Shakar bulyoni va shakar agar oddiy bulon yoki erigan oddiy agarga u yoki bu uglevodni 0,5 dan 1% gacha qo'shib tayyorlanadi. Uglevod oz miqdorda suvda eritiladi va keyin ozuqaviy muhitga qo'shiladi. Shakar bulyoni va agarni sterilizatsiya qilish Koch apparatida ketma-ket 3 kun davomida har biri 1 soatdan amalga oshiriladi.
Qon, sarum yoki astsit suyuqligi agar qattiq aseptika ostida tayyorlanadi. Tayyor bir oz ishqoriy agarga 20-25% steril zardob yoki astsit suyuqlik yoki 5-25% steril defibrinlangan qon qo'shiladi, eritiladi va yana 45° ga sovutiladi, probirka yoki flakonlarga quyiladi. Yaxshilab aralashtirilgandan so'ng (pufakchalar va ko'pik paydo bo'lishining oldini olish) probirkalardagi agar kesiladi va flakonlarning tarkibi Heidenreich idishlariga quyiladi. Sarum, assitik suyuqlik yoki qon bilan bulon agar bilan bir xil tarzda tayyorlangan, lekin isitishsiz. Sterillikni nazorat qilish uchun bulon 37 ° da 48 soat davomida termostatga joylashtiriladi.

Differentsial diagnostik ozuqaviy muhit. Tarkibi va maqsadi.

Endo muhit. Ishlatishdan oldin darhol tayyorlanadi. 100 ml go'sht-peptonli agar yoki Hottinger bulyoni agariga (pH 7,6) steril ravishda 5 ml steril suvda eritilgan 1 g kimyoviy toza laktoza qo'shing, 70 ° ga sovuting va 0,5 ml to'yingan asosiy eritma aralashmasini qo'shing. fuchsin va 1,25 ml yangi tayyorlangan 10% natriy sulfid eritmasi chayqatiladi va stakanlarga quyiladi. Quritish uchun ochiq stakanlar 30 daqiqa davomida 37 ° da termostatga joylashtiriladi.

Endo muhitida E. coli metall tusli qizil rangli koloniyalarni, tif-paratif va dizenteriya guruhidagi bakteriyalar rangsiz koloniyalarni hosil qiladi.

Uglevodlarning rang-barang qatori (Hiss muhiti). 100 ml suvga 1 g pepton va 0,5 g osh tuzi qo'shing. Pepton va tuz bir necha daqiqa davomida issiq suvda eritiladi va qog'oz filtri orqali filtrlanadi (eritma butunlay shaffof bo'lishi kerak). pH ni 7,0 ga o'rnating. Ishlatilgan uglevodlardan birining 1% belgilangan muhitda eritiladi, gazni ushlash uchun probirkalar tubiga floats tushiriladi (qandlarning chuqur parchalanishini ko'rsatadi) va indikator qo'shiladi. Ko'rsatkich sifatida quyidagilar qo'llaniladi:

a) lakmus damlamasi - 100 ml muhitga 5 ml. Kislotali muhitda lakmus damlamasi qizarishni ko'rsatadi, ishqoriy muhitda u ko'k rangga aylanadi;

b) tozalangan lakmus preparati bo'lgan azolitmin, uning kaliy tuzi (1 litr muhitga 0,25 g azolitmin qo'shiladi);

v) bromotimol blau - 1 litr muhitga 1 ml 1,6% li indikatorning spirt eritmasi (muhit yashil bo'ladi, ishqor hosil bo'lganda ko'k rangga aylanadi, kislota hosil bo'lganda sarg'ayadi);

d) Andrede indikatori, u 1 g fuksin kislotasi, 400 ml distillangan suv va 64 ml oddiy natriy gidroksid eritmasidan iborat. Ozuqa muhitiga 1% indikator qo'shiladi. Probirkadagi muhit pushti rangsiz somon-sariq rangga ega bo'lishi kerak. Kislotali muhitda muhitning rangi qizil rangga o'zgaradi.

Indikator uglevod fermentatsiyasi ta'sirida sodir bo'ladigan ozuqa muhitining reaktsiyasidagi o'zgarishlarni aniqlash, ya'ni mikroblarning biokimyoviy faolligini aniqlash uchun qo'shiladi. Ikkinchisi bir qator yuqumli kasalliklarni (tif, dizenteriya, vabo va boshqalar) mikrobiologik diagnostika qilish uchun katta ahamiyatga ega. Uglevodlar va indikatorli muhit steril naychalarga quyiladi va 3 kun davomida 100 ° da fraksiyonel sterilizatsiya qilinadi.

Qisqa rang-barang qator. E. coli, S. typhi o'sishi davridagi o'zgarishlar.

Aeroblarning sof kulturalarini ajratib olish usullari.

Drigalskiy usuli

Anaeroblarning sof kulturasini ajratib olish.

Amaliy ko'nikmalarga qarang

Virusologik usullar. Maqsad, printsip.

Virusologik usul

Asosiy bosqichlar:

1. Test materialining to'plami.

2. Sitotropizm tamoyili asosida tanlash va sezgir test tizimini olish, uning hayotiyligini aniqlash.

3. Tanlangan tizimning infektsiyasi.

4.Virusni uning nuklein kislotasi, antigenlari, gemagglyutinin, CPD, inkluzyonlarini aniqlash asosida ko'rsatish.

5. Virusni aniqlash va titrlash quyidagilar asosida amalga oshiriladi:

a) immunologik reaksiyalar yordamida virus antigenlarini aniqlash (RIF, Elishay, RPGA, RSK, RN, VIEF va boshqalar); b) organlar va to'qimalarni patohistologik tekshirish; c) CPP; d) klinik belgilar, biologik testlar (keratokonjunktival va boshqalar).

Viruslarni aniqlash usullari

Hujayra madaniyati viruslar bilan zararlanganda, virus ta'sirining turli xil ko'rinadigan ko'rinishlarini olish mumkin:

1. Virusning hujayra madaniyatiga sitopatik ta'siri (CPE)- unda ko'rinadigan morfologik degenerativ o'zgarishlarning paydo bo'lishi;

2. Infektsiyalangan hujayra madaniyatining qobiliyatini egallash gemodsorbtsiya– hujayra qatlami yuzasida eritrotsitlarning adsorbsiyasiga;

3. Infektsiyalangan hujayra madaniyatida xarakterli maxsus agar qoplamining zich qatlami ostida shakllanishi. plitalar, bu viruslarning "salbiy koloniyalari";

4. Hujayra ichidagi qo'shimchalar

Madaniy vositalarning tasnifi:

Tabiiy- hayvonlar yoki o'simliklardan olingan mahsulotlardan iborat va noaniq kimyoviy tarkibga ega. Masalan: sabzavot va meva sharbatlari, hayvon to'qimalari, qon, sut, tuxum va boshqalar. (IPA, MPB).

Yarim sintetik- tarkibiga ma'lum kimyoviy tabiatli birikmalar va noma'lum tarkibga ega moddalar kiradi. Masalan: glyukoza bilan MPB, Endo muhiti, Sabouraud muhiti.

Sintetik- aniq konsentratsiyalarda faqat kimyoviy jihatdan sof birikmalarni o'z ichiga oladi. Laboratoriya tajribalarida foydalaniladi. Masalan: Chapek muhiti, Omelyanskiy, Ushinskiy va boshqalar.

Madaniyat vositalarining maqsadi

Universal(umumiy maqsadda) - ko'p turdagi mikroorganizmlarni etishtirish uchun mos va maxsus ozuqa muhitlari uchun asos sifatida ishlatiladi. Misollar: MPB, MPA, Xottinger muhiti, GRM, tioglikollat ​​muhiti.

