinë ose cisteinë 0,2, hidrogjen fosfat kaliumi 2, citrat amoni 0,2 acetat sodium 0,2, saharozë 20, pepton 10, maja autolizate 50 ml. Çdo përbërës shpërndahet në rendin e treguar në malt (për Lactobacillus) ose ujë maja (për Leuconostoc). Në rastin e parë, pH e mjedisit është 5.5, në të dytën - 6.0. Shtoni 1,5% agar dhe sterilizoni me avull të rrjedhshëm. Në pjatat Petri mund të shtohet shkumës steril.

Në 150 ml lëng domate të filtruar, shpërndani 0,75 ml Tween-80 dhe 37,5 g glukozë gjatë ngrohjes, shtoni 5 ml autolisat maja, 600 ml qumësht të skremuar (qumësht i skremuar) dhe 150 ml agar mish-peptone 2% të shkrirë. . PH është vendosur në 7.0. Mjeti derdhet në epruveta 6-7 ml, sterilizohet me presion 0,05 MPa për 20 minuta, ftohet, inokulohet me bakteret e studiuara të acidit laktik dhe sipër shtrohet 1-2 ml agar mish-pepton i shkrirë 2%. . Në rastin e formimit të dobët të gazit, priza ndahet nga mediumi kryesor; në rast të formimit të fortë të gazit, ai ngrihet lart ose fluturon jashtë epruvetës.

Media për rritjen e baktereve që formojnë mukus

Opsioni 1. Agar mishi me 10% saharozë.

Opsioni 2. Përbërja, g/l: sheqer i papërpunuar 40, hidrogjen fosfat natriumi 2, klorur natriumi 0,5, sulfat magnezi 0,1, sulfat hekuri 0,01, karbonat kalciumi 10, agar 20.

E mërkurë Wittenbury

Përbërja e mediumit përfshin, g/l: ekstrakt mishi 5, pepton 5, autolizë majaje 50 (ose ekstrakt maja 50), tretësirë ​​1,6% bromokresol vjollcë 1,4 ml, pH 6,8-7,0. Sterilizoni me avull të rrjedhshëm 3 herë për 45 minuta me një interval prej 1 dite.

Media për rritjen e baktereve asporogjene putrefaktive

Agar qumështi

Qumështi i skremuar derdhet në epruveta 5 ml dhe sterilizohet me avull të rrjedhshëm ose në autoklavë për 20 minuta me presion 0,05 MPa. Përgatitni veçmas agar me ujë 3%, hidhni 4-5 ml në epruveta dhe sterilizoni për 30 minuta me presion 0,1 MPa. Agari shkrihet, bashkohet në mënyrë sterile me qumësht dhe hidhet në enët Petri, ku më parë është shtuar kampioni i testimit.

Media për rritjen e baktereve që tretin yndyrat

Opsioni I. Në 1 litër ujë shtoni 5 g pepton dhe 3 ml autoliz maja. Pasi të keni vendosur një pH prej 7,2-7,4, shtoni 1,5% agar. Agari shkrihet, mediumi filtrohet dhe shtohet 1% yndyrë qumështi e nxehtë ose vaj ulliri. Përzieni, hidheni në provëza dhe sterilizoni me presion 0,1 MPa për 15 minuta.

Opsioni 2. 2-4% yndyrë qumështi ose vaj ulliri i shtohet pepton agarit të mishit. Hidhni 10 ml në provëza dhe sterilizoni me presion 0,1 MPa për 20 minuta. Shkundni mediumin tërësisht përpara se ta shtoni në gota.

Një shembull i një mediumi të tillë është xhelatina me qumësht të hidrolizuar. Xhelatinë 10% i shtohet qumështit të hidrolizuar (mund të përdorni kazeinë të hidrolizuar ose lëng mishi me ekstrakt), lëreni të fryhet dhe nxehet me përzierje në një temperaturë prej 50 °C. pH i mjedisit është 7,0-7,2. Mjeti filtrohet dhe sterilizohet në epruveta në presion prej 0,075 MPa për 20 minuta.

Media për rritjen e baktereve të acidit acetik

Shtoni 4 vëllime në malt ose medium lakër. % alkool etilik dhe 20 njësi/ml të antibiotikut monomicinë, i cili pengon rritjen e baktereve të acidit laktik.

Media për rritjen e anaerobeve

Winogradsky të mërkurën. Në 1 litër ujë të distiluar shpërndahen g: hidrogjen fosfat kaliumi 1, sulfat magnezi 0,5, sulfat mangan 20, glukozë 20, klorur natriumi dhe klorur ferrik - gjurmë.

E mërkurë Kita-Tarozzi. Copat e mëlçisë ose të mishit, të ziera dhe të lara me ujë, ulen në një provëz në mënyrë që të mbulojnë pjesën e poshtme. Hidhni lëng mishi-pepton me 1% glukozë (pH 7.2-7.4) në "/ 2 vëllime të epruvetës dhe ulni notën. Hidhni sipër një shtresë vaj vazelinë 1 cm të lartë. Sterilizoni për 15 minuta me presion 0.1. MPa 2 herë në intervale 30 min.

Mjet për rritjen e anaerobeve termofile që prodhojnë sulfid hidrogjeni

Përbërja e mediumit përfshin, g/l: pepton 10, sulfat hekuri 1, agar 20. Përpara mbushjes vendoset një gozhdë e pastër hekuri në çdo epruvetë. Pas mbjelljes së sheqerit, në epruvetë hidhet një shtresë vazelinë sterile. Nëse sheqeri përmban baktere që prodhojnë sulfid hidrogjeni, në agar formohen koloni karakteristike të zeza.