Maxsus mikroorganizmlar oddiy muhitda o'smaydigan hollarda qo'llaniladi. Bularga qon, zardobli agar, zardobli bulon, astsitli bulon, astsitli agar va boshqalar kiradi.

1. Tanlangan muhitlar- ba'zi mikroorganizmlar boshqa turdagi bakteriyalarga qaraganda ularda tezroq va intensiv o'sadi. Masalan, 1% li ishqoriy peptonli suv vibrios vabosi uchun, difteriya qo‘zg‘atuvchilari uchun Ru va Leffler muhiti uchun selektiv muhit hisoblanadi.

2. Tanlangan - selektiv qo'shimchalar (safro, bo'yoqlar, antibiotiklar va boshqalar) tufayli ular mikroorganizmlarning ayrim turlarining rivojlanishini bostirishga qodir, ammo boshqa turlarga ta'sir qilmaydi. Misollar: Myuller muhiti tif-paratif bakteriyalari uchun, furazolidon-agar korinebakteriyalar va mikrokokklar uchun selektivdir. Ommaviy axborot vositalariga antibiotiklarning qo'shilishi ularni zamburug'lar uchun tanlab oladi (masalan, Sabouraud muhiti va boshqalar).

3. Differensial diagnostika- mikroorganizmlarning biokimyoviy xususiyatlarini aniqlash va ularni farqlash imkonini beruvchi muhitlar guruhi. Ular proteolitik, peptolitik, saxarolitik, gemolitik, lipolitik va qaytaruvchi xususiyatlarni aniqlash uchun muhitlarga bo'linadi (Endo, Levin, Ploskirev, Gissa media).

4. Konservant (transport) -

yig'ish paytidan boshlab mikroorganizmlarning hayotiyligini saqlab qolish uchun mo'ljallangan

diagnostika uchun ekishdan oldin biomaterial

Suyuqlik(bulyonlar) - mikroorganizm biomassasining fiziologik va biokimyoviy xususiyatlarini va to'planishini o'rganish

Yarim suyuqlik(1% agar) - kulturalarni saqlash va anaeroblarni etishtirish

Zich(3-5% agar) - sof kulturalarni ajratish, to'plash, miqdoriy qayd etish, madaniy xususiyatlarni o'rganish, antagonistik munosabatlar

Ommaviy- sanoatda urug'larni saqlash (tariq, kepak)

Quruq– ozuqaviy muhitni tayyorlash uchun sanoat tomonidan ishlab chiqariladi

Styuart muhiti bilan transport tizimi

Styuartning muhiti ko'plab patogen mikroorganizmlarni saqlash va tashish uchun yarim qattiq, ozuqaviy moddalarga kambag'al substratdir, masalan. Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphteriae, Trichomonas vaginalis, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. va hokazo. Eng talabchan mikroorganizmlar bu muhitda bir kundan ortiq, boshqalari - bir necha kungacha yashaydi.

Muhitda tioglikolat mavjudligi bakteriyalarning fermentativ faolligini bostiradi, azotning yo'qligi esa ularning ko'payishiga to'sqinlik qiladi.

Keri Bleyr muhiti bilan transport tizimi

Keri Blerning transport vositasi Styuartning najas namunalari uchun maxsus ishlab chiqilgan asosiy transport vositasining modifikatsiyasidir.

Ba'zi enterobakteriyalarning metaboliti bo'lgan glitserofosfat ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, va boshqalar), noorganik fosfat bilan almashtiriladi,

Metilen ko'k olib tashlandi va muhitning pH qiymati 8,4 ga oshirildi.

Keri Blerning muhiti ko'pchilik patogenlarni, shu jumladan tez mikroorganizmlarni saqlashga imkon beradi. Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp..

Bu muhit anaeroblarni tashish uchun standart hisoblanadi.

Ames muhiti bilan transport tizimi

Ames transport vositasi Styuartning asosiy transport vositasining yana bir modifikatsiyasi bo'lib, unda glitserofosfat noorganik fosfat bilan almashtiriladi, chunki glitserofosfat ba'zi enterobakteriyalarning metabolitidir ( Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae va boshqalar.) va ba'zi gram-manfiy mikroorganizmlarning o'sishini qo'llab-quvvatlashi mumkin.

Metilen ko'k farmatsevtik faollashtirilgan uglerod bilan almashtirildi.

Bakterial hujayra o'tkazuvchanligini saqlab qolish uchun muhitga kaltsiy va magniy qo'shildi.

Bu muhit kabi mikroorganizmlarni qo'llab-quvvatlashga qodir Neisseria sp., Haemophilus sp., Corynebacteria, Streptokokklar, Enterobacteriaceae va hokazo, ammo eng yaxshi natijalar birinchi 24 soat ichida etishtirish orqali olinadi.

Universal boyitish vositalari: go'shtli peptonli agar (MPA) va go'shtli peptonli bulyon (MPB)

Ular biokimyoviy va serotiplashdan oldin madaniyatlarning tozaligini tekshirish uchun mikroorganizmlarni emlash uchun asosiy vositadir.

Ular oddiy mikroorganizmlarni etishtirish va hisoblash uchun ishlatiladi. Yarim suyuqlik shaklida vosita nazorat (mos yozuvlar) mikroorganizmlarini saqlash uchun ishlatilishi mumkin.

Universal saqlash muhitlari Hottinger muhiti

Enterobakteriyalar, Pseudomonas aeruginosa, stafilokokklar va streptokokklarning ayrim turlari kabi turli xil mikroorganizmlarni etishtirish uchun mo'ljallangan. Agar kerak bo'lsa, uni uglevodlar va tuzlar bilan boyitish mumkin.

Tarkibida Xottinger gidrolizati mavjud bo‘lib, u qiyma go‘shtni (mol go‘shti) pankreatin bilan fermentativ gidrolizlash, so‘ngra filtrlash va konservant sifatida xloroform qo‘shish natijasida olinadi.

Universal saqlash muhitlari:Myuller-Hinton muhiti

Ushbu vosita etishtirish uchun ishlatiladi Neisseria sp. mikroorganizmlarning mikroblarga qarshi vositalarga sezgirligini aniqlash.

Chorshanba McConkey

MacConkey medialari enterobakteriyalarni va tegishli gramm-manfiy tayoqchalarni selektiv izolyatsiya qilish uchun differentsial vosita sifatida tavsiya etiladi.

Laktoza-musbat shtammlar safro tuzining yog'ingarchilik zonasi bilan o'ralgan bo'lishi mumkin bo'lgan pushti yoki qizil koloniyalar bilan o'sadi.

Qizil rang muhitning laktoza parchalanish mahsulotlari (pH 6,8 dan pastga tushganda) bilan kislotalanishi va neytral qizil rangning adsorbsiyasi natijasida paydo bo'ladi.

Laktoza fermenti bo'lmagan shtammlar (Shigella, Salmonella) odatda shaffof, rangsiz koloniyalarni hosil qiladi va atrof-muhitni o'zgartirmaydi.

Differensial diagnostika muhiti:Endo media

Ushbu vosita Endo tomonidan laktoza fermenti va fermentlanmaydigan mikroorganizmlarni farqlash uchun madaniy muhit sifatida ishlab chiqilgan. U suv, oqava suv, sut va boshqa oziq-ovqat mahsulotlarini mikrobiologik tekshirish uchun ishlatiladi.

Natriy sulfit va asosiy fuchsin gram-musbat mikroorganizmlarga inhibitiv ta'sir ko'rsatadi. Laktoza mikroorganizmlar tomonidan aldegid va kislotaga parchalanadi. Aldegid, o'z navbatida, fuchsin-sulfit kompleksidan fuksinni chiqarib, koloniyalarning qizil rangini kuchaytiradi. E. coli da bu reaksiya juda yaqqol namoyon boʻladi va fuksinning kristallanishi bilan kechadi, bu koloniyalarning yashil rangli metall porlashi (muchsin porlashi) bilan namoyon boʻladi.

Differensial diagnostika muhiti:Sariq tuzli agar

Bu muhit klinik ahamiyatli stafilokokk kulturalarini ajratib olish uchun selektiv muhit sifatida ishlatiladi.

Mannitol fermentativ va farqlovchi substrat, shuningdek, uglerod manbai hisoblanadi.

Tuxum sarig'i emulsiyasining qo'shilishi (v/v 5% gacha) mikroorganizmlarning lipaza faolligini aniqlash imkonini beradi. Tuzli muhitda emulsiya shaffof bo'ladi, shuning uchun lipaz faolligi mavjud bo'lganda, koloniyalar atrofida sariq shaffof zona hosil bo'ladi.

Differensial diagnostika muhiti:Wilson-Blair yoki vismut sulfit agar

Salmonellalarni izolyatsiya qilish uchun selektiv muhit.

Hayvon to'qimalarining peptik hazm qilish va go'sht ekstrakti azotli oziq moddalar, uglerod, oltingugurt, B vitaminlari va ushbu bakteriyalarning ko'payishi uchun zarur bo'lgan mikroelementlar manbai bo'lib xizmat qiladi.

Yorqin yashil rang barcha gramm-musbat bakteriyalarning o'sishiga to'sqinlik qiladi. Glyukoza fermentativ uglevoddir. Temir sulfat vodorod sulfidi ishlab chiqarishni aniqlay oladi.

Vismut og'ir metal bo'lib, salmonellalardan tashqari ko'pgina gramm-manfiy ichak bakteriyalarining o'sishiga to'sqinlik qiladi.

Salmonellalar glyukoza va vismut sulfit ishtirokida temir sulfatni temir sulfidga kamaytiradi, bu esa ularning koloniyalarini qora rangga aylantiradi.

Maxsus tanlov muhitlari:Loefflerning muhiti

Ot zardobi qo'shilgan bu vosita etishtirish uchun ishlatiladi Corynebacterium diphtheriae klinik materialdan va ushbu mikroorganizmlarning sof madaniyati subkulturalaridan.

Sarumning yuqori konsentratsiyasi mikroorganizmlarning proteolitik faolligini, shuningdek pigment shakllanishini aniqlashga yordam beradi. Pepton va go'sht ekstrakti mikroorganizmlarni muhim oziq moddalar bilan ta'minlaydi. Glyukoza fermentativ substrat va energiya manbai hisoblanadi.

Maxsus tanlangan media:Kampilobakagar

Campylobacter uchun selektiv vosita, qo'y yoki ot qoni va antibiotiklar bilan qonli agar asosidan iborat.

Antimikrobiyal komponentlar normal mikrofloraning o'sishini sezilarli darajada inhibe qiladi, o'sishini va najasdan chiqarilishini rag'batlantiradi. Campylobacter homila ssp. jejuni.

Qo'shimchada amfoteritsin B mavjudligi zamburug'larning o'sishini sezilarli darajada yoki to'liq bostiradi, keyinchalik kiritilgan sefalotin normal ichak mikroflorasini bostirishni kuchaytiradi.

Koloniyalar Campylobacter homila ssp. jejuni shilimshiq xarakterga ega, tekis kulrang, tartibsiz konturli yoki ko'tarilgan, dumaloq, gemolizsiz.

Ba'zi shtammlar sariq-jigarrang yoki pushti rangdagi koloniyalarni hosil qilishi mumkin.

Muhitning nam yuzasida birlashuvchi o'sish yoki to'planish paydo bo'lishi mumkin.

Elektiv vositalar mikrobiologik amaliyotga S.N.Vinogradskiy va M.Beyerink tomonidan kiritilgan. Bular bir yoki bir nechta kimyoviy birikmalarni qo'shib, bir turdagi mikroorganizmlarning (yoki turdosh mikroorganizmlar guruhining) o'sishi va ko'payishi uchun optimal sharoitlar va qolganlari uchun noqulay sharoitlar yaratiladigan ozuqaviy muhitlardir. Bunday muhitlar, asosan, mikroorganizmlarning sof madaniyatini tabiiy yashash joylaridan ajratib olish va ko'plab madaniyatlarni to'plash uchun ishlatiladi (sof madaniyatni ajratib olishning kimyoviy usuli). Masalan, koagulyatsiyalangan ot zardobi bo'lgan ozuqa muhiti difteriya bakteriyalari uchun selektiv muhit, vabo vibrioni uchun ishqoriy peptonli suv, tif isitmasi qo'zg'atuvchisi uchun o't bulonlari, brusella uchun jigar bulonlari va boshqalar.

Mikroblarning selektiv ozuqa muhitida to'planishi ko'p hollarda dastlabki sinov materiallaridan (masalan, bemor yoki tashuvchilarning najasidan vibrio vabo yoki tif bakteriyasi va boshqalar) sof kulturalarni ajratib olishda muhim dastlabki bosqich bo'lib xizmat qiladi.

Differensial oziq muhit deganda nimani tushunasiz?

Differentsial diagnostika vositalari mikroorganizmlarning o'sishi va rivojlanishini ta'minlaydigan moddalardan tashqari, ma'lum fermentlar uchun substrat sifatida ishlatiladigan moddalarni o'z ichiga olganlardir. Substratdagi sifat o'zgarishiga asoslanib, ma'lum bir fermentning mavjudligi aniqlanadi (ozuqa muhitida substrat parchalanish mahsulotlari mavjudligiga reaksiyaga kirishuvchi indikator yordamida baholanadi).

Mikroorganizmlarning har bir turi etarlicha barqaror fermentlar to'plami bilan tavsiflanadi. Differentsial diagnostika vositalaridan foydalangan holda fermentlar to'plamini aniqlash mikroorganizmlarning turlarini farqlash imkonini beradi. Masalan, qonli agar gemolizin fermentini aniqlash imkonini beradi, Uning muhiti - saxarolitik fermentlar (uglevodlar), jelatin mikroblarning proteolitik xususiyatlarini hisobga olish uchun ishlatiladi va hokazo.

Qonli agar. Gemolizin fermentining mavjudligi qizil qon hujayralarining yo'q qilinishi va qonli agarda o'stirilgan mikroblar atrofida yorug'lik zonasining shakllanishi bilan baholanadi.

Uning ommaviy axborot vositalari. Uglevodlarni kislotaga aylantiruvchi fermentlar - uglevodlar mavjudligi muhitning pH ning kislotali tomonga o'zgarishi va ozuqa muhiti rangining o'zgarishi bilan ko'rsatiladi. Fermentlar to'plamidagi farq izolyatsiya qilingan madaniyatning tozaligini tekshirish, shuningdek, yuqumli materialning emlashlarini dastlabki o'rganish jarayonida bir turni boshqalardan tezda farqlash uchun ishlatilishi mumkin.

Kimyoviy reaktivlar

1. Kimyoviy reagentlar nima va ular nima uchun ishlatiladi?

Kimyoviy reaktivlar- laboratoriya amaliyotida turli xil kimyoviy reaksiyalarni amalga oshirish uchun ishlatiladigan moddalar.

Ko'pgina hollarda kimyoviy reagentlar alohida moddalardir, lekin ko'pincha ular murakkab tarkibga ega. Kimyoviy reagentlarning umumiy qabul qilingan tasnifi yo'q, ko'pincha ular analitik kimyoviy reagentlarga va boshqa barcha narsalarga bo'linadi.

2. Veterinariya tibbiyotida ular qanday maqsadlarda qo'llaniladi?

Veterinariya tibbiyotida kimyoviy reagentlar analitik va diagnostika maqsadlarida klinik, veterinariya-sanitariya, gigiyenik, ekspert, biokimyoviy va boshqa laboratoriya tadqiqotlarida qo'llaniladi. Biologik va klinik amaliyotda qo'llaniladigan va ishlab chiqilgan tadqiqot usullari turli xil talablarni qondirishi kerak bo'lgan keng turdagi kimyoviy reagentlarni talab qiladi. Masalan, klinik va biokimyoviy tadqiqotlar fermentlar uchun yuqori darajada tozalangan substratlar, fermentlarning o'zlari, ma'lum guruhlar uchun reagentlar (SH, NH3, COOH guruhlari va boshqalar) va boshqalarni talab qiladi. Noorganik va organik sintezlarni amalga oshirish uchun, shuningdek, sifat va miqdoriy tahlillar uchun, shu jumladan. turli sohalarda veterinariya-sanitariya nazorati, dori-darmonlarni tahlil qilish) oziq-ovqat mahsulotlari, havo, suv va boshqalarni veterinariya, sanitariya-gigiyena tahlillarini o'tkazishda juda ko'p turli xil yuqori darajada tozalangan kimyoviy reagentlar qo'llaniladi.

1.Tarkibi bo'yicha ozuqaviy muhitlarga bo'linadi oddiy va murakkab

Umumiy maqsadli muhitlar guruhi mavjud - oddiy. Bu guruhga go'sht-peptonli bulon (oddiy ozuqaviy bulon), go'sht-peptonli agar (oddiy ozuqaviy agar), to'yimli jelatin kiradi. Ushbu vositalar ko'plab patogen mikroblarni ko'paytirish uchun ishlatiladi. Umumiy maqsadli muhitlar yoki oddiy ozuqaviy muhitlar odatda pepton va natriy xlorid qo'shilgan gidrolizatlardan tayyorlanadi. Ular, shuningdek, murakkab ommaviy axborot vositalarini tayyorlash uchun asos sifatida ishlatiladi.

Bundan tashqari, ularning tarkibiga ko'ra, ular ajralib turadi oqsil, oqsilsiz va mineral muhit.

2. Kelib chiqishi bo'yicha muhitlarga bo'linadi sun'iy va tabiiy (tabiiy).

Tabiiy ozuqa muhitida hayvonlar (masalan, qon, sarum, safro) yoki o'simlik (masalan, sabzavot va mevalar bo'laklari) kelib chiqishi mumkin.

3. Maqsadga ko'ra ajratish saqlovchi vositalar(birlamchi ekish va tashish uchun), boyitish muhiti(ma'lum bir bakteriyalar guruhini to'plash uchun), madaniyat ommaviy axborot vositalari(universal oddiy, murakkab maxsus va toksin hosil qilish uchun), izolyatsiyalash va to'plash uchun vositalar (konservant, boyitish va selektiv) va identifikatsiya muhiti(differensial va elektiv-differensial).

Konservativ madaniyat vositalari patogenlarning o'limini oldini olish va saprofitlarning o'sishini bostirish. Eng ko'p ishlatiladigan glitserin aralashmasi, gipertonik eritma, LiCl 2 bilan glitserin konservanti, natriy sitrat va natriy deoksixolat eritmasi.

Bakteriyalar uchun boyitish muhiti

Boyitish vositalari(masalan, Kitta-Tarozzi muhiti, selenit bulyoni, tioglikollat ​​muhiti) ayrim turlar uchun optimal, boshqalari uchun noqulay sharoit yaratib, ma’lum bir guruh bakteriyalarni to‘plash uchun ishlatiladi. Ko'pincha bunday vositalar sifatida turli xil bo'yoqlar va kimyoviy moddalar qo'llaniladi - safro tuzlari, Na+ tetrationat, K tellurit, antibiotiklar, fuchsin, gentian binafsha, yorqin yashil va boshqalar.

Shuningdek tayinlash orqali muhitlarni farqlash elektiv, maxsus va differentsial diagnostika.

Tanlangan muhitlar (tanlama, tanlab olish, to'plash, boyitish). Selektiv ozuqa muhitini yaratish printsipi ular etishtirish uchun mo'ljallangan mikrob turining asosiy biokimyoviy va energiya ehtiyojlarini qondirishga yoki unga hamroh bo'lgan mikrofloraning o'sishini bostiradigan inhibitorlarni qo'shishga asoslangan. Oziq moddalar, mikroelementlar, o'sish omillarining ma'lum bir tarkibi va konsentratsiyasi qat'iy belgilangan pH qiymatida yoki inhibitorlarning qo'shilishi bir yoki bir nechta turdagi mikroorganizmlarni etishtirish uchun maqbul sharoitlarni ta'minlaydi. Ularga turli mikroblar aralashmasini o'z ichiga olgan materialni ekishda birinchi navbatda atrof-muhit tanlab olinadigan turlarning o'sishi paydo bo'ladi. Elektiv muhitlarga misol qilib oʻt suvi, selenit bulyoni, Ploskirev muhiti – ichak oilasiga mansub mikroblarni oʻstirish uchun, ishqoriy peptonli suv – vibrion vabosi uchun moʻljallangan.

Safro bulyoni. MPB ga 10-20% ho'kiz safrosi qo'shiladi. Safro kokklar va havo florasining o'sishini bostiradi, ammo salmonellalarning ko'payishi uchun qulaydir.

Selenit bulyoni. U selenitning natriy tuzi qo'shilgan fosfatli bulondan iborat bo'lib, u kokkal flora va ichak tayoqchasi o'sishining inhibitori hisoblanadi, ammo salmonellalarning o'sishiga to'sqinlik qilmaydi.

Chorshanba Ploskireva. E. coli, coli ingibitorlarini o'z ichiga olgan, ammo shigella va salmonellalarning o'sishi uchun qulay bo'lgan zich muhit, ularning ko'payishi porloq yashil va safro tuzlari bilan to'sqinlik qilmaydi.

Peptonli suv. Tarkibida 1% pepton va 0,5% natriy xlorid mavjud. Vibrion vabosi uchun muhit tanlab olinadi, chunki ular "och muhitda" boshqa bakteriyalarga qaraganda yaxshiroq ko'payadi, ayniqsa gidroksidi reaktsiya bilan, chunki ular o'zlari kislotali chiqindilarni chiqaradilar.

Maxsus muhitlar. Oddiy ozuqa muhitida o'smaydigan bakteriyalarni etishtirish uchun zarur. Ba'zi organizmlar uchun oddiy ozuqa muhitiga uglevodlar, qon va boshqa qo'shimcha oziq moddalar qo'shilishi kerak. Oddiy ozuqaviy muhitlarga streptokokk uchun qandli bulon va qandli agar (mos ravishda MPB va MPA dan tayyorlanadi, unga 0,5-2% glyukoza qo'shiladi) misol bo'la oladi.

Differensial diagnostika muhitlari o'rganilayotgan mikrobning turlarini, uning metabolizm xususiyatlaridan kelib chiqib aniqlash uchun ishlatiladi. Maqsadiga ko'ra, differentsial diagnostika muhitlari quyidagilarga bo'linadi:

1. Aniqlash uchun vosita proteolitik qobiliyat sut, jelatin, qon va boshqalarni o'z ichiga olgan mikroblar.

2. Turli xillarni aniqlash uchun uglevodlar va ko'p atomli spirtlar bo'lgan muhitlar saxarolitik fermentlar.

Sakkarolitik xususiyatlar va redoks fermentlarini aniqlash uchun mo'ljallangan differentsial diagnostika vositalarining tarkibiga quyidagi ko'rsatkichlar qo'shiladi: neytral qizil, kislota fuksin, bromotimol ko'k, rozolik kislota (BP) bilan suvli ko'k. Turli xil pH qiymatlarida rangini o'zgartirib, indikator ferment mavjudligini va muhitga kiritilgan ingredientning parchalanishini ko'rsatadi.

Differensial diagnostika muhitiga misollar:

Endo media. 1% laktoza va natriy sulfit bilan rangsizlangan asosiy fuchsin (indikator) qo'shilgan MPA dan iborat. Endo muhiti biroz pushti rangga ega. Bu qobiliyatga ega bo'lmagan bakteriyalardan kislotali mahsulotlar hosil qilish uchun laktozani parchalaydigan bakteriyalarni ajratish uchun ichak infektsiyalari tashxisida qo'llaniladi. Laktoza-musbat mikroblarning koloniyalari (Escherichia coli) fuksinning kamayishi tufayli qizil rangga ega. Laktoza-manfiy mikroorganizmlarning koloniyalari - salmonellalar, shigellalar va boshqalar rangsizdir.

Differentsial diagnostika muhitlari qisqa va kengaytirilganlarni o'z ichiga oladi rang-barang qator. U uglevodlar (Hiss media), MPB, sut va go'sht-pepton jelatinli muhitdan iborat.

Hiss media peptonli suv asosida tayyorlanadi, unga kimyoviy toza mono-, di- yoki polisaxaridlar (glyukoza, laktoza, kraxmal va boshqalar) qo'shiladi.

Kislotalarning hosil bo'lishi va uglevodlarning parchalanishi natijasida pH o'zgarishlarini aniqlash uchun vositaga indikator qo'shiladi. Uglevodlarning chuqurroq parchalanishi bilan gazsimon mahsulotlar (CO 2, CH 4 va boshqalar) hosil bo'lib, ular floats yordamida olinadi - kichik probirkalar muhitga teskari tushiriladi. Uglevodli muhitlarni 0,5-1% agar-agar qo'shilgan holda zich muhit sifatida ham tayyorlash mumkin. Keyin gaz hosil bo'lishi muhit ustunida pufakchalar (tanaffuslar) hosil bo'lishi bilan aniqlanadi.

Rangli qatorga kiruvchi MPBda aminokislotalar va peptonlarning (indol, vodorod sulfidi) parchalanishi natijasida hosil bo'lgan mahsulotlar topiladi. Vodorod sulfidi kultura ekilganidan keyin MPB ga qo'rg'oshin atsetat eritmasiga namlangan filtr qog'oz tasmasini qo'yish orqali aniqlanadi. Tarkibida oltingugurt boʻlgan aminokislotalar parchalanganda vodorod sulfidi ajralib chiqadi va qoʻrgʻoshin sulfid hosil boʻlishidan qogʻoz qora rangga aylanadi. Aniqlash uchun indol murakkab ko'rsatkichdan foydalanishingiz mumkin. Indol triptofanning parchalanishi natijasida hosil bo'ladi va bu ko'rsatkich MPBda yetishtirilgan madaniyatga qo'shilganda aniqlanishi mumkin. Indol borligida MPB yashil yoki ko'k rangga aylanadi.

Amaliy bakteriologik laboratoriyalarda ular keng qo'llaniladi mikro va ekspress usullari mikroorganizmlarning biokimyoviy xususiyatlarini indikativ o'rganish uchun. Buning uchun ko'plab test tizimlari mavjud. Ko'p ishlatiladigan indikator qog'ozlar tizimi (NIB). SIBlar shakar yoki boshqa substratlar eritmalari bilan indikatorlar bilan birgalikda singdirilgan filtr qog'oz disklari. Bunday disklar suyuq ozuqa muhitida yetishtirilgan kultura bilan probirkaga tushiriladi. Disk rangining substrat bilan o'zgarishi fermentning ishlashini baholash uchun ishlatiladi. Enterobakteriyalarni identifikatsiyalashni o'rganish uchun mikro-test tizimlari ko'rsatkichlar qo'shilgan turli xil substratlarni o'z ichiga olgan ommaviy axborot vositalariga ega bir martalik plastik idishlar bilan ifodalanadi. Bunday test tizimlariga mikroorganizmlarning sof madaniyatini ekish bakteriyalarning sitratlar, glyukoza, saxaroza, ammiak, indol ajratish, karbamid, lizin, fenilalanin va boshqalarni parchalash qobiliyatini tezda aniqlash imkonini beradi.

MAXSUS (TANLANMA) OZIQLANISH OAV

Xamirturush o'sishi uchun vosita

Sintetik o'qish vositasi

Muhit tarkibiga, g/l: ammoniy sulfat 3, magniy sulfat 0,7, kaltsiy nitrat 0,04, natriy xlorid 0,5, kaliy dihidrofosfat 1,0, kaliy vodorod fosfat 0,1 kiradi. Dastlabki pH 6,6. Xamirturush ishlatmaydigan kaltsiy nitratini muhitdan chiqarib tashlash mumkin. Xamirturush ko'payishini o'rganish uchun 2% shakar qo'shing, fermentatsiyani o'rganish uchun - 5-10%. To'liq sintetik muhitda kristalli vitaminlar, mkg/ml: inositol 5, biotin 0,0001, pantotenik kislota 0,25, tiamin 1,0, piridoksin 0,25, nikotin kislotasi 0,5. Muhitni avtoklavda 0,1 M Pa bosimda 20 daqiqa sterilizatsiya qiling.

Glyukoza-ammiakli muhit

1 litr vodoprovod suvida quyidagi moddalar mavjud, g: ammoniy sulfat 5, kaliy dihidrogen fosfat 0,85, kaliy vodorod fosfat 0,15, magniy sulfat 0,5, natriy xlorid 0,1, kaltsiy xlorid 0, 0, o'sish omillari uchun kaltsiy, xlorid 10, o'sish omillari 02. xamirturush (0,2%) yoki go'sht (0,3%) ekstrakti va uzum sharbati qo'shiladi.

Nomukammal xamirturushlarni aniqlash uchun sintetik vosita

1 litr vodoprovod suvida quyidagi moddalar mavjud, g/l: glyukoza 50, lizin 3, kaliy digidrofosfat 1, magniy sulfat 1, temir sulfat - izlar. Har bir komponent suvda alohida eritiladi va ko'rsatilgan tartibda qo'shiladi. Muhitga agar (1,5%) qo'shiladi, eritiladi, probirkalarga quyiladi va 0,05 MPa bosimda 20 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi.

Nomukammal xamirturushlarni aniqlash uchun lizinli to'liq muhit

1 litr vodoprovod suvida quyidagi moddalar mavjud, g/l: glyukoza 50, magniy sulfat 1, kaliy dihidrofosfat 2, kaliy laktat 12 ml (50% eritma), /, (+) lizin monohidrat 1, vitamin eritmasi (har biriga). 100 ml steril distillangan suv qo'shiladi, g: inositol 2, kaltsiy pantotenat 0,4, nikotinamid 0,5, gidrattiamin 0,1, agar 20;muhitning pH 5-5,2.Muhit 15 ml probirkalarga quyiladi va 1 daqiqa 5 daqiqa sterilizatsiya qilinadi. bosim 0,1 MPa.

Nomukammal xamirturushlarni aniqlash uchun asetat muhiti

1 litr vodoprovod suvi uchun 10 g natriy asetat, 10 g ammoniy xlorid, 5 g glyukoza, 3 ml achitqi avtolizat olib, 5 ml probirkalarga quyiladi va 0,05 MPa bosimda 30 minut davomida sterilizatsiya qilinadi.

Morfologik jihatdan asosiy madaniyatga o'xshash begona xamirturushlarni aniqlash uchun vosita

10 g pepton, 2 g kaliy vodorod fosfat 500 ml distillangan suvda eritiladi va filtrlanadi. Filtrda 15 g agar eritiladi, 10 g glyukoza, 0,4 g eozin va 0,065 ml metilen ko'k (90% spirt eritmasi) qo'shiladi, issiq distillangan suv bilan 1000 ml ga sozlanadi, probirkalarga quyiladi va sterilizatsiya qilinadi. 0, 1 MPa bosim ostida 15 daqiqa. Sterilizatsiya qilinganda rang yo'qoladi, sovutganda yana paydo bo'ladi. O'rta 2 oydan ortiq bo'lmagan muddatda saqlanadi.

Psevdomitseliy hosil bo'lishi uchun vosita

Glyukoza peptonli agar. 1 litr vodoprovod suviga g: pepton 10, glyukoza 20, agar 30-35 qo'shing. 0,05 MPa bosim ostida 30 daqiqa sterilizatsiya qiling. Agar kerak bo'lsa, xamirturush yoki go'sht ekstrakti (0,5%) qo'shishingiz yoki suyuqlik shaklida pishirishingiz mumkin.

Kartoshkali agar. 100 g tozalangan, yuvilgan, ingichka to'g'ralgan kartoshka 300 ml musluk suvi bilan bir necha soat davomida salqin joyda infuz qilinadi. Ekstrakt suziladi, 230 ml ekstrakt suvdan 1 litrga keltiriladi, 20 g glyukoza va 30-35 g agar qo'shiladi, eritiladi va 0,075 MPa bosimda 1 soat davomida sterilizatsiya qilinadi.

Uglevodli xamirturushli suv ("rang seriyasi")

Xamirturushning uglevodlarning fermentatsiyasiga olib kelishi qobiliyati sinov shakarining 2% (glyukoza, maltoza, saxaroza, laktoza, rafinoza va boshqalar) bilan xamirturushli suv yordamida aniqlanadi. Muhit suzuvchi probirkalarga, Dunbar probirkalariga quyiladi va qisman oqadigan bug 'bilan sterillanadi. Ekishdan keyingi natijalar 2 kundan keyin, agar kerak bo'lsa, 30 ° C haroratda 7 kunlik ishlov berishdan keyin qayd etiladi.

Xamirturushlarning uglevodlarni oksidlanish yo‘li bilan metabollash qobiliyati quyidagi tarkibdagi muhitda o‘rganiladi, r/l: ammoniy sulfat 5, kaliy digidrofosfat 1, magniy sulfat 0,5, avtolitat 1, sinov shakar 10, agar 20. Muhit quyiladi. probirkalarga solib, 0,05 MPa bosimda 30 minut sterillangan, agar nishab tayyorlang. Madaniyatning o'sishi 3-4 kundan keyin baholanadi.

Shakar bilan xamirturushli agar

0,5% natriy xlorid, 1% glyukoza (yoki 4 yoki 10% saxaroza) va 2% agar xamirturushli suvda, pH 6,8 (glyukoza bilan) va 6-6,5 (saxaroza bilan) eritiladi. Muhit probirkalarga yoki kolbalarga quyiladi va 0,05 MPa bosimda 30 minut davomida sterillanadi.

Antibiotik vositalar

Xamirturushning imtiyozli rivojlanishi va unga hamroh bo'lgan bakteriyalarni bostirish uchun ommaviy axborot vositalariga keng spektrli antibiotiklar kiritiladi: streptomitsin (100 birlik/ml), penitsillin (20-100 birlik/ml), levomitsin (50 mg/l), neomitsin ( 20 birlik/ml) va boshqalar. Ular atrof-muhitga birgalikda yoki alohida qo'shilishi mumkin.

Askospora shakllanishi uchun muhit

Chorshanba Gorodkova. 1 litr vodoprovod suvida, g: pepton 10, natriy xlorid 5, glyukoza 1 (yoki 2,5), agar 20; Atrof muhitning pH darajasi 7,3 ni tashkil qiladi. Probirkalarga quyiladi va 0,1 MPa bosimda 15 daqiqa sterillanadi.

Makklari asetat agar. 1 litr distillangan suvga g: natriy asetat 8,2, kaliy xlorid 1,8, glyukoza 1, achitqi ekstrakti 2,5, agar 15 qo'shiladi. Avtoklavda 0,1 MPa bosimda 15 minut.

Chorshanba Starkey. 1 litr vodoprovod suvida eriydi, g: kaliy vodorod fosfat 1, kaliy dihidrogen fosfat 0,25, magniy sulfat 0,25, kaltsiy xlorid 0,05, agar 20. 15 daqiqa davomida 0,05 MPa bosimda sterilizatsiya qiling.

Osmofil xamirturush o'sish muhiti

1 litr glyukoza siropiga (50-60% DM) 5 g pepton va 20 g agar qo'shing. Pepton xamirturushli suv bilan almashtirilishi mumkin (50 ml). 0,05 MPa bosim ostida sterilizatsiya qiling.

Melas sharbati

200-300 g qalin shinni 1:3 nisbatda suv bilan aralashtiriladi, 95 ° C haroratgacha qizdiriladi va 2 soat davomida qo'yiladi.Shu bilan birga, koagulyatsiyalangan kolloidlar cho'kadi va melas eritmasi tiniqlashadi. . Probirkaga 3% diammoniy fosfat solinadi, suv bilan 5-8% DM gacha suyultiriladi va probirka yoki kolbalarga quyiladi. Agar muhitini tayyorlash uchun 1,5-2% agar qo'shing. 0,05 MPa bosimda 30 minut avtoklavda yoki fraksiyonel ravishda 1 soat davomida 20-24 soatlik interval bilan 3 marta sterilizatsiya qiling.

Filamentli qo'ziqorinlarni etishtirish uchun vosita

Lavlagi agar

Yaxshi yuvilgan qand lavlagi tilimga kesiladi, musluk suvi (1 litr suv uchun 20 g lavlagi) bilan to'ldiriladi va 30 daqiqa qaynatiladi. Filtrat suv bilan dastlabki hajmga keltiriladi, 2% agar qo'shiladi va 0,1 MPa bosimda 30 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi.

Lavlagi pulpasi

Toza lavlagi maydalagichda maydalanadi, Petri idishlariga solinadi va aylantirilmasdan, 0,1 MPa bosimda 30 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi.

Chorshanba Capek

Muhitning tarkibi, g/l: saxaroza yoki glyukoza 30, kaliy dihidrogen fosfat 1,0, natriy nitrat 2,0, magniy sulfat 0,5, kaliy xlorid 0,05, temir sulfat 0,1, oldingi qo'shilgan agar-agar namunasi va agar 20 . 1 litr distillangan suvda eritiladi, oqayotgan bug 'bilan isitiladi va limon kislotasi yoki natriy gidroksidning 10% eritmasi bilan pH 4,0-5,5 ga o'rnatiladi. Filtrdan o'tkazing, probirkalarga quying va 1 kunlik interval bilan 3 marta 30 daqiqa davomida qisman oqadigan bug' bilan sterilizatsiya qiling.

Czapek-Dox shakar nitrat agar

Variant 1. 1 litr distillangan suv uchun g: saxaroza 20, kaliy vodorod fosfat 0,5, magniy sulfat 0,5, natriy xlorid 0,5, kaliy nitrat 1, temir sulfat izlari, kaltsiy karbonat 2-5, agar 20 olinadi.

Variant 2. 1 litr distillangan suv olish uchun g/l: saxaroza 30, ammoniy nitrat 2,5, kaliy digidrofosfat 1, magniy sulfat 1, temir sulfat 0,01, agar 20.

Glyukoza-kraxmalli muhit

Czapekning saxaroza nitrat agarida bo'lgani kabi bir xil tuz komponentlari, ammo saxaroza o'rniga 25 g eriydigan kraxmal va 5 g glyukoza olinadi.

Kraxmalli ammoniyli agar

Muhitning tarkibi, g/l: eriydigan kraxmal 10, kaltsiy karbonat 3, kaliy vodorod fosfat 1, magniy sulfat 1, natriy xlorid 1, ammoniy sulfat 1, agar 20. 0,05 MPa bosimda 30 minut sterilizatsiya qilinadi.

Chorshanba Saburo

100 ml steril xamirturushli suvga g: pepton 5, glyukoza 4, agar 1,8-2 qo'shing. 20 daqiqa davomida 0,05 MPa bosimda yoki qisman sterilizatsiya qiling.

Ushbu vositaning asosi xamirturushli suvdir. Xamirturushli suv tayyorlash uchun 70-100 g yangi presslangan xamirturush (7-10 g quruq xamirturush) 1 litr distillangan suvda 20-30 daqiqa qaynatiladi va yuqori ballonda 12 soat sovuqda qoldiriladi. suyuqlik quyiladi, yana 1 dona qo'shiladi.l suv, 30 daqiqa qaynatiladi, filtrlanadi, pH ni kerakli qiymatga sozlang. Tayyorlangan vosita 1 kunlik interval bilan 20 minutlik 2-3 daqiqalik bosqichlarda sterilizatsiya qilinadi. 100 ml steril xamirturushli suvga 1% pepton, 2% agar, agar eritilgandan keyin 4% glyukoza yoki maltoza solinadi, filtrlanadi, probirkalarga quyiladi va 0,05 MPa bosimda 20 daqiqa davomida sterillanadi.

Muhit oddiy 1% peptonli suv yordamida ham tayyorlanishi mumkin.

Sut kislotasi bakteriyalarini ko'paytirish uchun vosita

Gidrolizlangan sut (Bogdanovga ko'ra)

Oddiy yoki yog'siz sut (pH 7,6-7,8) 5 daqiqa qaynatiladi, idish yaxshilab chayqatiladi va 45 ° C haroratgacha sovutiladi va 1 litrga 0,5-1 g pankreatin qo'shiladi, 4-7 daqiqadan so'ng 5 qo'shiladi. ml xloroform. 40 ° C haroratda 18-20 soat davomida termostatga joylashtiring. Pankreatin kukuni oz miqdorda iliq suvda oldindan suyultirilishi kerak. Birinchi soatlarda sut tiqin ochiq holda bir necha marta aralashtiriladi. Gidrolizlangan sut qog‘oz filtrdan filtrlanadi, suv bilan 2-3 marta suyultiriladi, pH 7,0-7,2 ga o‘rnatiladi va 0,1 MPa bosimda 15 minut yoki 0,05 MPa bosimda 20 minut sterillanadi.

Gidrolizlangan sutli agar

Gidrolizlangan sutga 1,5-2,0% agar qo'shiladi. Aralash qaynaguncha isitiladi va agar to'liq eriguncha saqlanadi. Issiq muhit paxta filtri orqali filtrlanadi, probirkalarga yoki kolbalarga quyiladi va 0,1 MPa bosimda 10-15 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi.

Ko'rsatkichli yog'siz sut

Qaynaguncha qizdirilgan yangi yog'siz sut lakmus damlamasi bilan qizg'in nilufar ranggacha bo'yaladi. Oqimli bug 'bilan sterilizatsiya qiling (1 kun oralig'ida 30 daqiqa davomida 3 marta) yoki 0,1 MPa bosimda 10 daqiqa davomida avtoklavda.

Sarflangan don bilan solodli sut

Malt wort tayyorlanadi, lekin sarflangan donni ajratmasdan (12-15% DM). Probirkalarga quyib, steril bo‘r (2-4%) qo‘shing va 0,05 MPa bosimda 30 minut davomida sterilizatsiya qiling.

Xamirturushli saxarozali agar

Aniqlash uchun Laktobakteriyalar Va Leykonostok 0,5% natriy xlorid, 10% saxaroza va 2% agar qo'shilgan xamirturushli suv asosida tayyorlangan muhitdan foydalaning; Atrof muhitning pH darajasi 6-6,5.

Unib chiqadigan muhit

25 g solod (arpa) nihollari 10 daqiqa davomida 500 ml suv bilan qaynatiladi va 45-50 ° C haroratgacha sovutilgandan so'ng, zig'ir xaltadan filtrlanadi, kaltaklangan tovuq oqsili bilan tozalanadi, yana qaynatiladi va filtrdan o'tkaziladi. koagulyatsiyalangan oqsilni olib tashlash uchun qog'oz filtri. Probirkaga 1,5% pepton, 2% qand, 2% agar solinadi va 0,05 MPa bosimda 30 minut sterillanadi.

Hammayoqni chorshanba

200 g tug'ralgan oq karam 1 litr suvga quyiladi, 10 daqiqa qaynatiladi, ikki qatlamli doka orqali siqiladi. Olingan suyuqlik buklangan filtrdan filtrlanadi, 2 marta suyultiriladi va qaynatmaga 2% glyukoza va 1% pepton qo'shiladi.Probirkalarga quyiladi va 0,05 MPa bosimda 15 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Qattiq muhitni olish uchun 2% agar qo'shing.

MRS muhiti (de Man muhiti)

Muhit tarkibiga, g/l: marganets sulfat 0,05, magniy sulfat 0,2, kaliy vodorod fosfat 2, ammoniy nitrat 2, natriy asetat 5, pepton 10, Difko xamirturush ekstrakti 5, go'sht ekstrakti 10, glyukoza-28, glyukoza-20 kiradi. 1 ml, o'rtacha pH 6-6,5. Muhit filtrlanadi va 1 kunlik interval bilan 3 marta 30 daqiqali fraksiyonel bosqichlarda yoki avtoklavda 0,05 MPa bosimda 20 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Tug'ish uchun suyuq, yarim suyuqlik va agar shaklida qo'llaniladi Leykonostok Va Laktobakteriyalar.

MRS media (A.A. Lanzier tomonidan o'zgartirilgan)

MRS-1 muhiti. 200 ml distillangan suvda eritiladi, g: marganets sulfat 0,05, magniy sulfat 0,2, sistein 0,2, kaliy vodorod fosfat 2, ammoniy sitrat 2, natriy asetat 5, glyukoza 20, pepton 10 ml, alohida eritiladi. oz miqdorda issiq distillangan suvda), xamirturush avtolizati (2-ilovaga qarang) 50 ml, jigar ekstrakti 100 ml. Suyuqlik hajmi distillangan suv bilan 500 ml ga o'rnatiladi va oldindan sterilizatsiya qilinmagan, pH 6,2-6,8 bo'lgan 500 ml Bogdanovning gidrolizlangan yog'siz suti qo'shiladi. Muhit filtrlanadi va qisman oqadigan bug 'bilan sterilizatsiya qilinadi.

MRS-2 muhiti. Shtammlarni muzey saqlash uchun mo'ljallangan Laktobakteriyalar. MRS-1 muhiti asosida 0,15% agar qo'shilgan holda tayyorlanadi. Natijada suyuq muhitga nisbatan ko'proq anaerob sharoitlar yaratib, yarim suyuq muhit hosil bo'ladi.

MRS-3 muhiti. Sut kislotasi bakteriyalarini aniqlashda "rangli seriyalar" uchun mo'ljallangan. U MPC-1 muhitiga asoslangan, ammo glyukoza, jigar ekstrakti va gidrolizlangan sutsiz. Uglevodlar va polihidrik spirtlar 0,5% miqdorida qo'shiladi. Qo'shilgan agar miqdori 0,15% ni tashkil qiladi. Atrof-muhitning pH qiymati 7,0. Ko'rsatkich xlorfenol qizil (0,004%). Indikator 1-2 ml etil spirtida eritiladi va sterilizatsiya qilishdan oldin muhitga qo'shiladi. Qizil xlorofenol pH 4,8-6,4 oralig'ida qizil-binafsha rangdan sariq rangga o'tishni beradi.

Jigar ekstrakti

Yangi mol go'shti jigari nozik kesiladi va suv bilan to'ldiriladi (1 kg jigar: 1 litr suv). 30 daqiqa qaynatib oling va filtrlang, so'ngra 20 daqiqa davomida 0,05 MPa bosim ostida sterilizatsiya qiling.

10 chorshanba

1 litr tozalanmagan pivo suti (8% DM) yoki 1 litr xamirturushli suv uchun g: marganets sulfat 0,05, magniy sulfat 0,2, sistin yoki sistein 0,2, kaliy vodorod fosfat 2, ammoniy sitrat 0,2, atsetat 0,2 sodiy, atsetat qo'shing. saxaroza 20, pepton 10, xamirturush avtolizati 50 ml. Har bir komponent ko'rsatilgan tartibda solod sharbatida eritiladi (uchun laktobakteriyalar) yoki xamirturushli suv (uchun Leykonostok). Birinchi holda, atrof-muhitning pH darajasi 5,5, ikkinchisida - 6,0. 1,5% agar qo'shing va oqayotgan bug' bilan sterilizatsiya qiling. Petri idishlariga steril bo'r qo'shilishi mumkin.

150 ml filtrlangan pomidor sharbatida qizdirilganda 0,75 ml Tween-80 va 37,5 g glyukoza eritiladi, 5 ml xamirturush avtolizati, 600 ml yog'siz sut (yog'i olingan sut) va 150 ml eritilgan 2% go'sht-peptonli agar qo'shiladi. . pH 7,0 ga o'rnatiladi. Muhit 6-7 ml li probirkalarga quyiladi, 0,05 MPa bosimda 20 minut sterillanadi, sovutiladi, o'rganilgan sut kislotasi bakteriyalari bilan emlanadi va ustiga 1-2 ml eritilgan 2% li go'sht-peptonli agar qo'yiladi. . Kuchsiz gaz hosil bo'lganda, tiqin asosiy muhitdan ajratiladi, kuchli gaz hosil bo'lganda, u yuqoriga ko'tariladi yoki probirkadan uchib ketadi.

Mukus hosil qiluvchi bakteriyalarni ko'paytirish uchun vosita

Variant 1. 10% saxaroza bilan go'shtli go'shtli agar.

Variant 2. Tarkibi, g/l: xom shakar 40, natriy vodorod fosfat 2, natriy xlorid 0,5, magniy sulfat 0,1, temir sulfat 0,01, kaltsiy karbonat 10, agar 20.

Chorshanba Vittenberi

Muhit tarkibiga, g/l kiradi: go'sht ekstrakti 5, pepton 5, xamirturush avtolizati 50 (yoki xamirturush ekstrakti 50), bromokrezolning 1,6% eritmasi binafsha 1,4 ml, pH 6,8-7,0. 1 kunlik interval bilan 3 marta 45 daqiqa davomida oqayotgan bug 'bilan sterilizatsiya qiling.

Chirituvchi asporogen bakteriyalarni etishtirish uchun vosita

Sutli agar

Yog'sizlangan sut 5 ml li probirkalarga quyiladi va oqayotgan bug 'bilan yoki avtoklavda 0,05 MPa bosimda 20 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi. Alohida 3% suvli agar tayyorlab, probirkalarga 4-5 ml quyib, 0,1 MPa bosimda 30 minut sterilizatsiya qilinadi. Agar eritiladi, steril ravishda sut bilan birlashtiriladi va sinov namunasi ilgari qo'shilgan Petri idishlariga quyiladi.

Yog 'hazm qiluvchi bakteriyalarni ko'paytirish uchun vosita

Variant I. 1 litr suvga 5 g pepton va 3 ml xamirturush avtolizatini qo'shing. 7,2-7,4 pH ni o'rnatgandan so'ng, 1,5% agar qo'shing. Agar eritiladi, muhit filtrlanadi va 1% issiq sut yog'i yoki zaytun moyi qo'shiladi. Aralashtiring, probirkalarga quying va 0,1 MPa bosimda 15 daqiqa sterilizatsiya qiling.

Variant 2. Go'shtli peptonli agarga 2-4% sut yog'i yoki zaytun moyi qo'shiladi. Probirkalarga 10 ml quyiladi va 0,1 MPa bosimda 20 minut sterilizatsiya qilinadi. Kuboklarga qo'shmasdan oldin vositani yaxshilab silkiting.

Bunday muhitga misol sifatida gidrolizlangan sutli jelatindir. Gidrolizlangan sutga 10% jelatin qo'shiladi (siz gidrolizlangan kazein yoki go'sht ekstrakti bulonidan foydalanishingiz mumkin), uni shishib ketishiga va 50 ° C haroratgacha qizdirishga ruxsat bering. Atrof muhitning pH darajasi 7,0-7,2. Muhit filtrlanadi va probirkalarda 0,075 MPa bosimda 20 minut davomida sterillanadi.

Sirka kislotasi bakteriyalarini ko'paytirish uchun vosita

Solodli sut yoki karam muhitiga 4 vol. % etil spirti va 20 birlik/ml antibiotik monomitsin, sut kislotasi bakteriyalarining o'sishiga to'sqinlik qiladi.

Anaeroblarni etishtirish uchun muhit

Winogradskiy chorshanba. 1 litr distillangan suvda eriydi, g: kaliy vodorod fosfat 1, magniy sulfat 0,5, marganets sulfat 20, glyukoza 20, natriy xlorid va temir xlorid - izlar.

Chorshanba Kita-Tarozzi. Qaynatilgan va suv bilan yuvilgan jigar yoki go'sht bo'laklari pastki qismini yopish uchun probirkaga tushiriladi. 1% glyukoza (pH 7,2-7,4) bo'lgan go'sht-peptonli bulonni "/2 hajmli probirkaga quying va floatni tushiring. Ustiga 1 sm balandlikdagi vazelin moyi qatlamini quying. 0,1 bosimda 15 daqiqa sterilizatsiya qiling. MPa 2 marta 30 daqiqa oraliqda.

Vodorod sulfidi ishlab chiqaradigan termofil anaeroblarni etishtirish uchun vosita

Muhit tarkibiga, g/l: pepton 10, temir sulfat 1, agar 20. To'ldirishdan oldin har bir probirkaga toza temir mix qo'yiladi. Shakar ekilganidan keyin probirkaga steril moyli jele qatlami quyiladi. Agar shakar tarkibida vodorod sulfidi hosil qiluvchi bakteriyalar bo'lsa, agarda xarakterli qora koloniyalar hosil bo'ladi.